西宁野生动物园大鵟、雕鸮血液生理生化指标及血清中部分维生素、矿物质含量的测定
2021-09-01汪晓飞
汪晓飞
(西宁野生动物园,青海 西宁 810006)
大鵟(Buteohemilasius)和雕鸮(Bubobubo)均属于国家二级保护野生动物,其中大鵟是我国鵟中个体最大者,体色变化比较大,上体通常为暗褐色,下体白色至棕黄色,并有暗色的斑纹,尾羽具有3~11条暗色横斑,先端灰白色。雕鸮是我国最大的夜行猛禽之一,广泛分布于世界各地,主要捕食鼠类、鸟类及小型爬行动物,对维持生态平衡起着重要的作用。Jung等报道了16只雕鸮救护后放归前测定的8项血液生化指标测定范围[1]。许杰等报道了1例疑似灭鼠药二次中毒雕鸮放归野外前测定的雕鸮的14项血液生理生化指标[2]。郭婷婷等在大鵟和长耳鸮的部分血液生理生化指标及血细胞的显微结构观察中报道了3只大鵟和3只长耳鸮血液生化指标19项,血象指标12项[3]。在野生动物血液指标对比研究方面,有研究表明,笼养成年白冠长尾雉、白腹锦鸡、白鹇等野生禽类的所测生理生化指标在雌雄之间差异不显著(P>0.05)[4-6]。目前关于大鵟和雕鸮血液生理生化、维生素等指标的报道较少,本试验通过对西宁野生动物园6只雕鸮和6只大鵟的14项血生化指标、19项血常规指标、5项维生素和5项矿物质指标的测定,提升了野生动物资源保护和救护力度,对野生动物救护、野生动物疫源疫病监测有一定的参考价值。
1 材料与方法
1.1 试验动物 西宁野生动物园内饲养的健康成年雕鸮和大鵟,数量为每种动物6只,年龄3~4岁,雌雄各3只,以上动物均处于非繁殖期,所有动物均定期驱虫,外观被毛光滑,食欲、粪便均正常,经兽医临床检查确认为健康成年个体。
1.2 血液样本的采集 采血部位消毒,翼下静脉采血。血常规检测前使用EDTA抗凝管采血,混匀后立即取样进行检测。血生化、矿物质、维生素指标检测前使用促凝管采血,采血后室温静置采血管2 h, 3 000 r/min离心15 min,分离出血清,保存于-20 ℃ 冰箱内待检。
1.3 测定方法 利用mindray(迈瑞) BC-2800Vet 全自动血液细胞分析仪测定2种动物血液中的白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、淋巴细胞数(Lymph)、单核细胞数(MON)、中性粒细胞数(Gran)、淋巴细胞百分比(Lymph%)、单核细胞百分比(MON%)、中性粒细胞百分比(Gran%)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、平均红细胞分布宽度变异系数(RDW)、血小板数目(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)、嗜酸性粒细胞百分比(Eos%)共19项指标。利用IDEXX vetTest8008血液生化仪测定2种动物白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、丙谷转氨酶(ALT)、淀粉酶(AMY)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、球蛋白(GLOB)、血糖(GLU)、总胆红素(TBIL)、总蛋白(TP)、钠(Na)、钾(K)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(CHOL)共14项指标。用分光光度法测定血清中钙(Ca)、磷(Pi)、铁(Fe)、铜(Cu)、锌(Zn)(试剂盒为南京建成公司产品)含量。用酶联免疫吸附试验测定血清β-胡萝卜素(β-carotene)、血清维生素A(Vitamine A)、血清维生素C(Vitamine C)、血清维生素E(Vitamine E)、血清维生素B2(Vitamine B2)(试剂盒为上海酶联生物公司产品)共10项生化指标。
1.4 统计方法 采用SPSS 25.0软件对采集的动物血液样本原始数据进行统计分析,对各组数据进行方差齐性检验和正态分布检验,对服从正态分布的数据通过正态分布法、对不服从正态分布的数据通过百分位数法,根据所测指标的实际意义求出双侧95%可信区间作为指标的参考范围。运用t检验对各组间差异进行比较,并参考各类文献,对比数据结果进行分析。
2 结果
2.1 血常规指标的测定 结果见表1。在雕鸮和大鵟中,RBC、HGB、MCV、HCT、MCH、MCHC、RDW、PDW等指标均差异极显著(P<0.01),两者MPV差异显著(P<0.05),PLT差异不显著(P>0.05);同时,两者的WBC、Lymph、MON、Gran等指标差异极显著(P<0.01),而Lymph%、MON%、Gran%、Eos%等指标均无显著差异(P>0.05)。
表1 雕鸮、大鵟血常规指标Table 1 Blood routine indicators of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)
2.2 血生化指标的测定 结果见表2。雕鸮和大鵟两者的血生化指标中,ALT、GLOB、AST等指标差异性极显著(P<0.01);ALP差异性显著(P<0.05);ALB、AMY、BUN、CRE、GLU、TBIL、TP、Na、K、CHOL等指标差异不显著(P>0.05)。
表2 雕鸮、大鵟血生化指标Table 2 Blood biochemical indicators of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)
2.3 矿物质、维生素的测定 结果见表3。雕鸮和大鵟两者的Ca、Pi、Fe、Zn、Cu等矿物元素指标差异性均不显著(P>0.05);两者维生素比对中,维生素C、β-胡萝卜素指标差异性不显著(P>0.05),而维生素A、维生素E等指标差异极显著(P<0.01),维生素B2指标差异性显著(P<0.05)。
表3 雕鸮、大鵟矿物质、微量元素指标Table 3 Mineral and trace element indexes of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)
3 讨论
血生化、血常规等检查是监测野生动物健康状况的重要依据,准确有效的血液指标数值对动物个体健康评估及疾病监测、生理状态评定具有十分重要的作用。本试验采用常规法、分光光度法、酶联免疫吸附试验和全自动血液生化仪测定、全自动血液细胞分析仪测定等方法对雕鸮、大鵟2种猛禽血液的血生化、血常规、血清维生素和矿物质等指标进行测定。本试验所涉及的动物样本均为西宁野生动物园圈养的动物,且数量较少,用以确定一类动物的血液指标正常参考范围来说较为困难,但本试验测定的数据在分析评估本地区雕鸮、大鵟等野生禽类的机体健康状况方面仍有一定科学意义,可以作为雕鸮、大鵟在血液生理生化领域的辅助诊断依据和研究基础数据。
运用t检验方法对比大鵟和雕鸮的各项数据进行分析后发现,本试验中,2种动物肝肾功能指标中ALB、GLU、ALP等差异性不显著(P>0.05)。大鵟血清中白细胞相关指标WBC、Lymph、MON、Gran等指标均高于雕鸮,且差异极显著(P<0.01)。这表明除个体差异外,雕鸮的机体免疫能力弱于大鵟。2种动物的红细胞相关指标中,大鵟的RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC等指标均高于雕鸮,且两者差异极显著(P<0.01),由于本地的大鵟栖息地海拔相对高于雕鸮,这种差异性的出现表明大鵟的携氧能力高于雕鸮。对比2种动物的维生素指标数据,维生素C、β-胡 萝卜素指标差异性不显著(P>0.05),而维生素A、维生素E等指标差异极显著(P<0.01),维生素B2指标差异性显著(P<0.05),由于两者食物来源和数量相同,因此考虑这种差异的出现是由于物种不同导致机体对维生素吸收利用的程度不同。
本试验中测得的雕鸮ALB指标数据与Jung等[1]研究中的ALB数据差别很大。Jung等测定的白蛋白平均值为34.9 g/L,而本试验测定的白蛋白平均值为43.17 g/L。但Jung等研究中的动物样本为救护后经治疗放归的16只雕鸮,其中41.7%的雕鸮感染吸虫,而本试验中的雕鸮均为健康个体。根据沈永林等[7]的报道,山羊试验感染肝片吸虫囊蚴后,血清总蛋白前10周有缓慢上升趋势,之后呈直线下降,这或许正是导致本试验ALB数据与Jung等测得的ALB数据差别较大的原因。本试验血生化数据与许杰等[2]试验中的血生化数据相比较,TBIL、GLOB等指标差别较大,由于许杰等研究中采集的雕鸮血液样本为中毒后治疗康复放归前采集获得,因此这种指标水平不同的出现可能与雕鸮的病理过程、生活环境等因素相关。
与郭婷婷等[3]的研究结果相比,本试验中大鵟的血红蛋白和血红蛋白浓度指标平均值均明显高于郭婷婷等测定的大鵟指标数据,郭婷婷等测定的ALT、AST等指标则明显高于本试验中测得的数据。由于郭婷婷等的样本为未救护成功的大鵟,而本试验中的动物为健康个体,因此考虑这种差异的出现可能是因为郭婷婷等的样本出现失血、受伤等导致的病理性变化。由于雕鸮、大鵟的维生素、矿物质相关指标的数据相关文献报道很少,因此缺乏比对分析的依据,有待后续研究。