急重症胰腺炎合并肝损伤患者IL-10、TGFβ及其mRNA水平与肝功能指标的相关性

焦芳芳 张伟 武云珍

急重症胰腺炎(SAP)是一种发生于腹部的常见外科急症，患者早期发病隐匿，但可较为迅速发展导致器官功能损害，使得患者院内死亡率增加[1]。肝损伤是SAP患者较常见表现，影响机体代谢进而增加其病死风险[2]。目前研究表明，SAP多由胰腺组织自身消化出现局部炎症反应而引起，因而促炎细胞因子和炎症介质在其中发挥举足轻重的作用[3-4]。本研究分析SAP合并肝损伤患者外周血中白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGFβ)及其转录物(mRNA)与肝功能指标的相关性，结果如下。

资料与方法

一、基础资料

收集东营市人民医院2018年10月至2020年10月60例SAP患者，根据其有无合并肝损伤分为合并组(合并肝损伤)及SAP(未合并肝损伤)组，每组30例，另纳入同期体格者30名(对照组)；其中合并组：男、女分别为17、13例；年纪48～72(54.34±8.67)岁；体质量指数17～26(22.45±2.23)kg/m2；SAP组：男、女分别为19、11例；年纪47～71(52.86±7.74)岁；BMI 17～25(22.67±2.18)kg/m2；对照组：男、女分别为18、12名；年纪44～70(55.10±7.96)岁；BMI 17～26(23.05±2.64)kg/m2；对比两组人口学及病理信息特征，差异无统计学意义(P>0.05)，本研究在伦理审核后方通知患者进行相关操作。

二、纳入与排除标准

(一)纳入标准 (1)参照指南[5]确诊，对照组经检查无明显异常；(2)44～72岁；(3)SAP患者病程<72 h；(4)患者(或志愿者)和家属知晓试验方法和目的且签字同意。

(二)排除标准 (1)既往存在慢性肝炎、肝硬化或其他类型慢性肝病；(2)脑、心、肾器质性受损；(3)外部能量损伤或因手术操作不当引起的SAP；(4)患有恶性肿瘤，生存时间少于3个月；(5)院外已使用生长抑素或免疫抑制剂类药物。

三、方法

(一)血液采集 在所有患者(或志愿者)入院时即刻采集空腹静脉血，收取5 mL血液后以2 000 r/min速度离心，ELISA检测血清IL-10、TGFβ 水平，电化学发光免疫分析法检测肝功能，仪器为Beckman LX-20全自动生化分析仪及配套试剂盒；IL-10 mRNA、TGFβmRNA水平在提取静脉血转录物后进行反转录，采用PCR进行基因扩增，通过软件分析其扩增情况并取平均值作为测量结果。

(二)肝损伤测定 肝损伤测定主要通过SAP患者ALT、AST水平测量结果进行区分，当ALT或(和)AST>40 U/L时可判定为合并肝损伤，ALT和AST均≤40 U/L时则未合并肝损伤[6]。

(三)观察指标 (1)比较三组IL-10、TGFβ、IL-10mRNA、TGFβmRNA检测结果；(2)比较三组AST、ALT、TBil、GGT、ALP水平；(3)通过Spearman系数分析SAP合并肝损伤患者肝功能指标AST、ALT、TBil、GGT、ALP与IL-10、IL-10 mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平的相关性。

四、统计学方法

结 果

一、三组IL-10、TGFβ及其mRNA水平比较

三组IL-10、TGFβ及其mRNA水平比较呈递减趋势，合并组最高(P<0.05)。见表1。

表1 三组IL-10、TGFβ及其mRNA水平比较(±s)

二、三组肝功能指标比较

三组肝功能相关指标呈递减趋势，合并组肝功能指标水平高于SAP组、对照组(P<0.05)。见表2。

表2 三组肝功能比较(±s)

三、肝功能与IL-10、TGFβ及其mRNA的关系

SAP合并肝损伤患者IL-10、IL-10mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平与AST、ALT、GGT、ALP、TBil水平呈明显正相关(P<0.05)。见表3。

表3 肝功能与IL-10、TGFβ及其mRNA的关系

讨 论

炎症介质会在全身发生炎性反应时被大量释放于外周血，抗炎因子在对抗炎性反应时会在一定程度上阻挠机体对病原体所造成的免疫作用，因而发生代偿性抗炎症反应综合征[7-8]。SAP患者肝脏会在IL-10、TGFβ的引导下合成纤连蛋白及成纤维细胞调节胶原，促进组织纤维化的发生、发展[9]。

本研究结果显示，三组IL-10、IL-10mRNA水平比较合并组>SAP组>对照组，同时合并组TGFβ、TGFβmRNA更高，提示SAP合并肝损伤患者以上指标异常表达。IL-10有抗炎和诱导免疫的作用。既往研究显示，患者在肝脏发生损伤时IL-10mRNA表达增加从而使得单核巨噬细胞失去活动，抑制T细胞的分化及增生，免疫监视功能被削弱，同时IL-10过量分泌反而增强其负向调节功能，使机体免疫平衡受到破坏[10]。TGFβ能在促进细胞外基质生成的同时阻挠其降解，使得肝细胞的再生和损伤受到抑制[11]。患者因SAP而引起肝脏损伤时，坏死的细胞在细胞膜破裂和激活的炎症细胞分泌细胞因子作用下引起肝脏炎性反应，重大损伤发生后肝细胞重新进入增殖模式，而TGFβmRNA参与其中并精密调控肝再生，这与于宁[12]等的研究相一致。

合并组肝功能指标水平显著高于另2组，提示SAP合并肝损伤患者外周血中肝细胞指标均会出现明显异常。当患者发生急性胰腺炎时，胰腺水肿继而堵塞胆道，使得肝细胞受到损害，长时间的梗阻使得转氨酶活性变化规律发生异常，释放各种酶类、氧自由基等[13-14]。GGT分泌于肝细胞的胞浆毛细血管一侧和整个胆管系统，肝细胞因为炎症因子肿胀或胆汁压迫刺激影响下而增加分泌[15]。

SAP合并肝损伤患者IL-10、IL-10mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平与肝功能水平呈明显正相关，提示SAP合并肝损伤患者者IL-10、TGFβ及其mRNA水平与肝功能指标相关。考虑因SAP引起肝损伤，而人体免疫调控机制通过分泌IL-10、TGFβ来进行肝脏免疫调控，但仍需进一步研究证实。