尿液细菌培养与尿沉渣细菌定量计数在泌尿系统感染筛查中的对比分析

侯素君，闫秀中，王晓梅，周绪云，焦 玲

山东省日照市中医医院，山东日照 276800

泌尿系统感染(UTI)是一种常见且多发的感染性疾病[1-2]，是由病原菌侵犯泌尿系统、引发炎性反应所致，其主要临床表现为尿频、尿急、尿痛、尿液浑浊、蛋白尿等。临床诊断泌尿系统感染的主要方法为实验室检查，尿液细菌培养为金标准[3-5]，在泌尿系统感染的诊断中应用价值高，但常规的中段尿细菌培养需2～3 d才能作出报告，会耽误早期诊断以及治疗的最佳时机，甚至可能会出现慢性感染或败血症，临床医生往往在尿培养正式报告之前先经验治疗。故此，选择一种快捷且准确的筛查方式意义重大。本研究将尿液细菌培养和尿沉渣细菌定量计数联合尿沉渣白细胞检验进行对比分析，旨在促进泌尿系统感染诊断准确率的提高，缓解抗菌药物滥用情况，满足临床快速诊断的需求。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年3月至2020年2月本院收入的疑似泌尿系统感染患者200例为研究对象，其中男性120例，女性80例，年龄42～75岁，平均(58.5±0.5)岁。

1.2仪器与试剂 Sysmex UF-1000i全自动尿沉渣分析仪及配套试剂，质控品购自伯乐生物技术有限公司；VITEK-2 Compact全自动微生物分析仪及相应鉴定板，质控菌株大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC2 7853、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、大肠埃希菌ATCC 700323、粪肠球菌ATCC 51299、粪肠球菌ATCC 29212、大肠埃希菌ATCC 35218、腐生葡萄球菌ATCC 750、金黄色葡萄球菌ATCC 29213和白色假丝酵母菌ATCC 90028，均由山东省临床检验中心提供。

1.3方法

1.3.1标本采集 按照文献[6]参考标准指导患者留取清洁中段尿液20～30 mL,分别装在两个无菌有盖容器中，立即送往实验室，2 h内完成尿液细菌培养接种和尿沉渣细菌定量计数。

1.3.2尿液细菌培养法 使用10 μL无菌定量接种环接种血琼脂平板、麦康凯平板，35 ℃培养18～24 h，有细菌生长则对菌落数量进行计算，采用法国生物梅里埃公司VITEK-2 Compact全自动微生物分析仪进行菌株鉴定，无细菌生长继续培养24 h。判断标准参考文献[6]：革兰阴性菌，细菌数≥105CFU/mL，说明标本为感染菌尿；细菌数在104～105CFU/mL，表明标本为疑似感染菌尿，可结合临床症状判断或复查；细菌数低于104CFU/mL，提示临床意义不大。革兰阳性菌：感染菌尿、无感染菌尿的标准分别为细菌数≥104CFU/mL、<104CFU/mL；真菌：感染菌尿、无感染菌尿的标准分别为细菌数≥104CFU/mL(两次培养以上)、<104CFU/mL。

1.3.3尿沉渣细菌定量计数法 使用UF-1000i全自动尿沉渣分析仪(日本sysmex公司生产)对标本中的细菌数进行检测，仪器每天用专用质控品(2种浓度级别)进行质控监测。细菌数>100/μL且白细胞>10/μL确定为感染菌尿[7-8]；细菌数>8/HP、>10/HP分别与尿液细菌培养中>102CFU/mL、>105CFU/mL相当。若患者有泌尿系感染症状出现，而细菌检验未得出检测，提示可能存在衣原体感染。

1.4观察指标 观察两种检测方法的阳性率。观察尿液细菌培养阳性标本中的病原菌分布情况。以尿液细菌培养结果为金标准，对尿沉渣细菌定量计数法于泌尿系统感染中的诊断效能进行评价。同时对尿沉渣细菌通道检测革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的结果进行比较。

1.5统计学处理 将两组各项观察指标数据录入统计学软件SPSS21.0中进行处理，计数资料以例数或百分率形式表示，总符合率=100%×[(真阳性+真阴性)/总标本数]；灵敏度=100%×[真阳性/(真阳性+假阴性)]；特异度=100%×[真阴性/(真阴性+假阳性)]，行χ2检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1两种方法检测结果比较 200例患者的尿液标本中，尿沉渣细菌定量计数测定阳性129例，阳性率64.50%(129/200)；尿液细菌培养阳性126例，阳性率63.00%(126/200)；两种方法检测阳性率比较，差异无统计学意义(χ2=0.097,P>0.05)。

2.2尿液细菌培养阳性标本中的病原菌分布情况 126例阳性患者标本中共检出病原菌126株，革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌的构成比分别为70.63%(89/126)、23.81%(30/126)、5.56%(7/126)；革兰阴性菌以大肠埃希菌51.59%(65/126)为主，革兰阳性菌以屎肠球菌8.73%(11/126)为主。见表1。

表1 尿液细菌培养阳性标本中的病原菌分布情况

2.3尿沉渣细菌定量计数在泌尿系感染诊断中的效果评价 以尿液细菌培养结果为金标准，将尿沉渣细菌定量计数检测结果中的129份阳性标本和71份阴性标本进行尿液细菌培养，对比评估两种方法的符合率。尿沉渣细菌定量计数和尿液细菌培养的阳性标本符合率为96.90%(125/129)，假阴性率0.31%(4/129)，阴性标本符合率为97.18%(69/71)，假阳性率0.28%(2/71)；两种方法符合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 尿沉渣细菌定量计数与尿液细菌培养检测结果比较(n)

2.4尿沉渣细菌通道检测革兰阳性球菌 以尿液细菌培养结果为金标准，尿沉渣细菌通道检测革兰阳性球菌的符合率为88.00%，灵敏度为60.00%(18/30)，特异度为92.94%(158/170)。尿沉渣细菌通道与尿液细菌培养检测革兰阳性球菌结果见表3。

表3 两种检测方法检测革兰阳性球菌的结果(n)

2.5尿沉渣细菌通道检测革兰阴性杆菌 以尿液细菌培养结果为金标准，尿沉渣细菌通道检测革兰阴性杆菌的符合率为88.50%，灵敏度为77.53%(69/89)，特异度为97.30%(108/111)。尿沉渣细菌通道与尿液细菌培养检测革兰阴性杆菌结果见表4。

表4 两种检测方法检测革兰阴性杆菌的结果(n)

2.6尿沉渣细菌通道检测革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌结果比较 以尿液细菌培养结果为金标准，尿沉渣细菌通道检测革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌的符合率、灵敏度和特异度，革兰阴性杆菌检测结果均优于革兰阳性球菌。见表5。

表5 尿沉渣细菌通道检测革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌结果比较(%)

3 讨 论

95%以上的泌尿系统感染是由单一细菌引起的，主要病原菌为大肠埃希菌，其次是肠球菌[9-10]。泌尿系统感染的早期症状不明显，若未得到及时的诊断和治疗，病情会向菌血症或败血症进展[4,11]，因此早期诊断泌尿系统感染十分重要。尿液细菌培养与尿沉渣细菌定量计数检测的意义在于检测人体泌尿系统是否有病原菌存在，对于存在细菌感染的患者，均进行抗菌药物敏感试验，从而为临床医生选择合理的抗菌药物提供参考[12]。

尿液作为机体的排泄物之一，可对肾脏器官的病理变化情况进行反映[13]。正常尿液无菌，而人体泌尿生殖道外存在细菌，且女性阴道内一般情况下无致病菌存在，但存在条件致病菌。pH值的改变会导致正常菌群状况失衡，因此进行尿培养时应注意排除外界细菌干扰。尿液细菌培养是泌尿系统感染的诊断金标准，其过程步骤较多，检查耗时长，阳性率低，不利于患者尽早接受治疗，因此，需要采用更加便捷、准确的检测方法。尿沉渣细菌定量计数是一种全自动尿沉渣分析仪进行细菌检测的方法，具有设备简单、操作简便的特点，在基层医疗单位以及大规模筛查中具有显著作用[14-16]。

尿沉渣是尿液中的有形成分，是原尿经过离心后形成的沉渣，也是尿液有形成分质和量的组合。尿沉渣细菌定量计数能够对泌尿系统疾病进行诊断、鉴别、定位，其能够监测药物治疗效果；另外尿沉渣细菌定量计数检测包括多种技术，半导体激光、特异性核酸荧光染色和流式细胞技术，细菌检测使用专用通道和特异性染液，最大限度地消除干扰物质对细菌检测的影响，其能够利用激光将细胞及有形成分激发，促使散射光、荧光等光信号产生[17-18]，再将其向电信号转化，有助于对各种有形成分进行定量分析，因此具有较高的检测准确率，且及时高效，大量的尿液标本筛查采用尿沉渣细菌计数比较合适。尿沉渣细菌定量计数采用UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测尿液标本，该分析仪配有专用的细菌检测通道，由红色半导体激光发射红褐色激光、照射经过核酸染色后在鞘流贯流分析池中形成鞘流标本，对尿中各个粒子进行多角度散射光和不同级别的荧光检测，能够将尿液中其他微小成分的影响减轻[19]，从而获得高精密、高可信度的分析数据，细菌检验的特异度可得到提高。

本研究中，对尿沉渣细菌定量计数检测结果与临床诊断金标准尿液细菌培养检测结果进行比较，200例中段尿标本细菌培养检测结果显示，阳性率为63.00%，尿沉渣细菌定量计数显示，阳性率为64.50%，两种检测方法的阳性率相近，说明了尿沉渣细菌定量计数的准确性较高。200例中段尿检测标本中，尿沉渣细菌定量计数与尿液细菌培养的阳性标本符合率为96.90%，阴性标本符合率为97.18%；假阴性率0.31%，假阳性率0.28%；阳性及阴性标本的符合率均高达95%以上，说明了两种检测方法应用在泌尿系统感染诊断中均具有较高的价值。分析本研究中出现假阴性结果的原因可能与检测前使用抗菌药物和抗菌药物滥用有关，以及与尿液残存低浓度的抗菌药物抑制细菌生长、检测前大量饮水、留取尿液前使用消毒液清洗尿道等因素有关；而假阳性结果的出现则与留取尿液时被污染相关。使用UF-1000i细菌计数则受抗菌药物和培养方法干扰较小，可以弥补金标准尿液培养结果阳性率较低的不足。

同时UF-1000i尿沉渣分析仪可以提供直观的细菌检测散点图和泌尿系感染诊断信息，通过图形分析可以初步判断检出细菌为阳性球菌、阴性杆菌或混合细菌感染[9]。本研究结果显示UF-1000i的细菌通道与金标准尿液细菌培养相比，革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的符合率、特异度均较高，说明UF-1000i尿沉渣分析仪在鉴别诊断泌尿系感染患者是革兰阳性球菌感染还是革兰阴性杆菌感染方面准确率较高，临床医生可以根据UF-1000i报告的革兰阳性球菌或革兰阴性杆菌，再结合泌尿系感染常见病原菌的临床分布情况和耐药情况，指导尿液细菌培养结果不明情况下的临床经验治疗用药，辅助临床医师选择合理有效的抗菌药物，减轻患者病痛和降低诊疗费用。UF-1000i尿沉渣细菌通道检测革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌结果相比较，符合率、灵敏度、特异度，差异均有统计学意义(P<0.05)，说明UF-1000i对于革兰阴性杆菌的检测能力优于革兰阳性球菌，泌尿系感染的主要病原菌为革兰阴性杆菌[9-10]，这种优势检测能力对临床医师经验治疗起到了良好指导作用。

总而言之，尿沉渣细菌定量计数同尿液细菌培养相比，阳性率相近，阳性率较高；阳性标本及阴性标本符合率均较高；设备简单、操作方便，筛查速度快，可以作为临床诊断泌尿系感染的参考依据，更适合应用在基层筛查泌尿系统感染中。同时尿沉渣细菌通道在泌尿系感染患者的早期针对性选择抗菌药物方面有较好的参考价值，特别是革兰阴性杆菌引起的泌尿系感染，有更高的参考价值。