冠心病病人血清亲环素A与冠状动脉病变程度的关系

宣 玲，唐 碧，康品方，胡翔稳，吴士礼，张 恒，王洪巨

2020年9月发布的中国心血管健康与疾病报告2019指出[1]，我国心血管病患病及死亡率长期处于上升趋势，心血管病现患病的人数3.3亿，其中冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease,CHD)病人1 100万。CHD是对人类健康产生严重威胁的疾病之一，是造成死亡的主要病因，研究[2-4]显示约有80%的心源性猝死是由CHD导致。早期判断冠状动脉病变严重程度对CHD病人至关重要。CHD的病理基础是动脉血管粥样硬化，炎症反应自始至终发挥重要作用。亲环素A(cyclophilinA,CyPA)是最早从牛胸腺获得并命名的具有多种生物学活性和功能的蛋白[5]。亲环素A作用于动脉粥样硬化的全过程，诱发血管阻塞引致心血管事件[6]。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPS)是钙锌依赖性蛋白水解酶，在筛查高危冠心病和临床病情评估中有重要作用[7]。C反应蛋白(C reactive protein,CRP)是急性时相反应的糖基化蛋白，在机体急性损伤或炎症刺激在肝脏合成并释放入血，活化的CRP激活补体系统在炎症反应中发挥作用[8]。本文通过收集和分析临床资料，测定血清CyPA、MMP-9和CRP 水平，探讨CHD病人血清CyPA与冠状动脉病变程度的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2017年1-8月入住我院心血管内科诊疗并行冠状动脉造影确诊的CHD病人121例作为研究对象。根据冠状动脉病变支数分为单支病变组39例、双支病变组34例、多支病变组48例；根据冠状动脉血管病变狭窄程度分为轻度(Gensini积分≤30分)病变组47例、中度(Gensini积分30～60分)病变组38例、重度(Gensini积分≥60分)病变组36例；35例检查正常者为对照组。CHD病人和对照组病人在性别、年龄、生化指标等均具有可比性。CHD的诊断标准为经冠状动脉造影证实至少有一支主要冠状动脉管腔直径狭窄≥50%。所有入选病人均排除急慢性感染性疾病、严重肝肾疾病、肿瘤性疾病、自身免疫性疾病、结缔组织疾病、血液疾病、严重心功能不全(心功能Ⅲ级及以上)。

1.2 研究方法

1.2.1 标本收集及处理 所有入选者均在入院第2日清晨空腹(禁食8 h以上)抽取静脉血，当日送至我院检验科进行常规生化测定，其中有CRP；另外同时抽取入选者静脉血3～5 mL，放入普通试管中，再室温静置1 h，然后低速离心机以1 500 r/min离心10 min后分离血清，置于-80 ℃冰箱保存，以备ELISA法测定CyPA、MMP-9水平。

1.2.2 冠状动脉造影检查 采用改良的Seldinger技术穿刺桡动脉或股动脉，置入造影导管，分别检查左右冠状动脉，然后选择多角度多体位X 线投照，由2名从事多年心血管介入诊疗的医师采用目测及定量判断评判冠状动脉造影结果。冠状动脉病变程度根据美国心脏协会规定的冠状动脉血管图像分段评价标准和Gensini 积分系统[9]。冠状动脉主支分为左主干(left main coronary,LM)、左前降支(left anterior descending branch,LAD)及左回旋支(left circumflex branch,LCX)、右冠状动脉(right coronary artery,RCA)，对角支、锐缘支等主要分支归主支统计。病变≥50%累计主要冠状动脉支数为病变支数，分单支、双支、多支(≥3支)，累计左主干以双支病变计算。依据狭窄程度对每支冠状动脉血管进行定量分析，每支血管的病变分数等于狭窄程度积分乘以相应的位置系数,各支血管病变积分之和等于冠状动脉病变程度总积分。

1.3 统计学方法 采用方差分析和相关性分析。

2 结果

2.1 不同冠状动脉病变支数CHD病人血清CyPA、MMP-9、CRP水平比较 血清CyPA、MMP-9、CRP水平在单支病变组、双支病变组和多支病变组均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；多支病变组的血清CyPA、MMP-9和CRP水平明显高于单支病变组和双支病变组(P<0.05)；双支病变组的血清CyPA、MMP-9和CRP水平明显高于单支病变组(P<0.05)(见表1)。

表1 不同冠状动脉病变支数的CHD病人血清CyPA、MMP-9、CRP水平比较

2.2 不同冠状动脉Gensini积分CHD病人血清CyPA、MMP-9、CRP水平比较 血清CyPA、MMP-9、CRP水平在中度病变组、重度病变组明显高于轻度病变组(P<0.05)；重度病变组血清CyPA、MMP-9、CRP水平明显高于中度病变组(P<0.05)(见表2)。

表2 不同Gensini积分CHD病人血清CyPA、MMP-9、CRP水平比较

2.3 CHD病人血清CyPA和MMP-9、CRP及Gensini积分的相关性 血清CyPA与MMP-9、CRP呈正相关(r=0.904，P<0.01；r=0.962，P<0.01)，血清CyPA、MMP-9、CRP与CHD病人Gensini冠状动脉病变积分呈正相关性(r=0.854，P<0.01；r=0.778，P<0.01；r=0.805，P<0.01)。

3 讨论

CHD是常见的心血管疾病，主要是因为动脉粥样硬化导致冠状动脉狭窄或痉挛，引起心肌缺血缺氧及进一步坏死，与冠状动脉病变程度相关的因素很多，CyPA就是其中之一。CyPA是亲环素家族中的细胞内伴侣蛋白，能够通过CD147介导的信号通路造成血管炎性状态,激活趋化炎性细胞，加快动脉粥样硬化的发生发展[10-11]，与CHD密切相关,CyPA还能够评价经皮冠状动脉介入术和冠状动脉旁路移植术的治疗效果[12]。随着研究的进展，血清CyPA与CHD冠状动脉病变程度的关系越来越受到关注。

本研究发现，CHD病人中多支病变组的CyPA水平明显高于单支病变组和双支病变组，双支病变组CyPA水平明显高于单支病变组，差异均有统计学意义(P<0.05)，这与国内相关报道[13]一致。Gensini积分对冠状动脉病变血管数、狭窄病变数、闭塞病变数进行定量性计分，可以比较全面地反映冠状动脉病变的严重程度。本研究进一步对比CHD病人的Gensini积分，结果发现中度病变组、重度病变组的CyPA水平明显高于轻度病变组，重度病变组CyPA水平明显高于中度病变组，差异均有统计学意义(P<0.05)。国内亦有研究[14]表明随着Gensini积分升高，血清CyPA水平升高。以上结果提示CyPA在一定程度上能间接反映冠状动脉病变的严重程度，测定血清CyPA有助于判断CHD的严重程度。

CHD的病理基础是涵盖了血管内皮损害、炎症因子激活、管腔血栓形成及脂质代谢紊乱的血管慢性炎症反应[15]。CyPA能通过ERK1/2和NF-κB途径促进巨噬细胞增殖，介导活化的巨噬细胞分泌大量MMP-9。MMP-9能降解和重塑细胞外基质(extracellular matrix,ECM)，维持ECM动态平衡；消弱粥样斑块纤维帽结构，促进斑块的不稳定；MMP-9参与了动脉粥样硬化的过程[16]。有研究[17]表明MMP-9是CHD病人冠状动脉狭窄的影响因素。本次研究也发现，CHD病人血清MMP-9水平随着冠状动脉病变支数的增加而逐渐增高；随着Gensini积分的增加而逐渐增高。CRP直接参与了粥样硬化斑块形成，是冠状动脉粥样病变程度重要的预示因子和危险因子[18]。本次研究分析CRP与CHD病人冠状动脉病变程度关系，发现随着冠状动脉病变支数增加和冠状动脉Gensini积分升高，CRP浓度逐渐升高，具体表现为多支病变组>双支病变组>单支病变组，重度病变组>中度病变组>轻度病变组，这与国内外研究[19-20]结果一致，表明冠状动脉血管病变的程度越重，CRP的水平升高越显著，提示了CRP是冠状动脉病变严重程度强有力的预测因子。相关研究亦[21-23]显示MMP-9、CRP等炎症因子在动脉粥样硬化中起重要作用。本研究还发现CHD病人血清CyPA与MMP-9、CRP水平和Gensini积分均呈正相关，提示了CyPA参与了冠状动脉炎症反应的全过程，CyPA可能通过炎症反应影响冠状动脉病变的发生和发展。

综上所述，随着冠状动脉病变支数增加，冠状动脉Gensini积分升高，CHD病人血清CyPA水平亦增加。CHD病人血清CyPA水平与 MMP-9、CRP水平和Gensini积分均呈正相关，CyPA反映加重冠状动脉病变程度的机制可能是参与了炎症反应。此外本研究研究样本数量有限，其结果有待多中心、更大规模的联合研究来充分的论证。