雄激素受体在雌激素受体阳性乳腺癌患者中的表达及其临床意义

路珩，张一奇

（锦州医科大学附属第一医院1.心胸外科，2.乳腺外科，辽宁 沈阳121001）

乳腺癌是全球女性发病率最高的恶性肿瘤[1]。鉴于不同分子分型的乳腺癌具有显著异质性，寻求预后标志物及治疗策略刻不容缓。一般认为雄激素受体（androgen receptor, AR）在男性的生理及病理过程中发挥重要作用，但近年来AR 在乳腺癌中的研究不断深入并被广泛关注[2]。与雌激素受体（estrogen receptor, ER）、孕激素受体（progesterone receptor, PR）相似，AR 也属于类固醇核受体家族[3]。Luminal 型乳腺癌以ER 阳性为分子生物学特征，AR 在其发生、发展中发挥重要的生物学作用，但AR 在ER 阳性乳腺癌患者中的表达及预后方面的价值仍存在争议[4]。本研究旨在分析ER 阳性乳腺癌患者的AR 表达，以及AR 与各临床病理特征的关系，探索AR 预测ER 阳性乳腺癌患者预后的可行性。

1 资料与方法

1.1 病例资料

选取2012年10月—2013年8月锦州医科大学附属第一医院收治的ER 阳性乳腺癌患者108 例。年龄26～74 岁，中位年龄51 岁。纳入标准：①病理证实为无远处转移的浸润性乳腺癌且免疫组织化学检测ER 为阳性（≥1%）；②术前未行任何治疗；③患者行规范手术治疗且术后根据美国国立综合癌症网络指南行标准治疗；④有完整的临床病理资料及随访资料；⑤患者均签署知情同意书。排除标准：①男性乳腺癌；②合并其他原发疾病。

1.2 方法

1.2.1 免疫组织化学对108 例石蜡包埋的乳腺癌组织标本进行切片，切片厚度约4 μm，脱蜡后进行抗原修复，采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（streptavidin-perosidase,SP）法检测AR 表达。SP 试剂盒及二氨基联苯胺（Diaminobenzidine,DAB）试剂盒购自北京中杉生物科技有限公司，AR 抗体（1∶100）购自武汉三鹰生物技术有限公司。严格按照说明书进行实验操作，DAB显色后苏木精复染，封片。PBS 缓冲液为一抗阴性对照，用已知AR阳性的前列腺组织作为阳性对照。

1.2.2 结果判定由2 位病理科医生在单盲条件下进行结果判定。镜下100 个细胞内核表达阳性细胞数>10 个定义为AR 阳性。

1.3 随访

采用电话及门诊登记等方式进行随访，随访时间从术后第1 天开始至复发、转移、死亡或截止时间，截至时间为2019年6月30日。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 26.0 统计软件。计数资料以率（%）表示，比较用χ2检验；Kaplan-Meier 法绘制生存曲线，比较用Log-rank χ2检验；影响因素的分析用多因素Cox 回归模型。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AR表达情况

AR主要在细胞核中表达。108例ER阳性乳腺癌患者中，有72 例（66.7%）AR 阳性（见图1），36 例（33.3%）AR 阴性（见图2）。

图1 ER阳性乳腺癌组织中AR阳性表达 （DAB×400）

图2 ER阳性乳腺癌组织中AR阴性表达 （DAB×400）

2.2 AR表达与患者临床病理特征的关系

不同T 分期、组织学分级及PR 表达患者的AR阳性率比较，经χ2检验，差异有统计学意义（P<0.05），AR 阳性率在低T 分期、低组织学分级及PR阳性表达患者中较高。不同年龄、N 分期、人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor-2, HER2）表达及Ki-67 表达患者的AR 阳性率比较，经χ2检验，差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1 不同临床病理特征患者的AR阳性率比较

2.3 AR与患者预后的关系

AR 阳性与AR 阴性患者的总生存期（overall survival, OS）和无病生存期（disease-free survival,DFS）比较，经Log-rank χ2检验，差异有统计学意义（χ2=6.020 和7.111，P=0.014 和0.008），AR 阳性患者的OS 和DFS 较长。见图3、4。

图3 不同AR表达患者的总生存曲线

图4 不同AR表达患者的无病生存曲线

不同T 分期、N 分期、AR 表达患者的OS 比较，经χ2检验，差异有统计学意义（P<0.05）。不同年龄、组织学分级、PR、HER2、Ki-67 表达患者的OS 比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

不同N 分期、AR 表达患者的DFS 比较，经χ2检验，差异有统计学意义（P<0.05）。不同年龄、T 分期、组织学分级、PR、HER2、Ki-67 表达患者的DFS 比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

表2 影响ER阳性乳腺癌患者预后的单因素分析参数

进一步将单因素分析中差异有统计学意义的变量纳入多因素Cox 回归分析，结果显示：AR 阳性[O^R=0.440（95% CI：0.206，0.937）]、N 分期[O^R=2.231（95% CI：1.030，4.829）]是影响ER 阳性患者OS预后的影响因素；AR 阳性[O^R=0.359（95% CI：0.135，0.949）]是影响ER 阳性患者DFS 预后的影响因素。见表3。

表3 影响ER阳性乳腺癌患者预后的多因素分析参数

3 讨论

基于雌激素受体阳性的内分泌治疗已得到深入研究，是目前治疗激素受体阳性乳腺癌的重要方式，但随之而来的另一个问题是内分泌治疗的耐药性。因此，临床上必须寻找新的治疗靶点以提高乳腺癌治疗的有效率[5]。以AR 为靶点治疗前列腺癌的成功经验给乳腺癌的治疗带来了信心，近年来引起人们的广泛关注[6]。

AR 与雄激素结合后调节下游基因的转录，进而发挥生物学作用。然而，雄激素在乳腺癌中的作用仍然存在争议，因此研究雄激素和AR 在乳腺癌中的作用机制迫在眉睫。60%～80%乳腺癌患者AR 呈阳性，甚至超过ER、PR 的阳性率，这取决于不同的抗体及对AR 阳性的定义[7-8]。本研究发现66.7% ER 阳性乳腺癌患者AR 呈阳性表达，且与肿瘤直径小、组织学分级低及PR 阳性呈正相关，与年龄、N 分期、HER2 表达及Ki-67 表达无关。AR与多种预后不良指标呈负相关，提示AR 在抑制ER阳性乳腺癌的发生、发展中发挥重要作用。

国内外有关AR 与乳腺癌患者预后的研究结果差异较大。据报道，AR 阳性表达在功能上对乳腺癌具有双重调控作用，AR 表达与ER 表达高度一致，并与ER 存在错综复杂的交互作用[9]。令人惊讶的是，AR 和ER 可以利用相似的顺式调控区域，AR 与ER 竞争结合雌激素反应元件进而减弱ER 的转录活性[10]。一些研究表明，在ER 阳性且AR 阳性的乳腺癌患者中，AR 导致细胞凋亡，AR 和ER 的共表达是预示患者预后良好的预测因素[11-12]。相反，在ER 阴性AR 阳性的乳腺癌中，AR 通过结合雄激素反应元件导致细胞增殖，成为不良预后因子[13]。然而，也有研究表明在三阴性乳腺癌中，AR 阳性与OS 和DFS 呈正相关[14]。本研究发现，在ER 阳性患者中AR 阳性患者较AR 阴性患者的OS 及DFS 时间均明显延长，AR 是影响ER 阳性乳腺癌患者OS 和DFS 的独立因素，N 分期是影响ER 阳性患者OS 的独立因素。AR 靶向治疗在乳腺癌研究中处于发展阶段，并初步显示出了不错的疗效[15]。事实上，这些数据表明AR 表达评估可为乳腺癌患者的预后提供额外信息，并为AR 靶向治疗提供机会。

综上所述，本研究初步分析了ER 阳性乳腺癌患者AR 的表达及预后价值，为AR 成为ER 阳性乳腺癌患者治疗靶点提供重要的依据。