CD47、8-OHDG、Adropin蛋白对急性脑出血90d临床预后的预测价值

苟志勇 谭华 朱黎 蒋正方

急性脑出血属于临床常见脑卒中类型之一，约占所有脑卒中的20%～30%，具有高发病率、高致残率、高病死率，预后比缺血性脑卒中差［1］。CD47是整合素相关蛋白，既往有研究证实其参与局灶性脑缺血生理病理过程［2］。8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxydeoxyguanosine，8-OHDG）属于DNA 氧化应激损伤因子，可直接参与神经缺损过程，在神经疾病、脑损伤发生发展中发挥重要作用［3］。Adropin蛋白是一种分泌性蛋白，能调节能量平衡基因，与冠心病、心力衰竭、脑卒中等多种心脑血管疾病密切相关［4］。但目前关于三者与急性脑出血的关系仍有待验证。为此，本研究尝试探究CD47、8-OHDG、Adropin 蛋白在急性脑出血患者中的水平变化，并明确其对预后的预测价值，旨在为临床及早制定防治措施提供相关依据。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2017年7月至2020年1月90 例急性脑出血患者，根据90 d 临床预后分为预后良好组（21 例）与预后不良组（69 例）。预后良好组男12例，女9 例，年龄平均（62.57±4.18）岁，出血量：小量出血2 例，中量出血7 例，大量出血12 例，神经功能缺损程度：轻度3 例，中度4 例，重度14 例，其中破入脑室14 例。预后不良组男39 例，女30 例，年龄平均（61.95±3.78）岁，出血量：小量出血31 例，中量出血33 例，大量出血5 例，神经功能缺损程度：轻度28 例，中度32 例，重度9 例，其中破入脑室16 例。

纳入标准：①头颅MRI 或CT 检查可见脑出血病灶，并结合临床症状体征确诊为脑出血；②均为基底节区出血；③为首次发病；均具备血肿清除术指征；④患者及家属均知情，签订知情承诺书。排除标准：①既往有脑出血病史者；②存在恶性肿瘤、免疫疾病、急慢性感染疾病者；③合并慢性传染病者。

1.2 方法

两组入院后均给予控制血压、血糖，降低颅内压、营养神经等基础治疗，并根据出血量、是否破入脑室等病情选择合理血肿清除术治疗。

1.2.1 检测方法

术前采集外周血5 mL，手术时采集血肿液5 mL，均于常温静置2 h 后行离心处理，3 000 r/min，5 min，取上清液，保存于-80℃恒温冰箱内，待检。采用酶联免疫吸附法检测血肿液CD47、血清Adropin 蛋白水平，化学发光免疫法检测血清8-OHDG 水平，试剂盒购自华美生物工程有限公司，均按照试剂盒说明书操作。

1.2.2 临床特征判断方法

出血量采用多田式计算公式［5］进行计算，＜30 mL 为小量出血，30～50 mL 为中量出血，＞50 mL 为大量出血；神经功能缺损程度采用美国国立卫生研究院卒中量表（National Institutes of Health Stroke Scale，NIHSS）［6］评分评估，1～4 分为轻度损伤，5～20 分为中度损伤，＞20 分为重度损伤。

1.2.3 预后判定方法

采用格拉斯哥预后（Glasgow Outcome Score，GOS）评分［7］判定90 d 临床预后，1～3 分为预后不良，4～5 分为预后良好。

1.3 统计学方法

采用统计学软件SPSS 22.0 处理数据，计量资料以（）描述，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用独立样本t检验；计数资料用n（%）表示，χ2检验；各指标与90 d 临床预后的关系采用多元线性回归分析；相关性采用Spearman/Pearson相关系数模型分析；预测价值采用受试者工作特征（ROC）曲线分析。P＜0.05 表明差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白水平比较

预后不良组血肿液CD47、血清8-OHDG 水平高于预后良好组，Adropin 蛋白水平低于预后良好组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白水平比较（±s）Table 1 Comparison of CD47 in hematoma fluid，8-OHdG and adropin in serum between 2 groups（±s）

表1 两组血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白水平比较（±s）Table 1 Comparison of CD47 in hematoma fluid，8-OHdG and adropin in serum between 2 groups（±s）

组别预后不良组预后良好组t 值P 值n 21 69 CD47（pg/mL）172.34±41.85 126.19±30.37 5.556＜0.001 8-OHDG（pg/mL）57.43±16.06 42.61±13.24 4.269＜0.001 Adropin 蛋白（μg/mL）1.30±0.32 2.44±0.80 6.357＜0.001

2.2 不同临床特征患者血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白水平

不同年龄、性别患者血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；血肿液CD47、血清8-OHDG 水平随出血量、神经功能损伤程度增加呈逐渐升高趋势，Adropin 蛋白水平呈逐渐下降趋势（P＜0.05），破入脑室患者血肿液CD47、血清8-OHDG 水平高于未破入脑室患者，Adropin 蛋白水平低于未破入脑室患者（P＜0.05）。见表2。

表2 不同临床特征患者血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白水平比较（±s）Table 2 Comparison of CD47，8-OHdG and adropin protein levels in hematoma fluid of patients with different clinical characteristics（±s）

表2 不同临床特征患者血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白水平比较（±s）Table 2 Comparison of CD47，8-OHdG and adropin protein levels in hematoma fluid of patients with different clinical characteristics（±s）

组别年龄＜60 岁≥60 岁t 值P 值性别男女t 值P 值出血量小量出血中量出血大量出血F 值P 值神经功能损伤程度轻度中度重度F 值P 值是否破入脑室未破入脑室破入脑室t 值P 值例数36（40.00）54（60.00）51（56.67）39（43.33）33（36.67）40（44.44）17（18.89）31（34.44）36（40.00）23（25.56）60（66.67）30（33.33）CD47（pg/mL）134.22±31.10 138.79±36.52 0.616 0.539 135.73±28.94 138.57±30.64 0.450 0.654 120.14±22.15 138.20±26.08 166.69±33.79 17.562＜0.001 117.52±23.84 137.85±27.11 161.77±35.16 16.103＜0.001 122.48±38.14 165.92±43.29 4.868＜0.001 8-OHDG（pg/mL）45.48±5.51 46.46±6.22 0.766 0.446 46.65±5.18 45.31±6.35 1.102 0.273 40.87±5.53 47.10±6.02 53.74±7.48 25.604＜0.001 41.23±5.03 46.18±5.78 52.42±7.24 23.349＜0.001 41.39±7.28 55.43±10.66 7.350＜0.001 Adropin 蛋白（μg/mL）2.13±0.52 2.20±0.48 0.656 0.514 2.19±0.50 2.14±0.43 0.499 0.619 2.42±0.34 2.18±0.26 1.66±0.22 39.696＜0.001 2.47±0.30 2.26±0.23 1.62±0.18 82.954＜0.001 2.36±0.55 1.79±0.37 5.120＜0.001

2.3 血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白与临床特征相关性

相关性分析，血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白与急性脑出血患者年龄、性别无明显相关性（P＞0.05）；血肿液CD47、血清8-OHDG 与出血量、神经功能损伤程度、破入脑室呈正相关，Adropin 蛋白与出血量、神经功能损伤程度、破入脑室呈负相关（P＜0.05）。见表3。

表3 血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白与临床特征相关性Table 3 Correlation between CD47 in hematoma fluid，8-OHdG and adropin in serum and clinical features

2.4 血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白与90 d 临床预后的关系

多元线性回归分析，将出血量、神经功能损伤程度、破入脑室等其他因素控制后，血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白仍与90 d 临床预后（GOS 评分）显著相关（P＜0.05）。见表4。

表4 血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白与90 d临床预后的关系Table 4 the relationship between hematoma fluid CD47，serum 8-OHdG，adropin protein and 90 day clinical prognosis

2.5 血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白对90 d 临床预后的预测价值

ROC 曲线显示，血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin蛋白预测90 d临床预后的AUC分别为0.835、0.752、0.810，三者联合预测90 d 临床预后的AUC 为0.950，95%CI为0.883～0.985，敏感度为95.24%，特异度为85.51%，优于单独预测（P＜0.05）。见图1。

3 讨论

据统计，急性脑出血患者3 个月内遗留神经功能障碍的发生率高达30%，严重影响患者生存质量及日常生活能力［8-9］。因此，探索可靠指标及早评估病情、预测预后成为临床亟需解决的重要课题。

CD47 属于免疫球蛋白超家族，参与神经生理病理发生发展过程。本研究结果显示，CD47 在急性脑出血患者血肿液中的表达量与出血量、神经功能缺损程度、破入脑室等临床特征显著相关。结合王玉双等［10］报道考虑原因在于：CD47 在急性脑出血发生后会上调基质金属蛋白酶-9 表达，损伤血脑脊液屏障，促使颅内神经炎症浸润、扩散；CD47 表达升高会促使神经元细胞凋亡，促使神经功能缺损不断加重；且脑出血后形成血肿是造成脑损伤、神经功能障碍的始动因素，而CD47 能调节巨噬细胞、红细胞，表达降低可减轻脑水肿，在血肿清除中发挥重要作用。

8-OHDG 作为内外源DNA 氧化损伤的标志物，可阻滞细胞增殖，还可激活氧自由基或羟基自由基，诱导神经系统发生氧化应激反应，促使神经细胞线粒体受损，造成神经细胞凋亡。闫海光等［11］研究显示，血清8-OHDG 在脑出血患者中异常升高。在此基础上，本研究结果提示其参与急性脑出血病情进展过程。推测是因急性脑出血继发氧化性损伤，产生氧化应激反应，造成大量ROS 合成，导致机体抗氧化防御机制被破坏，从而加重脑组织损伤，8-OHDG 在ROS 氧化作用下大量合成、分泌、释放，进一步扩大氧化应激反应，上调凋亡诱导因子表达，加快神经细胞凋亡，破坏神经细胞及轴突功能，造成神经功能进行性缺损［12］。在控制其他因素后，血清8-OHDG 与预后显著相关，可见临床能通过检测血清8-OHDG 水平为预测预后提供有效信息。

Adropin 蛋白是由76 个氨基酸构成的分泌蛋白，涉及代谢适应、能量稳态、血管内皮增殖、迁移、微血管样结构形成等方面，具有血管保护作用［13］。既往有研究证实，Adropin 蛋白参与高血压脑出血过程，其血清水平在高血压脑出血中呈异常降低状态［14］。本研究表明，血清Adropin 蛋白不仅与出血量、神经功能缺损程度、破入脑室显著相关，还对预后具有重要影响。究其原因，Adropin蛋白可通过抑制ROCK-MLC2 通路传导途径，避免或减轻血管内皮屏障功能损伤，还可经由介导Notch1/Hes1 通路保护血脑屏障，从而达到保护神经功能的目的［15］。且本研究将出血量、神经功能缺损程度、破入脑室控制后发现，血清Adropin 蛋白仍与预后显著相关，提示其可能具有预测预后作用。

此外，本研究初次尝试探究三者联合预测预后价值，结果表明，三者联合预测价值显著优于单独预测，且与既往临床采用量表、评分等工具预测预后相比，上述指标具有采集方便、客观准确等优势，可作为临床预测预后的优选方式。但本研究未详细分析血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白对急性脑出血远期预后的影响，需做进一步分析与探究。

综上可知，血肿液CD47、血清8-OHDG、Adropin 蛋白与急性脑出血患者出血量、神经功能缺损程度、破入脑室等病情状况密切相关，联合检测可作为预测短期预后的重要途径。