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鸡传染性贫血病毒与大肠杆菌混合感染的诊治

2021-08-01白爱平

中国畜禽种业 2021年7期
关键词:琼脂雏鸡菌落

白爱平

(甘肃省通渭县李家店乡畜牧兽医站 743300)

鸡传染性贫血主要是通过鸡传染性贫血病毒造成雏鸡再生性障碍贫血传染病与全身淋巴组织萎缩为基础特征的一种传染病,本质是鸡群免疫抑制病。鸡传染性贫血病毒广泛存在于鸡群中,涉及水平传播与垂直传播的形式,对雏鸡造血器官与淋巴组织器官加以侵害,引出雏鸡出现贫血和骨髓变黄现象,严重情况下增加其他病毒性与细菌性混合感染的可能性[1]。在临床实践调查中研究1 例相关病例,获取下列报道。

1 一般资料

某养鸡场购进三皇肉鸡苗1 万只,在30 日龄时出现发病现象。患病鸡表现出精神委顿与食欲不振的现象,自身羽毛相对蓬松。皮肤黏膜且肉冠苍白。2d 后个别鸡开始死亡,死亡率约为70%。对患病鸡经恩诺沙星与庆大霉素治疗,没有出现显著的改善趋势。在40 日龄时把3 只患病鸡运送到兽医诊断机构[2]。

2 剖析检查

剖检3 只患病鸡,病理变化基本上相同。患病鸡表现出肌肉苍白的现象,且伴随贫血情况,血液相对稀薄,不容易凝固。肝表面出现灰白色坏死灶与出血点,心肌出血,骨髓萎缩,脂肪呈现淡黄色,气囊相对浑浊,表面可见纤维素渗出物。

3 实验室研究

3.1 实验室准备

伊红美兰琼脂、SS 琼脂、Columbia 羊血琼脂、MH 肉汤,这些均来自北京路桥企业;GNI+革兰阴性检验卡来源于法国梅里埃企业[3];药敏纸片来源于微生物试剂企业;药敏试验质量管理菌株大肠杆菌来源于兽药监察机构。

3.2 细菌培养

把无菌获取的病料进行Columbia 羊血琼脂平板接种,处于36℃的环境培养1d,选择可疑菌落涂片镜单纯培养。把纯培养菌落接种在伊红亚甲蓝琼脂、SS 琼脂中,处于37℃的环境培养1d,了解菌落培养情况。Columbia 羊血琼脂平板接种的病料,初步培养得到纯度较高的细菌,然后进行涂片镜检查,记作G-球杆菌[4]。Columbia 羊血琼脂上培养分离菌,构建圆形且灰白色的菌落。肉汤内培养为均匀浑浊的形式,管壁存在菌环。伊红美兰琼脂存在黑色的金属菌落;SS 琼脂培养基上不存在菌落生长情况。

3.3 VITEK 鉴定与药敏试验

立足于菌落的培养特征,挑选GNI+革兰阴性检测卡,通过VITEK-32 细菌检定仪器得到分离菌是大肠杆菌。针对药敏试验,在MH 琼脂平板中进行细菌纯培养物的接种操作,借助纸片法完成体外药敏试验,在35℃的环境培养18h,记录试验结果。具体表现:经过分离处理的大肠杆菌给予头孢噻呋与大观霉素产生显著敏感特征,对庆大霉素的敏感特征为一般程度,且对阿莫西林等药物表现出耐药特征,如附表。

附表 药敏试验情况

3.4 分离病毒和鉴定PCR

把收集的病料通过PBS 制作为组织匀浆+双抗的形式(10%),离心处理后把上清接种10 日龄的3 枚鸡胚(每枚0.2ml)放入37℃的环境中培养48h,同时开展无菌尿囊液收集处理。结合病毒核素提取说明书完成DNA 病毒信息提取。通过PCR 方式实施鸡传染性贫血病毒检测,把PCR 产物加以凝胶电泳处理,处于390bp 的情况呈现相对清晰的条带,和预期产物的大小一致,也就是表现出鸡传染性贫血病毒阳性[5]。

3.5 基因序列检测和比较

对PCR 产物进行回收纯化加工,通过上海桑尼生物企业检测基因序列,把得到的序列信息加以GenBank 信息库比较,明确最终的病毒类型。在NCBI 体系内实施BLAST 比较,和GenBank 信息库的鸡传染性贫血病毒同源性表现出100%的结果,明确分离的病毒是鸡传染性贫血病毒。

4 临床诊断和治疗

根据上述诊断结果,患病鸡被诊断为鸡传染性贫血和大肠杆菌混合感染。现阶段缺少高效的治疗计划,仅采取一定的防控手段预防鸡传染性贫血和大肠杆菌混合感染。要求鸡舍保持通风,用百毒杀进行消毒处理,舍内使用喷雾进行消毒,每日一次。患病鸡要集中管理,单独隔离治疗,混合交替使用高敏药物大观霉素及头孢噻呋,逐步使得患病鸡康复,没有出现死亡结果。

5 讨论

由鸡场流行病学临床调查与实验室检验结果发现,鸡场发病主要是鸡传染性贫血病毒与大肠杆菌混合感染所致。因此,应及时对鸡群注射鸡传染性贫血疫苗,并且对存在感染大肠杆菌症状的鸡群用头孢噻呋开展治疗。影响鸡传染病贫血的主要因素是尚未落实全进全出的机制,使鸡场内鸡传染性贫血病毒广泛传播,造成鸡群持续化感染,出现免疫特征。处于免疫特征的鸡群,如果受到其他类型的病毒感染,会表现出易感症状。而大肠杆菌归属条件性致病菌,控制鸡群受大肠杆菌感染的关键点是强化饲养管理,对每个流程进行卫生消毒,排除多种发病因素[6]。在日常饲养中应尽可能选择优质饲料,适当地在饲料中增加霉菌吸附剂,配合一定的维生素与电解质,营造良好的鸡群饲养环境。除此之外,大肠杆菌容易生成耐药特征,所以在临床中应通过药敏试验判断高敏药物。

针对鸡传染性贫血病的预防应做到几点:首先强调自繁自养,因为鸡传染性贫血病存在垂直传播与水平传播的性质,所以要自繁自养,控制接种鸡或接种蛋引进。定期清扫鸡舍,晾干饲养设备,做好鸡舍消毒工作。其次强调鸡群的日常饲养管理,调整饲养密度,确保鸡舍干燥、通风,减少有害气体对鸡舍环境带来的影响,以免因环境因素造成机群生成免疫抑制。最后强调免疫育苗的接种,12~16 周龄的雏鸡采取皮下注射方式完成疫苗接种。关注传染性法氏囊病与马立克病的免疫接种工作,减小鸡群对此病出现的易感性,从根源上防止鸡传染性贫血病的产生。

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