金丹平炎胶囊对慢性盆腔炎模型大鼠输卵管通畅率及炎性因子表达的影响

王英军，孙英莲

（吉林省中医药科学院，吉林 长春 130012）

慢性盆腔炎（chronic pelvic inflammatory disease）是女性常见的生殖道感染性疾病，其临床表现有瘢痕粘连、下腹部疼痛、盆腔充血、低热、常合并不孕和异位妊娠等疾病，严重影响女性的生殖健康，增加患者的心理负担和经济负担，因此慢性盆腔炎的防治已日益为人们所重视[1,2]。金丹平炎胶囊是由金银花、黄芪、丹参、牡丹皮、鱼腥草、醋延胡索、川楝子和甘草等8味中药组成的复方制剂，具有清热解毒、益气化瘀之功效，用于慢性盆腔炎引起的下腹部坠胀疼痛及腰骶部酸痛、月经不调和带下增多等。以往治疗盆腔炎常规以益气、活血化瘀治疗为主，该处方在活血化瘀药物中应用了金银花，采用清热解毒法治疗慢性盆腔炎，因此，我们希望通过本次研究观察金丹平炎胶囊对慢性盆腔炎模型大鼠子宫输卵管通畅情况及炎症细胞因子表达的影响，进而探讨金丹平炎胶囊对慢性盆腔炎大鼠的干预作用和治疗作用机制，为临床治疗慢性盆腔炎提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物 金丹平炎胶囊是从金银花、鱼腥草和丹参等8味药材中分离提取而制成的胶囊剂，由吉林省中医药科学院制剂室提供，内容物为棕黄色颗粒，每克相当于生药3.25 g。临用时以蒸馏水配成所需浓度。妇炎康片由吉林省中研药业有限公司生产，国药准字Z22020211。

1.1.2 动物 雌性Wistar大鼠，体重200~240 g，吉林大学基础医学院动物实验中心提供，合格证号SCXK-（吉）2007-0003。

1.1.3 试剂 苯酚，天津市塘沽区新发化工有限公司生产，批号：20120320。阿拉伯树胶粉，上海化学试剂采购供应站经销，批号：P11012。

1.1.4 仪器 T-1000型电子天平，常熟双杰测试仪器厂产品；高速低温离心机（D3024R），美国赛洛捷克（SCILOGEX）公司生产；ST-360酶标仪，上海科华实验系统有限公司生产。

1.2 方法

1.2.1 建立慢性盆腔炎动物模型 参照文献[3]，应用苯酚胶浆致炎法，取体重220~240 g雌性大鼠60只，用乙醚麻醉，常规消毒腹部皮肤，于下腹部正中切口约2 cm，暴露双侧输卵管，其中10只仅进行开腹和关腹手术，未进行子宫处理。剩余50只大鼠用0.25 mL注射器自子宫分叉处向两侧卵巢方向缓慢注入25%的苯酚胶浆0.06 mL（液化苯酚5 mL、阿拉伯胶粉1 g、甘油4 mL加蒸馏水至20 mL）造模，注毕分层关腹，消毒术区。

1.2.2 分组及给药 于造模24 h后将60只大鼠随机分成6组，分别为模型对照组、阳性对照组（妇炎康1 g/kg）、金丹平炎胶囊高（1.0 g/kg）、中（0.5 g/kg）、低（0.25 g/kg）3个剂量组，给药体积均为10 mL/kg，假手术10只大鼠为正常对照组。每日1次，连续灌胃给药21d，假手术对照组、模型对照组灌服同体积水10 mL/kg。

1.2.3 观察指标及测定 末次给药后1 h，10%水和氯醛腹腔注射麻醉大鼠，麻醉后腹主动脉采血，3 000 r/min离心15 min，严格按照操作说明书用ELISA法进行IL-6、TNF-及suPAR浓度测定，采血后处死大鼠，取出子宫，向子宫两侧注入美蓝液，检查子宫输卵管通畅情况，计算通畅率，结果见表1。

1.2.4 统计方法 用SPSS17.0统计软件进行统计分析。统计计量资料用t检验，组间比较用单因素方差分析。

2 结果

2.1 对苯酚胶浆所致慢性盆腔炎模型大鼠输卵管通畅作用的影响

由表1结果可见，妇炎康片1 g/kg组和金丹平炎胶囊1、0.5 g/kg组均能明显提高输卵管炎症模型大鼠子宫输卵管的通畅率，与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01）。

表1 金丹平炎胶囊对慢性盆腔炎模型大鼠输卵管通畅作用的影响Table 1 The effect of Jindanpingyan capsule on tubal patency in rats with the chronic pelvic inflammatory disease

2.2 对慢性盆腔炎模型大鼠血清中IL-6、TNF-及suPAR浓度的影响

表2 金丹平炎胶囊对慢性盆腔炎模型大鼠血清中IL-6、TNF-及suPAR浓度的影响Table 2 The effect of Jindanpingyan capsule on the serum IL-6、TNF-and suPARconcentration in rats with a chronic pelvic inflammation

注：n=10，模型组与对照组比较△△P＜0.01；给药组与模型组比较：*P＜0.05，**P＜0.01。Note:n=10,The model group compared with the control group△△P＜0.01;The comparison between the treatment group and the model group*P＜0.05,**P＜0.01.

组别Group suPAR（ng/mL）假手术组 Shamo peration group 31.5±3.67 12.01±2.34 0.24±0.037模型组 Model group 102.5±8.27△△ 26.3±6.60△△ 0.51±0.052△△妇炎康片 Fuyankang tablet 1 88.7±11.31** 20.3±3.99* 0.42±0.095*剂量（g/kg）Dose IL-6（pg/mL）TNF-（pg/mL）79.8±8.65** 17.7±2.72** 0.38±0.063**金丹平炎胶囊 Jindanpingyan capsule 0.5 91.2±7.32** 19.7±2.92* 0.43±0.08*0.25 95.3±9.13 21.5±3.32 0.46±0.055 1

3 讨论

慢性盆腔炎是女性内生殖器及其周围结缔组织和盆腔腹膜发生的炎症，是盆腔感染后期持续存在的慢性炎症状态，以发病部位的疼痛、肿胀、粘连及增生为主要表现。近年来其发病率呈逐渐上升的趋势，严重影响妇女的身心健康，降低生活质量，故探讨该病的发病机理及治疗方法，防止其反复发作，已成为临床妇科研究的重点[4,5]。而采用与人类慢性盆腔炎发病特征相似、接近发病机理的动物模型更为重要。苯酚胶浆致炎法造成的子宫增粗、红肿、充血及与周围组织粘连等一系列炎性病变与临床盆腔炎性疾病相似，方法简单易掌握，造模成功率高，现已成为探讨盆腔炎发病机制广为应用的动物模型。

现代医学研究发现，慢性盆腔炎主要是由沙眼衣原体和淋病奈瑟菌感染所致，慢性阶段的病理改变为急性盆腔炎遗留的病理改变，并无病原体的存在，且与炎症因子等的异常改变有关[6,7]。白介素6（IL-6）是炎症起始阶段的重要致炎因子，是典型的具有炎症介导活性的细胞因子，具有多种生物学活性，能够传递信息，激活与调节免疫细胞的增殖与分化，在炎症反应中起重要作用[8]。TNF-是一种参与全身炎症的细胞因子，它在免疫调控、感染与炎症反应中起着关键作用[9]，是目前认为致纤维化的重要细胞因子[10]。本试验通过对苯酚胶浆所致慢性盆腔炎模型大鼠的研究结果显示，模型组大鼠血清中TNF-浓度明显增高，而TNF-的高表达促进了炎症因子IL-6的表达，从而加剧炎症反应，造成盆腔局部粘连和组织充血。经治疗后，金丹平炎胶囊高、中剂量组及妇炎康片组能够显著提高模型大鼠子宫输卵管通畅率，降低大鼠血清中IL-6、TNF-的浓度且具有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01），两组比较，金丹平炎胶囊高剂量组略好于妇炎康片。提示金丹平炎胶囊及妇炎康片可能是通过对抗TNF-的表达抑制炎症因子IL-6的释放，调节黏附分子的表达，降低炎性细胞在局部组织的过度聚集和浸润，从而抑制慢性炎性粘连形成及抗感染作用，促进盆腔组织的修复。

可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（suPAR）是近年来发现的新型炎症标志物，可以与多种配体发生反应，参与细胞迁移、分化、趋化因子受体调节和信号传递等[11,12]。suPAR的浓度能反应机体免疫系统的活化水平[13-15]，实验结果显示，金丹平炎胶囊及妇炎康片均可明显降低由苯酚胶浆所致慢性盆腔炎模型大鼠血清中suPAR的浓度，具有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01），两组比较，金丹平炎胶囊高剂量组略优于妇炎康片但无统计学意义，表明金丹平炎胶囊可能是通过参与细胞的转移提高机体免疫活化水平，从而减轻机体的炎症反应进展，促进组织恢复，起到治疗作用。

综上所述，通过对苯酚胶浆所致慢性盆腔炎模型大鼠的治疗，提示金丹平炎胶囊可能是通过抑制IL-6和TNF-释放，降低suPAR的浓度，提高机体免疫力，从而减轻炎症组织粘连，抑制炎症的发展。而suPAR在慢性盆腔炎疾病中研究较少，其作用机制还有待进一步研究。