流式细胞仪检测慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群的意义分析

柳国强 营口经济技术开发区中心医院（营口市第六人民医院） （辽宁 营口 115007）

内容提要： 目的：探讨流式细胞仪检测慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群的意义。方法：2017年8月～2019年8月选择本院收治的慢性乙型肝炎患者51例作为观察组，健康体检者51例作为对照组，均采用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群，组间比较检测结果。结果：两组CD3+比较无统计学意义，P>0.05；观察组CD4+及CD4+/CD8+显著低于对照组，CD8+显著高于对照组，P<0.05。结论：针对慢性乙型肝炎患者采用流式细胞仪检测，明确T淋巴细胞亚群变化，可判断患者多伴随免疫功能低下，应重视免疫改善治疗，促使病情康复，诊治价值较高。

慢性乙型肝炎主要是指患者感染乙型肝炎病毒引起的感染性疾病，潜伏期较长，导致患者出现轻度发热、乏力、消化道症状、黄疸及肝区疼痛的症状[1]。由于慢性乙型肝炎发病与机体细胞免疫功能密切相关，而T淋巴细胞亚群调节紊乱则为乙型肝炎病毒持续复制的主要原因，因此为准确评估病情进展，明确预后，需重视机体T淋巴细胞亚群检测，尤其如今流式细胞仪应用普遍，可快速准确检测，实现尽早诊治，改善预后[2]。为此，本次研究对流式细胞仪检测慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群的意义进行了探讨，分析如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

2017年8月～2019年8月选择本院收治的慢性乙型肝炎患者51例作为观察组，均符合肝病学会联合修订的病毒性肝炎诊断标准，血清谷丙转氨酶超过正常2倍以上。其中男性31例，女性20例，年龄24～65岁，平均（45.72±3.08）岁，病程1～9年，平均（4.17±0.76）年；选择健康体检者51例作为对照组，男性29例，女性22例，年龄24～60岁，平均（45.08±3.12）岁；两组均知晓本次研究内容及目的，且自愿签署知情同意书。排除其他类型肝炎患者、合并肾功能损伤、心脏病及免疫缺陷型疾病患者等。两组基本资料比较无统计学意义，P>0.05。

1.2 方法

慢性乙型肝炎患者51例和健康体检者51例均采用Coulter Epics XL流式细胞仪进行检测，选择Immunotech公司三色荧光标记的单克隆抗体CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5，OptiLyse C免洗溶血素原液。空白对照为鼠IgGI-FTTC/IgG1-PE/IgG1-PC5。检测前做好健康指导，取外周静脉血2mL作为标本，经乙二胺四乙酸抗凝，分为三支试管，1号管进行白细胞计数及分类检测，2号管加入三标的单克隆抗体，3号管加入对照20μL，三支试管均加入全血100μL，混匀后于室温下孵育15min，再均加入免洗溶血素500μL，混匀后于室温下孵育15min，加入缓冲液，混匀后于室温下孵育10min。随后采用流式细胞仪进行检测，将3号对照管作为空白定标，淋巴细胞设门，计算5000个淋巴细胞，计算各亚群占淋巴总数的百分比。

1.3 观察指标

比较两组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+检测结果。

1.4 统计学分析

2.结果

分析表1可知，两组CD3+比较无统计学意义，P>0.05；观察组CD4+及CD4+/CD8+显著低于对照组，CD8+显著高于对照组，P<0.05。

表1. 两组T淋巴细胞亚群检测结果比较(±s)

表1. 两组T淋巴细胞亚群检测结果比较(±s)

组别 例数 CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%)CD4+/CD8+观察组 51 60.52±5.96 33.94±6.22 30.35±5.73 1.12±0.29对照组 51 60.83±6.03 40.29±6.34 21.43±4.83 1.79±0.46 t 0.26 5.10 8.50 8.79 P>0.05 <0.05 <0.05 <0.05

3.讨论

根据临床研究可知，乙型肝炎病毒可经母婴、血液和血液制品、破碎皮肤黏膜及性接触传播，而我国乙型肝炎病毒以家族性传播多见，即母婴传播、性接触传播等[3]。虽然如今人们健康意识提升，但对乙型肝炎的防范仍存在不足，未能接种乙肝疫苗阻断乙肝垂直传播，导致发病率未能良好控制[4]。慢性乙型肝炎患者会因为自身免疫反应导致肝细胞损伤，存在细胞免疫功能紊乱，导致机体无法清除乙肝病毒，因此为准确评估患者病情进展，为治疗提供可靠的参考依据，需重视免疫功能判断[5]。T淋巴细胞亚群作为测定机体细胞免疫功能的重要指标，是评价病情及监测预后的重要指标，可采用流式细胞术测定[6,7]。CD4+作为辅助性T细胞，可促进B细胞等其他免疫细胞的增殖和分化，具有调节体液和细胞免疫作用[8]。CD8+细胞包含细胞毒性T淋巴细胞和抑制性T细胞。由于慢性乙型肝炎患者感染后难以清除病毒，而CD4+及CD4/CD8+若降低，则提示机体细胞免疫功能降低，免疫功能与机体病毒清除能力密切相关[9]。而且慢性乙型肝炎患者参与免疫反应的免疫活性细胞不足，T淋巴细胞明显激活，多伴随CD3+降低，CD4+降低，CD8+升高，CD4+/CD8+异常，尤其<1.4表明细胞免疫功能紊乱。本次研究结果显示两组CD3+比较无统计学意义，P>0.05；观察组CD4+及CD4+/CD8+显著低于对照组，CD8+显著高于对照组，P<0.05，提示针对慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群存在异常，体现为CD4+降低，CD8+升高，CD4+/CD8+异常，即机体免疫功能紊乱，需重视对患者免疫功能改善治疗，可采取抗病毒药物联合免疫增强剂治疗，促使患者尽早康复。

综上所述，流式细胞仪检测慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群具有较高的价值，依据患者病理特征分析T淋巴细胞亚群变化，可判断免疫功能与预后的密切关系，为诊治提供可靠依据。