两种伏立康唑的真菌药敏试验对比研究

孙银俊

摘要：目的  对两种伏立康唑的真菌药敏试验进行对比，发现两种不同检测手段的敏感性差异。方法  我们使用MIC法（ATB FUNGUS）和KB法（纸片扩散法）检测100株我院住院患者临床体液标本分离的致病性念珠菌，分析2种不同方法的药敏试验结果，并进行横向比较。结果  我们发现对于热带念珠菌MIC法提示敏感的为52株，K-B法提示敏感的为68株，其中16株为假敏感，我们对差异进行统计学比较，发现差异（P<0.05）;MIC法提示耐藥的为24株，K-B法提示耐药的为28株，其中4株为假耐药，我们对差异进行统计学比较，发现差异（P<0.05）。结论  MIC法检测准确性高于KB法，各大医院微生物实验室医技人员应该采取MIC法来提高临床诊断，为医生提供准确的实验室检测结果，及时反映病情发展，为提供患者针对性性更强的高效抗真菌药物。

关键词：伏立康唑;药敏试验;真菌;对比研究

随着人口的老年化，肿瘤病人的增多，广谱抗菌药物的广泛使用，糖皮质激素的使用、免疫抑制剂适应症的放宽，医源性操作增多如支气管镜检测、腹腔镜、膀胱镜、各种穿刺术）造成免疫低下人群逐渐增多，人体器官的念珠菌感染比例有上升趋势，且念珠菌的耐药性同时上升，限制了医疗工作者的临床药物选择。伏立康唑是近年来在临床上使用非常广泛的三唑类抗真菌药物，经过在国内20余年的使用，以及国外各大随机双盲的研究中被证实是十分有效的抗各类真菌药品，且安全性也得到了非常好的保证。目前临床上常用的用于检测抗真菌药物的药敏试验有2种，一种是 MIC法（即ATB FUNGUS 3试剂），另一种是K-B法（丹麦Rosco伏立康唑药敏纸片扩散法），目前各大医院暂无对2种体外敏感性试验的评价及对比，本次研究的目的为对两种伏立康唑的真菌药敏试验进行对比，发现两种不同检测手段的敏感性差异。

1.材料与方法

1.1 菌株来源 选择我院各大科室的住院病人及门诊患者，收集时间为2007年11月至2013年11月，共计150例患者，将患者体液标本（痰液、尿液、大便、胸水、腹水等）送我院中心微生物实验室检查，分离得出100株念珠菌，分别使用K-B法及MIC法观察记录药敏试验结果。

鉴定仪及鉴定卡  念珠菌采用科玛嘉念珠菌显色法，由法国科玛嘉公司生产，鉴定仪采用法国生物梅里埃埃公司鉴定仪。鉴定卡使用YBC卡，ATB FUNGUS 3真菌药敏试剂盒，伏立康唑药敏纸片为丹麦Rosco公司产品。

1.3 方法  科玛嘉显色培养基上接种分离出的念珠菌单个菌落， VITEK32细菌鉴定仪以及配套的YBC卡鉴定念珠菌，结合显色和仪器鉴定的结果，将念珠菌鉴定到种。分别用MIC法（我们设置MIC≤1为敏感）和伏立康唑K-B法（抑菌环直径≥14设置为敏感）进行药敏试验。操作人员按照ATB FUNGUS 3试剂盒使用说明书以及纸片扩散法药敏试验操作规范流程进行检验工作。念珠菌质控株采用ATCC90028质控株。

2结果

2.1 白色念珠菌的菌株分布特点

我们对100株念珠菌进行分析，结果显示热带念珠菌占80株（80%），白色念珠菌4株（4%），光滑念珠菌6株（6%），克柔念珠菌4株（4%），近平滑念珠菌4株（4%）、葡萄牙念珠菌3株（3%）和无名念珠菌念珠菌3株（3%）。

2.2 MIC法与K-B法对念珠菌体外抗菌活性对比

我们发现对于热带念珠菌MIC法提示敏感的为52株，K-B法提示敏感的为68株，其中16株为假敏感，我们对差异进行统计学比较，发现差异（P<0.05）;MIC法提示耐药的为24株，K-B法提示耐药的为28株，其中4株为假耐药，我们对差异进行统计学比较，发现差异（P<0.05）。

3 讨论

我们对100株念珠菌进行分析，结果显示热带念珠菌占80株（80%），白色念珠菌4株（4%），光滑念珠菌6株（6%），克柔念珠菌4株（4%），近平滑念珠菌4株（4%）、葡萄牙念珠菌3株（3%）和无名念珠菌念珠菌3株（3%）。表明本院目前念珠菌的感染中，仍以热带念珠菌感染居首位，国外也有同样报道，我们报道与其一致。我们本次研究显示白色念珠菌感染率处于第二位，与全球多国家监测结果显示，2001-2010 年念珠菌感染中白色念珠菌占15-20%，结果相似。白色念珠菌是临床最为常见的酵母，为条件致病菌，是一种特殊的双相型真菌，毒力最强，和其他微生物处于平衡状态。白色念珠菌是人体正常菌，直接镜检阳性有诊断意义，在普通培养基以孢子相生长为主，大量菌丝说明念珠菌处于致病状态。白色念珠菌侵入机体后，以孢子相与菌丝相二者混合出现，这样的形态与感染性和致病性相关。

造成MIC法（ATB FUNGUS）和KB法（纸片扩散法）的药物敏感差异我们分析如下：（1）首先是测定方法问题，KB法与宿主体内存在白细胞总数以及白细胞吞噬细胞对真菌的吞噬影响、感染机体伤口持续感染都会引起误差。（2）由于药物难于穿透机体的血脑屏障与肺泡膜呼吸屏障，造成药物不能与病菌作用有效结合。（3）最后，念珠菌对不同的抗真菌药的耐药性有很大差别，不同的念珠菌类型对同一抗真菌药物的耐药性差别也很大。因此临床上使用的KB法体外的药物敏感试验并不能完全指导临床的治疗用药。MIC法检测准确性高于KB法，各大医院微生物实验室医技人员应该采取MIC法来提高临床诊断，为医生提供准确的实验室检测结果，及时反映病情发展，为提供患者针对性性更强的高效抗真菌药物。

参考文献：

[1]李新华，张玉珍，高秀华1医院真菌感染高危因素调查分析[J]中华医院感染学杂志， 2005， 15（3）： 280-2811

[2] GhannoumMA， Kuhn DM1Voriconazole-better chances for patients with invasivemycoses[J]1Eur JMed Res， 2002， 31（5）： 242-2561

[3]赵德军，付维婵1住院患者呼吸道感染白色念珠菌耐药监测[J]检验医学与临床， 2008， 5（2）： 27-281