IL-17E在结肠癌中的表达及与肿瘤分期的相关性

赵兴洋，袁逸林，杨学良，王明华，黄维莉，娄 洋

(1.北华大学附属医院，吉林 吉林 132011；2.吉林市中心医院，吉林 吉林 132011)

白介素-17(IL-17)是重要的炎症细胞因子，其中IL-17E是新近发现的IL-17家族成员，IL-17E异常表达可促进辅助型T细胞的免疫应答，并增加IL-4和IL-13等炎性因子表达，加重局部炎症[1-2].既往报道[3]显示：IL-17E参与了消化性溃疡和溃疡性结肠炎等疾病的炎症病变过程，胃黏膜中IL-17E表达水平与胃肠组织损伤程度具有显著相关性.结肠癌是消化道常见恶性肿瘤，目前，有关IL-17E在结肠癌中的报道较少[4].有研究[5]显示：IL-17E异常增加可能促进食管鳞状细胞的癌变.但也有研究[6]发现：IL-17E联合化疗有助于增强抗肿瘤效果，可见IL-17E在恶性肿瘤中可能存在双重作用.本研究分别纳入100例结肠癌患者和100例体检健康者作为研究对象，分析IL-17E与结肠癌分期的关系.

1 材料与方法

1.1 一般资料

纳入2017年8月—2020年8月于北华大学附属医院100例结肠癌患者作为观察组，另纳入同期100例体检健康者作为对照组.本研究经医院伦理委员会批准，两组基本资料比较差异无统计学意义(P>0.05).见表1.

表1 两组基本资料Tab.1 Basic information of the two groups

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：观察组经MRI和肠镜病理活检确诊为结肠癌；对照组为体检健康者；临床资料完整.

排除标准：合并其他感染性疾病、免疫性或慢性疾病；合并严重躯体性疾病；肝肾功能不全.

1.3 血清IL-17E检测

两组受试者均于入院当日采血进行检测.

实验准备：按IL-17E试剂盒(江苏江莱生物科技有限公司，规格48T/96T)说明书依次溶解捕获IL-17抗体、二抗体、标准品及氧化物酶结合物，低温保存备用.用PBS稀释捕获抗体，在ELISA板中加入100 μL二抗，封板弃液，再以每孔300 μL重复吸板4次，完成后每孔加入300 μL封闭液，温室孵育2 h，拍干.

ELISA实验：分别将100 μL标准品和血清标本加入反应孔，温室孵育2 h，再用稀释液稀释二抗体浓度至0.25 μg/mL，加入100 μL氧化物酶，孵育2 h.吸板4次后，加底物100 μL，常温显色10 min，加终止液50 μL，在450 nm波长条件下记录结果.

1.4 MRI检查

检查前8 h口服清肠药，应用飞利浦Achieva 3.0T磁共振成像系统进行MRI检查，嘱患者取平卧位，平静呼吸，依次进行矢状位和冠状位扫描，参数设置：TR=3 000 ms，TE=100 ms，层厚3 mm，层间距0.3 mm，明确肿瘤位置，然后垂直肿瘤肠管，依次行横断面T1WI和T2WI扫描，层厚3 mm，层间距0.3 mm，TR依次为573 ms和3 824 ms，TE依次为8 ms和110 ms.完成后平行肿瘤肠管，行冠状面T2WI扫描，参数同横断面T2WI扫描.

1.5 观察指标

记录并比较观察组、对照组患者的血清IL-17E水平，采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清IL-17E对结肠癌的预测价值.根据结肠癌TNM分期标准对结肠癌进行分期，通过ROC曲线得到的最佳截断值，将患者分为IL-17E高表达组、IL-17E低表达组，比较两组研究对象的临床特征，包括性别、年龄、BMI、肿瘤分期、肿瘤大小、贫血、淋巴结转移、肿瘤侵袭深度、分化程度，分析血清IL-17E与临床特征的关系.参考《结直肠癌TNM分期(2010)》第7版[7]对患者肿瘤进行分期，采用Spearman相关性检验分析血清IL-17E与肿瘤分期的相关性.

1.6 统计学分析

2 结 果

2.1 两组血清IL-17E水平

观察组血清IL-17E水平为(491.64±80.38)pg/mL，低于对照组的(789.52±206.75)pg/mL，差异具有统计学意义(P<0.05).通过绘制ROC曲线，提示血清IL-17E预测结肠癌的曲线下面积为0.764(标准误=0.046，P<0.001，95%CI=0.673～0.855)，最佳截断值为546.745 pg/mL，敏感度为72.30%，特异度为58.50%.ROC曲线见图1.

图1 血清IL-17E预测结肠癌的ROC曲线Fig.1 Serum IL-17E predicts ROC curve of colon cancer

2.2 血清IL-17E与结肠癌病理特征的关系

根据最佳截断值546.745 pg/mL将患者分为IL-17E高表达组(n=32，≥546.745 pg/mL)、IL-17E低表达组(n=68，<546.745 pg/mL)，其中，IL-17E高表达组的肿瘤Ⅰ期、无淋巴结转移、肿瘤侵袭深度(T1+T2)、高分化比例分别为50.00%、90.63%、93.75%、90.63%，高于IL-17E低表达组的17.65%、72.06%、67.65%、63.24%，差异具有统计学意义(P<0.05).见表2.

表2 血清IL-17E与结肠癌病理特征的关系Tab.2 Relationship between serum IL-17E and pathological characteristics of colon cancer

2.3 血清IL-17E与肿瘤分期的相关性

Spearman相关性检验提示：血清IL-17E与肿瘤分期的相关性系数为-0.523(P=0.013)，表明二者呈负相关，肿瘤分期越高，患者的血清IL-17E水平越低.

3 讨 论

IL-17E是IL-17家族中的一员，它在免疫性疾病、过敏性疾病等多种疾病中具有一定诊断价值[8].研究[9-10]表明：IL-17E能与IL-17RA、IL-17RB相结合，进而促进异类二聚体形成，利用信号传导使下游基因转录，形成生物学效应.本研究结果提示：结肠癌患者的血清IL-17E水平明显下降，提示血清IL-17E下调可能参与了结肠癌进展.既往研究[11]发现：IL-17E可能对炎性浸润有促进作用，它可使机体炎症加重，促进炎症进展.另有研究[12]发现：IL-17E还存在抑癌作用，这可能与中性粒细胞聚集密切相关，具体机制尚有待进一步证实.有学者[13]发现：良性膀胱息肉者的IL-17E表达增高，而膀胱癌、前列腺癌患者的IL-17E表达水平下调.本研究发现：结肠癌患者的血清IL-17E水平明显下调，推测可能是因恶性肿瘤患者癌细胞活跃、IL-17E的抑癌作用有所削弱所致.

通过观察血清IL-17E与病理特征的关系，发现IL-17E表达水平可能受肿瘤分期、淋巴结转移、肿瘤侵袭深度、肿瘤分化程度的影响.由于本研究主要探讨血清IL-17E与肿瘤分期的关系，故仅对二者进行Spearman相关性检验，结果提示二者呈负相关，患者肿瘤分期越高，血清IL-17E水平越低.肿瘤分期对评价癌症患者预后至关重要，而血清IL-17E能在一定程度上反映患者的肿瘤分期，也间接表明它对癌症患者预后具有评估价值[14].本研究的ROC曲线证实血清IL-17E预测结肠癌的曲线下面积为0.764，总体预测效果较理想.研究[15]表明：IL-17E对嗜酸细胞、细胞因子聚集有诱导作用，有利于趋化活性产生，从而参与炎症进展.此外，还有学者[16]发现：IL-17E不仅对炎症进展有促进作用，也可抑制炎症.本研究发现：IL-17E在结肠癌中具有抑癌、抑制炎症作用，结肠癌可导致血清IL-17E水平下调，这可能是其促进该病进展的重要机制.

本研究证实了血清IL-17E水平可用于结肠癌的预测，且明确了最佳截断值.此外，本研究经Spearman相关性检验证实血清IL-17E与结肠癌分期呈负相关，这可能为治疗结肠癌提供新思路，在未来的临床研究中，可将靶向IL-17E治疗作为研究重点.另外，本研究也存在局限性，纳入样本量较少，未来还需扩大样本量对此进行进一步证实.