气相色谱-质谱法测定茶叶中6种农药残留

刘伟悦，刘梦瑶

北京张一元金桥茶叶有限公司（北京 101102）

茶叶源于中国，最早被作为祭品使用。春秋后期，茶叶被人们作为菜食，在西汉中后期发展为药用以及宫廷高级饮料，西晋以后成为普及民间的普通饮料。茶叶中含有儿茶素、茶多酚、氨基酸、矿物质等成分，有安神明目、解毒消暑、消食醒酒、增强免疫力等功效，被誉为“世界三大饮料之一”。

为提高茶叶产量，农药在茶叶病虫防治中得到了广泛使用，由此带来的农药残留可能危害消费者健康。随着生活水平日益提高，人们对茶叶的质量和安全性有了更高要求[1]。陈红平等[2]研究发现，农药在茶汤中的浸出率取决于农药的理化性质（内因）和冲泡方法（外因）。一般认为农药残留的种类和含量在国家标准允许范围内，不会对人体产生明显的健康危害或潜在的危害，这个标准是通过严格的安全风险评估后确定的，同时也会根据相关情况的发展变化不断修订标准，最新版国家强制性标准GB 2763—2019《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》[3]中涉及茶叶中农药最大残留限量达到65种。国内外农药残留的检测方法主要有气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法、气相色谱-串联质谱法、液相色谱-串联质谱法等[4-7]。其中，液相色谱-质谱联用法和气相色谱-质谱联用法利用被测样品离子质荷比，定性定量更加准确，检测灵敏度更高，对于茶叶类复杂基质中农药残留检测有其独特的技术优势。

试验建立适用于检测茶叶中农药残留的气相色谱-质谱联用法，该方法简单快速、分离度好、重现性好、精密度高，可满足同时检测茶叶中西玛津[8-11]、莠去津、氟虫脲、百菌清[12-16]、毒死蜱和喹硫磷6种农药残留的要求。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

丙酮中西玛津、莠去津、氟虫脲、毒死蜱、喹硫磷，正己烷中百菌清溶液标准样品（质量浓度均为100 μg/mL），内标正己烷中环氧七氯（质量浓度为100 μg/mL）（农业部环境保护科研监测所）；乙腈，甲苯、正己烷（均为色谱纯，赛默飞世尔科技（中国）有限公司）；无水硫酸钠（分析纯，北京化工厂，经550 ℃灼烧4 h，储存于干燥器中，冷却后备用）；Cleanert TPT固相萃取柱（Agela公司）；0.22 μm尼龙微孔过滤膜（津腾公司）。

1.2 仪器与设备

7890B-5975C气相色谱-质谱仪（美国安捷伦公司）；CM-12水浴氮吹仪（北京成萌伟业科技有限公司）；RE-2000B旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；QL-901涡旋混合器（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）；HP-5MS色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；SE202F电子分析天平（奥豪斯）；TDL-40B台式低速离心机（飞鸽牌）；HY-5A型回旋式振荡器（江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 待测液制备[17]

称取5 g（精确至0.01 g）粉碎均匀的试样，用体积20.0 mL的乙腈振荡提取1 h，在4000 r/min下离心5 min。分取4 mL上清液，过Cleanert TPT固相萃取柱（萃取柱中加入约2 cm高无水硫酸钠，用10 mL乙腈-甲苯（3+1）洗脱液预洗，弃去流出液）净化，用20 mL乙腈+甲苯（3+1）洗脱，收集的洗脱液水浴40 ℃旋蒸至近干，用正己烷定容1 mL，加40 μL环氧七氯（35 μg/mL）内标，过0.22 μm微孔过滤膜，混匀，用于气相色谱-质谱测定，以基质标准溶液工作曲线定量。

1.3.2 标准曲线的绘制

混合标准储备液的配制：用移液枪取农药标准溶液，加入10.0 mL容量瓶中，用正己烷稀释并定容。各农药标准溶液的取用体积见表1。

表1 混合标准储备液质量浓度

基质空白溶液的制备：同待测液的制备方法，用未检出待测农药的普洱生茶样品制作基质空白溶液，洗脱液旋蒸至近干。用正己烷标液定容，过0.22 μm滤膜，所得溶液为基质空白溶液。

基质混合标准溶液的配制：将1 mL混合标准溶液氮吹至近干，用基质空白定容至1 mL。配制6点标准曲线，分别移取20，40，60，80，100和200 μL上述混合标准溶液，用基质空白溶液定容至1 mL，加40 μL环氧七氯（35 μg/mL）内标，混匀，待上机。基质标准曲线质量浓度见表2。

表2 基质标准曲线质量浓度 单位：μg/L

1.3.3 气相色谱-质谱条件

气相色谱进样口温度260 ℃；柱温40 ℃保持1 min，30 ℃/min升温至250 ℃，保持1 min；3 ℃/min升温至280 ℃，保持2 min；30 ℃/min升温至310 ℃，保持3 min；压力为9.1 Psi，载气采用高纯氦气He（≥9.999%），HP-5色谱柱，柱流速为1.2 mL/min，不分流进样，进样量1 μL。

质谱采用EI离子源，电离能量70 eV；离子源温度230 ℃；四极杆温度150 ℃；传输线温度280 ℃；溶剂延迟时间6.5 min。采用选择离子扫（SIM）方式定性定量。化合物英文名称、保留时间及质谱参数见表3。

表3 保留时间和质谱特征离子

2 结果与分析

2.1 标准曲线与线性范围

气质联用仪经调谐通过后，即可进样分析。以所测化合物与环氧七氯响应值比为纵坐标，浓度比为横坐标，以3倍信噪比（S/N）计算方法检出限，以10倍信噪比（S/N）计算方法定量限[18-21]，茶叶中6种农药线性回归方程、相关系数、检出限和限值见表4。

表4 茶叶中6种农药线性回归方程、相关系数、检出限和限值

2.2 加标回收和精密度

选择普洱生茶空白样品进行加标处理，处理方法同待测液的制备方法，按照所建立的方法处理、测定，每个加标量重复6次，验证试验方法的精密度。空白样品中6种农药加标回收结果见表5。从表5可以看出，6种农药的加标回收率在75.4%～114.6%，表明方法准确度高；精密度在0.3%～7.8%，表明方法重现性好。

表5 农药加标回收率及精密度

2.3 3种茶叶样品加标回收率分析

对绿茶、红茶、茉莉花茶3种茶叶进行6种农残加标试验，制备均匀样品，采用试验方法提取、净化、上机测试，添加水平及回收率见表6。从表6可以看出，3种茶叶中6种农药的回收率在70.5%～108.0%，表明方法可用于茶叶中6种农药残留的同时检测。

表6 3种茶叶加标回收

2.4 样品测定

随机抽取绿茶、红茶、黑茶、乌龙茶、茉莉花茶5种茶样共187批次，采用建立的检测方法对该批样品进行检测。结果表明，西玛津、莠去津、百菌清、氟虫脲、喹硫磷均未检出，而毒死蜱的检出率较高。共有152批次样品中检出毒死蜱，各种茶类抽检批次，检出毒死蜱批次和毒死蜱最高检出含量见表7。由表7可知，乌龙茶和茉莉花茶毒死蜱检出率最高，但含量均低于GB 2763—2019《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》规定的茶叶农药残留限值。

表7 茶叶样品中毒死蜱检出情况

3 结论

建立气相色谱-质谱联用法，可同时测定茶叶中西玛津、莠去津、氟虫脲、百菌清、毒死蜱、喹硫磷的残留量，且方法线性相关性好、准确度高、精密度好。试验结果一方面可为茶叶产品标准的完善提供数据，另一方面可为监管部门对茶叶产品的风险监测提供方法参考。