白头翁口服液联合硫酸新霉素抑制大肠杆菌效果研究

张月娇，孙营，黄占山

（保定冀中药业有限公司，河北保定 071000）

鸡大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的急慢性细菌感染，主要表现为心包炎、腹膜炎、气囊炎及败血症等症状，发病率为40%～60%，病死率达100%。同时感染大肠杆菌的鸡群采食量和增重降低、料肉比增高、发育不良、免疫低下及产蛋率下降，给养殖业造成巨大经济损失。因大肠杆菌血清型多，并且疫苗交叉保护弱，因此疫苗防控大肠杆菌病效果不理想。临床中大肠杆菌病主要使用抗生素治疗，常用的抗生素有硫酸新霉素、硫酸安普霉素及复方阿莫西林等。随着抗生素高剂量的不合理使用，大肠杆菌耐药菌株出现，对抗生素的敏感性降低，抗生素治疗大肠杆菌病的临床效果越来越差。因中兽药具有“多成分、多靶点、多途径”的作用特点，所以不易产生耐药性，并且研究报道中药能使产生耐药性的菌株耐药性降低，使其恢复对抗生素的敏感性。白头翁口服液由白头翁、黄连、秦皮及黄柏四味药组成，具有清热解毒、凉血止痢的功效，现代药理表明具有抗菌、抗病毒、抗炎及解热镇痛作用。白头翁口服液临床中主要用治疗腹腔感染和细菌性痢疾。本试验采用二倍梯度稀释法研究白头翁口服液联合硫酸新霉素对大肠杆菌抑制作用，以期为临床中有效治疗大肠杆菌病提供参考依据。

1 试验材料和方法

1.1 试剂和药物

普通琼脂、麦康凯琼脂、营养肉汤培养基（购于上海博微生物科技公司）；白头翁口服液和硫酸新霉素可溶性粉（保定冀中药业有限公司）；大肠杆菌(临床分离并经生理生化和16sRNA鉴定为大肠杆菌)。

1.2 方法

1.2.1 大肠杆菌菌液制备

将试管保存的出血性大肠杆菌菌株划线活化，将活化的大肠杆菌接种到LB培养基中180转/分钟，37℃培养12小时，得大肠杆菌的菌液。

1.2.2 白头翁口服液联合硫酸新霉素可溶性粉对大肠杆菌的抑菌率测定

试验分为5组，分别为空白、菌液对照、白头翁口服液组（300千克水/250毫升）、硫酸新霉素可溶性粉组（150千克水/100克）、白头翁+新霉素组(300千克水/250毫升+150千克水/100克)，每组设置3个重复。试管中加入LB培养基8毫升，除空白对照组外，其他组按2%的接种量接种大肠杆菌，每组按照药物使用剂量添加制剂和无菌水，配制好相应浓度后，置于37℃培养箱中培养20小时，结束后转入冰水浴中终止大肠杆菌生长，于600纳米波长下测定吸光度值，计算抑菌率。抑菌率=（OD对照-OD实验）/OD对照×100

2 试验结果

不同组大肠杆菌在LB培养基中培养20小时如图1，各药物组对大肠杆菌的抑菌率如图2，由图2可知，白头翁和硫酸新霉素可溶性粉对大肠杆菌都有抑杀作用，但硫酸新霉素的抑菌率仅为42.1%，说明大肠杆菌对硫酸新霉素已经出现一定耐药性，而白头翁口服液联合硫酸新霉素可溶性粉组抑菌率显著高于硫酸新霉素可溶性粉组和白头翁口服液组，说明白头翁口服液能够降低大肠杆菌对硫酸新霉素的耐药性，提高新霉素的杀菌功效。

图1 不同组大肠杆菌试管培养20小时

图2 不同药物对大肠杆菌抑菌率

3 讨论

鸡大肠杆菌病发病率和死亡率高、危害大，且常继发于病毒病或细菌病，给养殖业带来巨大经济损失。应用抗生素是防治大肠杆菌病的有效措施，但由于临床中使用剂量不当、不合理用药及不注意轮换用药，使大肠杆菌耐药严重。白头翁口服液具有清热燥湿，凉血止痢功效，治疗大肠杆菌腹泻效果显著。本试验采用二倍梯度稀释法研究白头翁口服液联合硫酸新霉素对大肠杆菌抑制作用，试验结果表明白头翁口服液能够使大肠杆菌耐药菌株恢复对硫酸新霉素可溶性粉的敏感性，因此，临床中可以采用白头翁口服液联合新霉素治疗大肠杆菌病。