血清PCT、α1-AT、HMGB1水平对新生儿细菌性肺炎的鉴别诊断

祝体红 赵勇 许玉峰

依照病原体的不同，新生儿肺炎可分为细菌性肺炎、病毒性肺炎以及支原体肺炎等，不同感染类型治疗方法及预后状态均存在较大差异，因此加强病原微生物的鉴别对治疗药物的合理选择具有重要参考价值［1］。细菌性肺炎发病率与死亡率均居于新生儿感染性疾病首位，炎症细胞和因子可造成全身炎症反应综合征，加重患儿病情［2］。细菌性肺炎临床表现不典型，因此其临床早期鉴别诊断也较为困难。当机体出现全身性的细菌感染、系统炎性反应综合征等时，机体血液中的降钙素原（Procalcitonin，PCT）浓度可出现异常升高［3］。α1-抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin，α1-AT）是血浆中最重要的蛋白酶抑制剂，其浓度变化和肝实质损害以及肺组织酶解损伤关系密切［4］。高迁移率族蛋白B（High Mobility Group Box protein，HMGB1）参与多种疾病病理过程，可介导机体炎症反应［5］。本研究将比较细菌性肺炎与非细菌性肺炎新生儿血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平，分析三项指标在新生儿细菌性肺炎的鉴别价值，旨在为疾病早期诊断提供参考，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2019年7月至2020年8月120 例感染性肺炎新生儿，根据血、痰培养和病毒学指标检测结果，分为细菌性肺炎组（n=52 例）与非细菌性肺炎组（n=68 例），非细菌性肺炎组又分为病毒性肺炎组（n=29 例）和支原体肺炎组（n=39 例）。纳入标准：①符合《诸福棠实用儿科学》感染性肺炎诊断标准［6］；②病原检测证实；③日龄≤28 d。排除标准：①入组前接受过抗生素等治疗；②合并有其他感染性疾病，如血液系统、消化系统、泌尿系统感染；③合并严重免疫低下或心脑血管疾病；④合并遗传代谢性疾病、先天性畸形、先天性心脏病等；⑤合并其他肺部疾病，如肺结核、支气管哮喘等；⑥近期使用免疫抑制剂、抗凝药或激素等治疗。另选取50 例作先天性疾病筛查的健康新生儿纳入健康对照组。各组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。本研究经医院医学伦理委员会批准通过，受试者监护人均签署知情同意书。

表1 一般资料比较［n（%），（±s）］Table 1 General data［n（%），（±s）］

表1 一般资料比较［n（%），（±s）］Table 1 General data［n（%），（±s）］

组别细菌性肺炎组病毒性肺炎组支原体肺炎组健康对照组χ2/F 值P 值n 52 29 39 50性别男30（57.69）18（62.07）24（61.54）29（58.00）0.263 0.967女22（42.31）11（37.93）15（38.46）21（42.00）胎龄（周）37.41±1.23 37.34±1.17 37.80±1.19 37.92±1.29 0.108 0.914出生体质量（g）3214.99±410.15 3309.75±387.45 3198.83±409.81 3277.59±310.95 0.314 0.754日龄（d）15.75±2.97 15.81±2.46 15.49±2.18 15.80±2.99 0.177 0.838

1.2 方法

抽取所有研究对象4 mL 外周静脉血，3 000 rpm 离心10 min，分离血清，于低温下保存。血清PCT 检测采用免疫荧光定量法，通过法国生物梅里埃公司Minividas 全自动免疫荧光分析仪检测。α1-AT 含量检测采用免疫扩散法，试剂由上海生物制品研究所提供。HMGB1 含量检测采用酶联免疫吸附法，通过德国eppendorf 公司酶标仪极其配套试剂盒检测。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行统计分析，计数资料用n（%）表示，行χ2检验，计量资料采用（）表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用F 检验；通过受试者工作特征曲线（ROC 曲线）进行诊断鉴别评估效能分析，以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同组别患儿PCT、α1-AT、HMGB1 水平比较

血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平：细菌肺炎组＞非细菌肺炎组＞健康对照组，差异均有统计意义（P＜0.05）。见表2。

表2 不同组别患儿PCT、α1-AT、HMGB1水平比较（±s）Table 2 Comparison of PCT，α1-AT and HMGB1 levels among different groups（±s）

表2 不同组别患儿PCT、α1-AT、HMGB1水平比较（±s）Table 2 Comparison of PCT，α1-AT and HMGB1 levels among different groups（±s）

注：与健康对照组比较，aP＜0.05；与非细菌性肺炎组比较，bP＜0.05。

组别细菌性肺炎组非细菌性肺炎组病毒性肺炎组支原体肺炎组健康对照组F 值P 值n 52 29 39 50 PCT（ng/mL）9.81±1.68ab 1.15±0.11a 1.09±0.13a 0.22±0.02 989.514＜0.001 α1-AT（g/L）4.52±0.43ab 3.54±0.34a 3.37±0.38a 1.95±0.17 613.881＜0.001 HMGB1（ng/mL）18.59±1.83ab 15.03±1.94a 14.29±1.22a 10.36±1.07 294.803＜0.001

2.2 血清PCT、α1-AT、HMGB1 诊断细菌性肺炎效能分析

PCT、α1-AT、HMGB1 联合诊断细菌性肺炎ROC 曲线下面积为0.945，高于单独检测诊断值（P＜0.05）。见表3、图1。

表3 ROC 曲线诊断Table 3 ROC curve

图1 ROC 曲线Figure 1 ROC curve

2.3 血清PCT、α1-AT、HMGB1 鉴别细菌性与非细菌性肺炎效能分析

PCT、α1-AT、HMGB1 联合检测鉴别细菌与非细菌性肺炎ROC 曲线下面积为0.908，高于单独检测诊断值（P＜0.05）。见表4，图2。

表4 ROC 曲线诊断Table 4 ROC curve

图2 ROC 曲线Figure 2 ROC curve

3 讨论

早期诊断并合理使用抗生素对新生儿细菌性肺炎诊治具有重要意义，然而临床上新生儿细菌性肺炎表现不典型，易和病毒性感染二者相互混淆，同时病原体检测又耗时较长，患儿病情进展变化迅速，迫切需借助一些生化指标来进行早期的鉴别诊断［7-9］。

PCT 为降钙素前体，不具有激素活性，可在感染早期2～3 h 后出现升高，6～12 h 后显著高于正常值，24 h 到达高峰；PCT 值升高状态主要和感染相关，不受性别、体重、免疫妥协状态、类固醇、母体PCT 等的影响，在新生儿感染性疾病的诊断中具有较高的准确性［10］。本研究结果显示，细菌性肺炎组、支原体肺炎组、病毒性肺炎组患儿血清PCT 水平均较健康新生儿高，且相较于支原体肺炎组、病毒性肺炎组，新生儿细菌性肺炎组PCT 增高更为显著，这与国内外相关研究成果一致［11］。Wang 等［12］研究显示，PCT 测定虽不能区分病毒和支原体感染，但对于细菌性肺炎和非细菌性肺炎具有较高的鉴别价值。ROC 曲线是敏感度和特异度结合起来对诊断试验正确程度进行综合评价的一种方法，依照曲线形状以及曲线下面积进行分析，其结果不受患病率影响。

α1-AT 作为一种急性时相蛋白，可与靶细胞二者结合抑制血清中其他蛋白酶，其中对白细胞弹性蛋白酶的抑制效果最强。Gao 等［13］研究中显示感染性肺炎新生儿血清α1-AT 表达水平明显升高，其结果支持本研究结论。当机体内出现肺部急性炎症，患儿肺内白细胞数量即可出现增加，造成肺泡中巨噬细胞以及中性粒细胞衰老或死亡，释放出更多蛋白酶［14］。本研究中血清α1-AT 对于细菌性肺炎的诊断效能ROC 曲线分析，说明血清α1-AT 能够在一定程度上反映机体内细菌性感染的发生。

HMGB1 是一种高度保守型的蛋白分子，研究显示，HMGB1 作为重要的炎症介质与致炎因子，在启动和维持炎症瀑式反应中具有关键性作用［15］。本研究联合上述三项指标共同检测诊断新生儿细菌感染性，并鉴别新生儿细菌感染性与非细菌感染性肺炎，结果显示PCT、α1-AT、HMGB1联合诊断和鉴别下ROC 曲线下面积分别达到0.945、0.908，提高了诊断效能，在细菌感染性肺炎与病毒感染性肺炎、细菌感染性肺炎与支原体感染性肺炎的鉴别评估中有较高的评估价值。

综上所述，感染性肺炎新生儿血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平高于健康者，且细菌感染性肺炎高于非细菌感染性肺炎，三者联合应用对于细菌感染性与非细菌感染性的鉴别具有较高的评估价值。