白花玉簪组培快繁技术研究

2021-10-17张碧薇樊继德陆信娟刘灿玉赵永强

湖南农业科学 2021年9期

张碧薇，樊继德，陆信娟，刘灿玉，赵永强，杨峰

（江苏徐淮地区徐州农业科学研究所，江苏徐州 221121）

玉簪属于[Hosta plantaginea（L.） Aschers.]百合科（Liliaceae）玉簪属（Hosta），为多年生宿根草本花卉，原产于中国、韩国和日本以及原苏联远东地区，主要分布在亚洲温带和亚热带地区[1]。玉簪习性耐阴耐寒，品种繁多，叶片的形状、大小、颜色、纹理和质地等各不相同[2-3]。到了花期，玉簪花姿优美，香气宜人，花色丰富多彩，有白色、紫色、淡紫色和蓝紫色等。玉簪既可观花又可观叶，是非常受欢迎的园林景观地被植物，具有很高的观赏应用前景[4-5]。该试验选用的白花玉簪（YZ14）有粗壮的根状茎，多数须状根。叶丛基生，叶卵状心脏形，叶片边缘有深绿色纵纹，中间叶色嫩绿，有光泽。花茎从叶丛中抽出，顶生总状花序，花色洁白，管状漏斗形，有香味。该玉簪品种抗寒耐阴能力强，对强光照具有一定适应性，并且自身具有较强的抗病抗虫害的特点。

常规的玉簪繁殖技术为播种和分蘖繁殖[6]，繁殖速度慢[7]，受季节和环境的影响特别大，而且极易出现植株变异及退化现象[8]，无法满足市场需求和推广应用玉簪种苗的要求[9-11]。因此，采用现代植物组培快繁技术，对玉簪增殖、生根培养基的进行优化研究，筛选出最适宜的培养基配方，提高繁殖速度，同时也为玉簪组培苗快速繁育提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

以白花玉簪（编号 YZ14）的幼芽为试验材料。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体的选择选取新鲜无病虫害的完整植株，剥去叶片，剪去下部须状根，用自来水反复清洗新发幼芽。用解剖刀切取幼芽，用洗衣粉水浸泡10 min左右进行表面清洗，再置于流水下冲洗30 min。将预处理过的幼芽放在超净工作台上用75%酒精浸泡30 s，用无菌水冲洗1～2次，再用40%花王消毒溶液浸泡消毒3 min，无菌水冲洗3～5次，滤去无菌水后用无菌滤纸吸干备用。再次剥去外包的叶片，保留基部包含生长点的幼芽，将里面的嫩芽接种到制备好的培养基上。

1.2.2 培养条件以MS培养基为基本培养基，添加不同浓度和类型的激素进行处理，另外培养基加蔗糖30 g/L，琼脂6 g/L，并将pH值调至5.8（生根培养基以1/2 MS培养基为基本培养基，另外培养基加蔗糖20 g/L，琼脂6 g/L，并将pH值调至5.8）。培养温度为（25±2）℃，光照强度1 000～2 000 Lx，光照时间10～14 h/d。

1.2.3 诱导培养基的筛选诱导培养基以MS培养基为基本培养基，添加不同浓度和类型的激素进行处理，细胞分裂素选择6-BA ，生长素NAA，共设4个处理，分别为：（Y1）MS + 0.2 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA；（Y2）MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA；（Y3）MS+ 1.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA；（Y4）MS + 2.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA。

每组5瓶，每瓶接入4个外植体，于组培室进行培养，观察接种外植体的生长发育状态，确定最合适玉簪诱导的诱导培养基。

1.2.4 增值培养基的筛选增殖培养基以MS培养基为基本培养基，添加不同浓度和类型的激素进行处理，细胞分裂素选择6-BA，生长素NAA ，共设5个处理，分别为：（Z1）MS + 2.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA；（Z2）MS + 2.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA；（Z3）MS +3.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA；（Z4）MS + 3.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA；（Z5）MS + 4.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA。

将丛生芽分割成单芽，分别接种在不同的增殖培养基上，每组5瓶，每瓶接入4个单芽，组培室中培养，观察芽的增殖情况，确定最合适玉簪生长的增殖培养基。

1.2.5 生根培养基的筛选生根培养基以 1/2 MS培养基为基本培养基，添加不同浓度和类型的激素进行处理，生长素选择IBA（0.0、0.1、0.5 mg/L），共设3个处理，分别为：（G1）1/2 MS ；（G2）1/2 MS +0.1 mg/L IBA ；（G3）1/2 MS +0.5 mg/L IBA 。

在增殖培养基形成的丛生芽中，轻轻去除基部老叶，切去芽高4 cm左右，生长健壮的芽体接种于不同的生根培养基上进行生根培养，每组5瓶，每瓶接入3个芽体，于组培室进行培养，观察芽体的生根情况，30 d后统计生根情况，确定最合适玉簪生长的生根培养基。

2 结果与分析

2.1 诱导培养基的筛选

由表1可以看出，在同等的消毒措施和培养条件下，不同激素处理的外植体材料均可出芽。处理Y1丛生芽较少，随着6-BA的浓度提高，丛生芽的诱导率也随之提高，处理Y2的丛生芽诱导率提高至75%，这可能是6-BA有利于芽的形成，促进芽的分化。提高NAA的浓度，处理Y3丛生芽密集，芽诱导率最高可达95%，且生长状态良好。而当6-BA的浓度提高至2.0 mg/L时，处理Y4的丛生芽较弱，而且出现玻璃化现象，由此可见，高剂量的6-BA和NAA激素组合也不利于丛生芽的诱导。在该试验中，白花玉簪YZ14丛生芽诱导的适宜培养基为MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA，该培养基丛生芽诱导效果较好且丛生芽长势良好。

表1 不同培养基对玉簪丛生芽诱导的影响

2.2 增值培养基的筛选

由表2可知，添加低浓度的6-BA增殖较少，芽长势一般；随着6-BA浓度的提高，芽的增殖系数随之提高，生长较快，质量较好；继续提高6-BA的浓度，芽的增殖系数反而逐渐降低，并且出现玻璃苗现象。其中处理Z3叶片增殖速度较快，长势较好，叶片宽大，叶色正常且无畸形（图1）。由此可见，6-BA的浓度在芽的增殖阶段起到关键作用，白花玉簪YZ14芽增殖的适宜培养基为MS + 3.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA，该培养基组合可提高芽的质量，且增殖效果较好。

图1 Z3培养基上玉簪增殖情况

表2 不同培养基对玉簪增殖的影响

2.3 生根培养基的筛选

如表3所示，随着IBA浓度的增加，白花玉簪的组培苗的生根率和生根数呈现出先增后减的趋势。处理G2如图2所示，经过30 d的培养，有较好的生根效果，生根率可达100%，叶片浓绿，根系粗壮发达，长势较好，整体植株形态正常，处理G2可作为最佳生根培养基。因此，白花玉簪YZ14的适宜生根培养基为1/2 MS+0.1 mg/L IBA。