肿瘤患者外周血T 淋巴细胞亚群及NK细胞比例检测的价值

伏开新

（灌云县人民医院检验科，江苏 灌云 222200）

肿瘤（tumor）目前已经成为临床中的常见病，而肿瘤的发生与机体免疫功能密切相关[1]。人体的免疫细胞种类较多，其中外周血T 淋巴细胞以及自然杀伤细胞（NK）具有重要的作用。T 淋巴细胞在肿瘤的发生、发展以及抗肿瘤过程中具有识别、标记以及清除肿瘤细胞的效果，而自然杀伤细胞不仅能起到抗肿瘤、免疫调节的效果，同时在自身免疫性疾病的发生、发展中均有所参与[2-4]。因此，通过对淋巴细胞亚群的评估，有利于临床医师了解患者机体的免疫情况，进一步提高肿瘤诊断的准确性[5]。本研究主要分析肿瘤患者外周T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例检测的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018 年1 月-2020 年12 月灌云县人民医院收治的216例肿瘤患者作为研究组，另选取同期200 名正常体检人员作为对照组。研究组中男性122例，女性94例；年龄18～75 岁，平均年龄（53.39±8.45）岁；疾病类型：肝癌64例、肺癌40例、胃癌58例、乳腺癌23例、鼻咽癌31例；对照组中男性113 名，女性87 名；年龄18～76 岁，平均年龄（54.05±8.36）岁。两组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，所有研究对象知情同意并签署知情同意书。

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准 ①研究组患者均经影像学、病理检查等确诊，对照组均为健康者；②年龄≥18 岁。

1.2.2 排除标准 ①存在严重脏器功能障碍者；②精神病史或认知障碍者。

1.3 方法 清晨抽取所有研究对象空腹状态下肘静脉血5 ml，经抗凝处理后送检。检测时从试管中提取100 μl 抗凝血，避光加入20 μl 不同荧光标记的单克隆抗体，经过充分混合均匀后在室温下避光标记染色，持续20 min。再加入2 ml 溶血素，静待10 min，以1000 r/min的速率持续离心5 min，弃去上清液。加入洗涤剂500 μl 重悬细胞，通过流式细胞仪进行检测。

1.4 观察指标 ①比较两组外周血T 淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD19+）以及NK细胞；②比较研究组不同肿瘤类型、年龄、性别外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞。

1.5 统计学方法 采用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析。计量资料以（）表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析；计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验。以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较 研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及CD19+水平低于对照组，NK细胞比例水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；而两组CD8+比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 两组外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较（，%）

表1 两组外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较（，%）

2.2 研究组不同肿瘤类型外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比较 不同肿瘤类型CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD19+、NK细胞比例水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；而不同肿瘤类型CD8+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），其中鼻咽癌CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于其他肿瘤，NK细胞比例水平高于其他肿瘤；乳腺癌CD4+/CD8+水平低于其他肿瘤；胃癌CD3+水平高于其他肿瘤，CD19+水平低于其他肿瘤，见表2。

表2 研究组不同肿瘤外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较（，%）

表2 研究组不同肿瘤外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较（，%）

2.3 研究组不同年龄段外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较 ＜60 岁CD3+、CD4+水平低于≥60 岁，NK细胞比例水平高于≥60 岁，差异有统计学意义（P＜0.05）；而不同年龄段CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 研究组不同年龄段外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比较（，%）

表3 研究组不同年龄段外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比较（，%）

2.4 研究组不同性别外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较 男性CD3+、CD4+水平低于女性，NK细胞比例水平高于女性，差异有统计学意义（P＜0.05）；而不同性别CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。

表4 研究组不同性别外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较（，%）

表4 研究组不同性别外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例比较（，%）

3 讨论

T细胞介导的细胞免疫是机体抵抗肿瘤细胞的主要方式之一，而通过外周血淋巴细胞亚群的检测，能够有效反映出机体的免疫状态[6]。外周血T 淋巴细胞亚群中含有的细胞较多，目前医学界研究较多的包括CD3+、CD4+以及CD8+。NK细胞在免疫调节中主要负责非特异性杀伤肿瘤细胞，在活化作用下，能够促进IFN-α、IFN-γ、IL-2 等细胞因子的分泌，起到抗肿瘤的效果，同时还能对吞噬细胞的功能进行调节[7,8]。B细胞是机体产生抗体的主要细胞，在淋巴细胞表面存在多种跨膜抗白，其中CD19+主要负责对B细胞活化、增殖的调节，并能够参与到B细胞的活化与信号传导过程中[9,10]。

本研究结果发现，研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及CD19+水平低于对照组，NK细胞比例水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；而两组CD8+比较，差异无统计学意义（P＞0.05），提示肿瘤患者普遍存在免疫抑制状态，在该状态下，机体识别与杀伤突变细胞的能力产生了一定的变化，导致免疫功能失调。在肿瘤细胞微环境中，含有大量能够抑制CD4+细胞的免疫抑制因子，且CD8+细胞比例会有所上升，导致CD4+/CD8+下降，引发免疫抑制，出现免疫功能紊乱，机体难以有效清除肿瘤细胞，进一步促进了肿瘤细胞的增殖，为病情发展提供了条件[11，12]。当T 淋巴细胞受到抑制时，NK细胞比例有明显升高，证明NK细胞的免疫反应能力增强，可能是由于细胞免疫功能促进了NK细胞的增殖[13]。

本研究通过对不同肿瘤类型外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例变化进行研究，结果发现不同肿瘤类型CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD19+、NK细胞比例水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；而不同肿瘤类型CD8+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），其中鼻咽癌CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于其他肿瘤，NK细胞比例水平高于其他肿瘤；乳腺癌CD4+/CD8+水平低于其他肿瘤；胃癌CD3+水平高于其他肿瘤，CD19+水平低于其他肿瘤，提示随着恶性肿瘤的增殖、侵袭，组织来源、恶性程度等均会发生一定的变化，导致细胞免疫功能也出现了不同的变化[14]。鼻咽癌细胞的表面特异性受体结构具有一定的特殊性，与其他肿瘤的免疫逃逸机制有明显区别，效应性T细胞难以准确识别、结合靶点，抑制了CD3+、CD4+等细胞的增殖[15-17]。此外，本研究结果还发现，＜60 岁CD3+、CD4+水平低于≥60 岁，NK细胞比例水平高于≥60 岁，差异有统计学意义（P＜0.05）；而不同年龄段CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；男性CD3+、CD4+水平低于女性，NK细胞比例水平高于女性，差异有统计学意义（P＜0.05）；而不同性别CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），说明外周T 淋巴细胞亚群与NK细胞比例在不同年龄、性别的肿瘤患者中也存在一定的差异，临床医师应结合患者实际情况进行诊断，有利于提高肿瘤诊断的准确性[18]。

综上所述，外周血T 淋巴细胞亚群以及NK细胞比例检测在肿瘤患者中具有较高的应用价值，不仅能够提高肿瘤的检出率，还能为鉴别诊断提供一定的参考，同时也是评价临床疗效的重要指标。