严重脂血对Sysmex XE-2100 全自动血液分析仪血细胞检测结果的影响

王俊美

血细胞分析是门诊患者和住院患者常需进行的一项检查,是多种疾病诊断的必要检查,检测结果准确性直接关系到患者是否可得到准确的诊断及正确治疗［1］。Sysmex XE-2100 全自动血液分析仪是我国医院实验室应用较为广泛的一类全自动五分类血液分析仪,可实现迅速检测,不仅应用了传统电阻抗法、射频法,同时也应用到流式细胞激光技术,并应用荧光染料、特殊化学试剂进行静脉血白细胞(white blood cell,WBC)分类,使WBC 分析获得更高的敏感度与准确度［2,3］。不过血细胞分析结果是否准确,不仅与患者准备、标本采集、仪器性能有关,也有黄疸、溶血、脂血这些血液本身问题有关［4］。临床发现,进行血细胞分析时如果标本发生脂血,则血细胞检测结果准确性会明显降低［5］。既往研究中显示脂血造成影响的指标主要包括血红蛋白(hemoglobin,Hb)与相关参数,但本院进行分析发现,不同程度的脂血对血细胞检测结果会产生不同的影响,严重止血甚至会影响到WBC 计数与分类,但既往对这方面缺乏研究,本研究选取2018 年1 月～2019 年12 月200 份无脂血、溶血以及黄疸的标本作为研究材料,具体分析如下。

1 材料与方法

1.1 材料 以2018 年1 月～2019 年12 月在本院进行健康体检的200例受检者的血液标本为研究对象,其中男120例,女80例；年龄最小20 岁,最大56 岁,平均年龄(34.15±10.16)岁。

1.2 方法 200例受检者均在清晨空腹状态下应用EDTA-K2抗凝管采集3 ml 血液标本,常温条件下保存,全部标本均除外存在黄疸、溶血、脂血、高WBC。全部标本均在采集后2 h 之内完成检测。将200 份血标本随机分为三组［对照A 组(66例)、对照B 组(67例)、对照C 组(67例)］,先常规进行血细胞检测,然后以3000 r/min速度进行10 min离心处理,将血浆成分去除,相应加入10、50、100 μl 脂肪乳剂,选择全自动生化分析仪(日立7600)进行甘油三酯(triglyceride,TG)水平的测定,TG 6.0～10.0 mmol/L 视为轻度脂血(轻度脂血组),TG 10.1～14.0 mmol/L 视为中度脂血(中度脂血组),TG ＞14.1 mmol/L 视为重度脂血(重度脂血组)［6］。然后均按照闭盖模式对脂血标本的血常规进行检测。

1.3 观察指标 比较轻度脂血组与对照A 组、中度脂血组与对照B 组、重度脂血组与对照C 组的血细胞检测结果,血细胞检测指标包括：WBC、Hb、血小板计数(blood platelet,PLT)、红细胞计数(red blood cell,RBC)、平均红细胞容积(mean corpuscular volume,MCV)、红细胞比容(hematocrit,HCT)、平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)、中性粒细胞(neutrophil,NEUT)百分比(NEUT%)、单核细胞(monocyte,MONO)百分比(MONO%)、淋巴细胞(lymphocyte,LYMPH)百分比(LYMPH%)、嗜碱性粒细胞(basophil granulocyte,BASO)百分比(BASO%)、嗜酸性粒细胞(eosinophils,EOS)百分比(EOS%)。

1.4 统计学方法 采用SPSS23.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差()表示,采用t 检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 轻度脂血组与对照A 组的血细胞检测结果比较 轻度脂血组与对照A 组的RBC、Hb、PLT、WBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEUT%、MONO%、LYMPH%、BASO%、EOS%检测结果比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 轻度脂血组与对照A 组的血细胞检测结果比较()

表1 轻度脂血组与对照A 组的血细胞检测结果比较()

注：两组比较,P＞0.05

2.2 中度脂血组与对照B 组的血细胞检测结果比较 中度脂血组的RBC 低于对照B 组,Hb、WBC、MCV、MCH、MCHC、MONO%高于对照B 组,差异具有统计学意义(P＜0.05)；两组的PLT、HCT、NEUT%、LYMPH%、BASO%、EOS%比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表2 中度脂血组与对照B 组的血细胞检测结果比较()

表2 中度脂血组与对照B 组的血细胞检测结果比较()

注：与对照B 组比较,aP＜0.05

2.3 重度脂血组与对照C 组的血细胞检测结果比较 重度脂血组的RBC、LYMPH%低于对照C 组,Hb、PLT、WBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEUT%、MONO%高于对照C 组,差异具有统计学意义(P＜0.05)；两组的BASO%、EOS%比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

表3 重度脂血组与对照C 组的血细胞检测结果比较()

表3 重度脂血组与对照C 组的血细胞检测结果比较()

注：与对照C 组比较,aP＜0.05

3 讨论

临床中肿瘤晚期患者、消化系统疾病患者、高脂血症患者因为机体血脂水平偏高,胃肠外营养多以脂肪乳剂为营养液,导致患者抽取的血液标本为脂血状态［7］。临床进行血细胞检测时脂血对检测结果的影响最明显［8］。既往研究显示,脂血会影响血液分析仪检测时WBC、Hb、MCH、MCHC、PLT 等多项指标的结果［9］。

本研究血细胞检测应用的是Sysmex 公司的XE-2100 全自动血液分析仪,相较传统检测仪,这一代产品在性能、参数上均有明显改进,基本消除了轻度脂血对血细胞检测结果的影响［10］。本研究轻度脂血组与对照A 组的RBC、Hb、PLT、WBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEUT%、MONO%、LYMPH%、BASO%、EOS%检测结果比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。证实Sysmex XE-2100 全自动血液分析仪的良好应用价值。本研究中度脂血组的RBC 低于对照B 组,Hb、WBC、MCV、MCH、MCHC、MONO%高于对照B 组；重度脂血组的RBC、LYMPH%低于对照C 组,Hb、PLT、WBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEUT%、MONO%高于对照C 组,差异均具有统计学意义(P＜0.05)；提示标本溶血后应用Sysmex XE-2100全自动血液分析仪进行血细胞检测会不同程度影响检测结果,脂血程度越严重,对结果准确性的影响越大。以下针对具体指标分析影响原因：①对WBC 分类的影响：检测原理包括应用WBC DIFF 检测通道、细胞化学荧光染色技术结合半导体激光流式细胞原理,被检细胞被半导体激光照射时,按照每个细胞生成的信号完成细胞的分辨,纵坐标表示侧向荧光强度,可将亚甲蓝对细胞内DNA、RNA 的染色强度反映出来,横坐标则为侧向散射光强度的表示,可以将细胞内容物反映出来,散射光信号和荧光信号会一起形成散点图、直方图,从而能实现NEUT、LYMPH、MONO 的区别［11］。②对Hb 的影响：原理为十二烷基磺酸钠氧化亚铁血红素中Fe2+,形成SLS-Hb 衍生物,于555 nm 波长完成比色测定。但脂肪乳乳白色浑浊会使Hb 在比色法下的测定结果受影响,引起Hb 结果假性升高,导致MCH、MCHC 结果不准确［12］。③对RBC/PLT 的影响：RBC/PLT 检测的原理为经典电阻抗原理,前鞘流和后鞘流保证流经检测部位的RBC/PLT 逐个通过,可防止细胞并列通过、侧向通过导致的检测误差。不过脂肪乳颗粒流经检测部位会对检测产生影响,影响RBC 计数,进而导致MCV、MCH 检测结果受影响［13］。④对WBC 的影响：在流式细胞技术下逐个分析通过检测部位的细胞或颗粒,防止重复检测或发生漏检,不过不管是应用流式细胞技术还是应用电阻抗法,都无法做到完全识别每个细胞,导致结果受影响［14］。

本研究轻度、中度、重度溶血标本检测的BASO%、EOS%结果均与对照组无明显差异,分析是由于对于这两项指标的检测,Sysmex XE-2100 全自动血液分析仪专门设立了BASO/EOS 通道,经将特殊溶血剂加入后对其他细胞产生溶解,形成裸核,仅有BASO/EOS 完整性得以保留,然后按照细胞的大小以及体积实施专门检测,所以不同程度脂血都没有明显影响到指标检测结果。为减轻脂血对血细胞检测结果的影响,最充分发挥Sysmex XE-2100 全自动血液分析仪应用价值,需要熟练掌握脂血干扰判断方法,本研究总结如下：当仪器显示乳糜/Hb 干扰提示,或血涂片中出现不同大小的不着色脂肪球,或放置后血浆部分出现乳白色浑浊,都应该怀疑为脂血标本,这种情况下应该对甘油三酯(TG)水平进行测定,具体判断脂血程度。而可采取的纠正方法为：离心处理后将上层血浆成分去除,并加入相同体积的Sysmex XE-2100 全自动血液分析仪原装配套稀释液,混匀后进行血常规指标检测,同时标明纠正前、纠正后的检测结果,另外在化验单中备注脂血标本,供医生诊断时判断。

综上所述,脂血会影响Sysmex XE-2100 全自动血液分析仪血细胞检测结果,中度脂血会影响RBC、Hb、WBC、MCV、MCH、MCHC、MONO%指标结果,重度脂血另外会影响PLT、HCT、NEUT%、LYMPH%水平,临床应加强重视,做好脂血标本的预防,保证标本可用性,确保指标检测准确性。