子宫内膜癌组织中MMR蛋白表达缺失的临床意义

何蓉，易静，何小清，李君怡

（萍乡市妇幼保健院病理科，江西 萍乡 337000）

子宫内膜癌是女性生殖系统常见恶性肿瘤之一，其病因尚未明确，多认为与生活方式、遗传等因素密切相关，而随着生活模式的转变，该病发生率呈逐年升高的趋势[1-2]。错配修复（MMR）蛋白是修复DNA 错配重要因子，可纠正DNA 复制过程中出现的错误碱基对，维持基因组织稳定性与完整性，预防基因突变，抑制肿瘤产生[3]。MMR蛋白缺失对推进子宫内膜癌疾病发展具有重要意义，但该观点尚未得到临床证实。基于此，本研究旨在探讨子宫内膜癌组织中MMR蛋白表达缺失的临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 回顾性分析本院2016 年2 月至2019 年12月收治的62例子宫内膜癌患者的临床资料，年龄32～58岁，平均年龄（43.26±3.24）岁；其中肿瘤浸润至黏膜内23 例，肿瘤浸润至浅肌层26例，肿瘤浸润至深肌层13例；无淋巴结转移59 例，伴有淋巴结转移3 例；FIGO 分期：Ⅰ期29 例，Ⅱ期17例，Ⅲ期11例，Ⅳ期5例；高分化子宫内膜癌37例，中分化子宫内膜癌16例，低分化子宫内膜癌9例。患者均对本研究知情同意并自愿签署知情同意书；本研究经本院伦理委员会审核批准。纳入标准：均经手术治疗，且经手术病理确诊；术前未应用激素类药物；临床资料完整。排除标准：严重心、肝、肾等重要脏器功能不全；合并其他恶性肿瘤；合并感染性疾病；哺乳期或妊娠期女性；凝血功能障碍。

1.2 方法 选取患者的石蜡病理组织，连续切取厚度为4 μm 的薄片，应用Envision 法进行免疫组化；将石蜡切片脱蜡至水，应用PBS 液进行冲洗后，采用pH 9.0 的EDTA 进行抗原修复；修复后将组织切片置于3%H2O2水中，于室温下孵育10 min后，应用PBS液进行冲洗；于切片组织上滴加正常血样血清工作液，在室温环境下孵育20 min后，倾去液体，并分别滴加鼠抗人MLH1单克隆抗体、鼠抗人MSH2单克隆抗体、鼠抗人MSH6单克隆抗体、鼠抗人PMS2单克隆抗体，于4 ℃环境下孵育过夜后，应用PBS 液清洗；添加辣根酶标记链霉卵白素工作液，于37 ℃环境下孵育15 min 后，应用PBS 液清洗；DAB 显色后，应用自来水清洗，并以苏木素对细胞进行复染，采用中性树胶封固切片。免疫组化试剂盒及MLH1、MSH2、MSH6、PMS2 均选自福州迈新生物技术开发有限公司。

1.3 诊断标准 MMR蛋白阳性：细胞核明确着色；MMR蛋白阴性：细胞核不着色；阳性对照：正常子宫内膜腺上皮细胞、血管内皮细胞、间质细胞、淋巴细胞MMR蛋白着色情况。

1.4 观察指标 观察MMR蛋白在病理组织中的表达情况，并分析MMR蛋白表达缺失与不同年龄、病理类型子宫内膜癌关系。

1.5 统计学方法 采用SPSS 18.0统计软件进行数据分析，计数资料用[n（%）]表示，比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MMR 蛋白在子宫内膜癌中表达情况 62 例患者病理组织中，MMR 蛋白表达缺失率为29.03%（18/62），其他子宫内膜癌组织MMR蛋白表达正常。

2.2 MMR蛋白在不同年龄、病理类型子宫内膜癌中的表达情况 MMR蛋白表达缺失在不同年龄段子宫内膜癌中比较差异无统计学意义；MMR蛋白表达缺失在不同肌瘤浸润深度、淋巴结转移、FIGO 分期、肿瘤分化程度子宫内膜癌中比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 MMR蛋白在不同年龄、病理类型子宫内膜癌中的表达情况[n（%）]Table 1 The expression of MMR protein in endometrial cancer of different ages and pathological types[n(%)]

3 讨论

子宫内膜癌是女性常见及多发的恶性肿瘤，好发于围绝经期或绝经后女性，具有较高病发率及致死率，严重影响女性身心健康，甚至威胁生命安全[4]。有研究显示，伴有林奇综合征家族史女性子宫内膜癌发病率风险高达60%，而林奇综合征是由MMR 蛋白缺失导致的常染色体显性遗传性疾病，因此，明确MMR蛋白缺失与子宫内膜癌病情发展关系，对临床诊治具有重要意义[5-6]。

本研究结果显示，62例子宫内膜癌患者病理组织中，MMR蛋白表达缺失率为29.03%，且MMR蛋白表达缺失在不同年龄段子宫内膜癌中比较差异无统计学意义，在不同肌瘤浸润深度、淋巴结转移、FIGO分期、肿瘤分化程度子宫内膜癌中比较差异有统计学意义（P＜0.05），表明MMR蛋白缺失与子宫内膜癌患者年龄无关，但在肿瘤浸润、淋巴结转移、疾病分期、肿瘤分化程度中具有重要作用[7-8]。分析原因为，MMR蛋白于DNA修复过程中具有重要作用，主要以复合物形式修复生理功能，复合物主要分为MutSα、MutSβ两种，其中MutSα主要由MSH6、MSH2组成，其两者可结合MLH1、PMS2复合物，修复单碱基错配，MutSβ主要由MSH2、MSH3组成，其两者结合MLH1、PMS2复合物后，可修复DNA大缺失或突变环[9-10]。在关键调节途径中，若DNA错配修复功能丢失，则易导致调节途径丢失调节功能，进而影响正常细胞生长与分裂，促进肿瘤形成与发展。而MMR蛋白丢失率越高，则子宫内膜肿瘤发展速度越快，进而浸润深度、肿瘤分期越高，分化程度越低，且多伴有淋巴结转移情况[11-12]。

有研究[13]显示，随着年龄的增加，MMR蛋白缺失率也随之升高，故在不同年龄子宫内膜癌患者中，MMR蛋白缺失情况比较差异无统计学意义，但本研究选取最大年龄患者仅为58岁，故难以证实该研究结论，临床仍需扩大选取患者年龄范围，以探讨MMR蛋白表达情况与患者年龄关系。

综上所述，MMR 蛋白在深肌层浸润、高FIGO 分期、淋巴结转移、低分化子宫内膜癌组织中表达缺失率较高，对推进子宫内膜癌疾病发展具有重要作用，建议临床定期检测子宫内膜癌患者MMR蛋白表达情况。