结核性胸膜炎治疗前后血清和胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平变化及对预后的预测价值分析

刘梅娟，周玉霞，郭宏

（1.河南省荣军医院检验科，河南 新乡 453003；2.开封市传染病医院药械科，河南 开封 475001）

结核性胸膜炎是结核分枝杆菌侵入胸膜腔导致胸膜组织炎症、胸膜腔内液体增多的一种病症，其起病方式多为急性或亚急性[1,2]。目前认为，结核分枝杆菌侵犯引起机体免疫反应是胸膜炎发生的主要病理机制，而细胞因子刺激胸膜血管新生、上皮间质转化是病情进展至胸膜肥厚、胸腔黏连的重要过程[3]。抑瘤素-M（OSM）是白细胞介素-6蛋白家族成员，具有促进血管生成、调节成纤维细胞增生的作用[4]。转化生长因子-β1（TGF-β1）是纤维化过程中的关键效应因子,在纤维化疾病中可见表达的明显升高[5]。干扰素-γ（IFN-γ）是一种分泌蛋白，具有广泛的免疫调节作用[6,7]。目前对于治疗前后指标变化及这种变化与预后的关系仍较少有研究报道，为此，本研究分析结核性胸膜炎治疗前后血清或胸腔积液中OSM、TGF-β1、IFN-γ差异，并探讨治疗前及治疗前后差值对预后的预测价值，为临床提供一定参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018年7月-2020年7月本院收治的65例结核性胸膜炎患者纳入病例组。结核性胸膜炎诊断标准：根据下述⑴、⑵、⑶和（或）⑷可确诊，⑴有结核中毒症状，主要表现为低热、乏力、咳嗽、咯痰、盗汗、胸闷、气短、胸痛等；⑵影像学检查提示存在胸腔积液；⑶胸腔积液穿刺后行生化检查，根据Light标准诊断为渗出积液，胸水腺苷酸脱氨酶升高；⑷胸腔镜检查可见胸膜充血、渗出，纤维沉着、黏连，胸膜增厚；活检可见结合增殖样改变。纳入标准：符合结核性胸膜炎诊断标准；对本研究知情并签署同意书。排除标准：合并心、肝、肾重要器官器质性病变；合并其他肺外结核；半年内接受免疫增强或免疫抑制剂治疗者；临床资料不完整患者。对照组为50例与病例组性别、年龄配对的健康体检者，对照组均进行详细体格检查。

1.2 方法 病例组治疗方法：⑴常规抗结核治疗：采用四联抗结核方案治疗，药物主要包括利福平、异烟肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺。⑵辅助治疗：每隔3d抽取胸腔积液，每次抽出胸腔积液后将3mg地塞米松注入胸腔内，直至抽不出积液为止。

样本采集：对照组于查体当日采集外周静脉血，患者于入院后及治疗3、6、9d时采集外周静脉血及胸腔积液，胸腔积液标本为常规胸腔穿刺术抽取后留取的标本，以3000r/min离心10min，取血清及胸腔积液上清备用。

检测方法：采用酶联免疫吸附法测定血清及胸腔积液中OSM、TGF-β1及IFN-γ水平，其中OSM试剂盒购自上海广瑞生物科技有限公司；TGF-β1及IFN-γ试剂盒购自上海双赢生物科技有限公司，实验操作严格按照试剂盒说明书进行。预后收集：观察患者治疗1个月胸水吸收情况及胸膜黏连、肥厚情况，采用胸腔彩超进行观察，以胸水厚度<5mm认为胸水吸收，否则考虑为胸水吸收欠佳；以胸膜厚度>3mm考虑存在胸膜肥厚、黏连，胸水吸收良好且未见明显胸膜肥厚视为预后良好。

1.3 统计学分析 采用SPSS19.0进行数据处理与统计学分析，计数资料以频数及率表示，组间比较行χ2检验或Fisher精确检验，计量资料以均数±标准差（）表示，两组间比较行独立样本t检验，组内多时间点进行重复度量方差检验，绘制ROC曲线评价诊断价值，P<0.05为差异具统计学意义。

2 结果

2.1 病例组及对照组血清及胸腔积液OSM、TGFβ1及IFN-γ水平比较 病例组患者血清OSM、TGF-β1及IFN-γ水平显著高于对照组（P<0.05）。见表1。

表1 病例组及对照组血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平（）

表1 病例组及对照组血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平（）

组别例数OSM（pg/mg）血清TGF-β1（μg/L）IFN-γ（ng/L） OSM（pg/mg）胸腔积液TGF-β1（μg/L）IFN-γ（ng/L）病例组对照组t值P值65 50 28.36±5.86 10.14±2.74 20.328<0.001 38.35±7.88 8.88±3.01 25.055<0.001 37.87±10.12 10.74±2.63 18.466<0.001 48.21±12.41 110.82±22.71 116.19±33.96// /// /// /

2.2 病例组患者治疗前后血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平变化 病例组患者治疗后血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平均显著低于治疗前（P<0.05）。见表2。

表2 病例组患者治疗前后血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平变化（）

表2 病例组患者治疗前后血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平变化（）

组别例数OSM（pg/mg）血清TGF-β1（μg/L）IFN-γ（ng/L） OSM（pg/mg）胸腔积液TGF-β1（μg/L）IFN-γ（ng/L）治疗前治疗3d治疗6d治疗9d 65 65 65 65 28.36±5.86 26.17±6.23 23.72±5.27 15.98±5.96 38.35±7.88 35.87±8.01 30.50±7.12 26.76±5.96 37.87±10.12 35.12±9.52 30.65±8.41 23.64±8.12 48.21±12.41 43.72±9.63 38.17±8.56 31.94±6.93 110.82±22.71 105.97±20.61 94.56±20.74 82.26±18.56 116.19±33.96 110.69±29.63 99.39±20.71 87.30±22.12

2.3 预后良好组及预后不良组患者血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平变化情况 治疗1个月后复查,胸腔积液完全吸收者48例（73.85%），均未见明显胸膜肥厚。经比较，预后良好组患者治疗前及治疗3、6、9d时血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平均显著低于预后欠佳组（P<0.05）。见表3。

表3 预后良好组及预后不良组患者血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平变化（）

表3 预后良好组及预后不良组患者血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ水平变化（）

组别 时间点OSM（pg/mg）血清TGF-β1（μg/L）IFN-γ（ng/L） OSM（pg/mg）胸腔积液TGF-β1（μg/L）IFN-γ（ng/L）预后良好组(n=48)预后欠佳组(n=17)治疗前治疗3d治疗6d治疗9d治疗前治疗3d治疗6d治疗9d 25.16±5.74 23.14±4.98 21.45±5.24 10.27±6.38 37.41±8.52 34.71±9.56 30.12±10.27 32.17±7.41 33.27±10.28 30.71±8.56 25.66±6.93 20.78±5.89 52.71±11.11 50.45±12.78 44.17±9.63 43.63±8.59 33.52±8.41 30.22±10.27 26.93±9.63 18.11±7.48 50.14±10.22 48.96±12.74 41.17±10.22 39.25±9.63 44.17±10.17 38.52±9.63 32.12±8.52 25.44±6.96 59.63±9.63 58.41±10.24 55.27±10.17 50.33±6.39 98.63±22.74 90.12±19.63 78.41±19.55 65.28±15.27 145.24±40.12 150.71±44.17 140.17±33.96 130.27±27.14 103.25±29.63 98.25±29.63 85.14±22.01 70.15±20.18 152.74±41.12 145.82±42.15 139.66±33.96 135.71±40.22

2.4 入院时血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ对预后的预测价值分析 入院时血清OSM、TGF-β1、IFN-γ及 胸 腔 积 液OSM、TGF-β1及IFN-γ预测预后的曲线下面积分别为0.784、0.735、0.634、0.875、0.862、0.797。见图1、表4。2.5治疗后血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ差值对预后的预测价值分析 计算治疗9d后患者血清及胸腔积液各指标的差值(治疗前后差值=治疗前数值-治疗后数值),治疗后血清OSM、TGF-β1、IFN-γ及胸腔积液OSM、TGF-β1、IFN-γ差值预测预后的曲线下面积分别为0.834、0.819、0.665、0.885、0.864、0.830。见图2、表5。

表4 入院时血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ对预后的预测价值分析

表5 治疗后血清OSM、TGF-β1、IFN-γ及胸腔积液OSM、TGF-β1、IFN-γ差值对预后的预测价值分析

图1 入院时血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ对预后的预测价值分析

图2 治疗后血清OSM、TGF-β1、IFN-γ及胸腔积液OSM、TGF-β1、IFN-γ差值对预后的预测价值分析

3 讨论

本研究结果显示与健康成年人比较,结核性胸膜炎患者血清OSM、TGF-β1及IFN-γ均显著升高,证实结核性胸膜炎患者存在这些细胞因子的亢进，这一结果与既往研究结果类似[8,9]。目前认为，结核性胸膜炎本质为淋巴细胞性胸腔积液,其中含有大量细胞因子,这些细胞因子参与胸膜纤维化的形成[10]。OSM可刺激急性期反应蛋白的产生，另外也可促进血管生成、促进成纤维细胞的增殖，推测其可能可通过促进成纤维细胞的增殖过程影响结核性胸膜炎的发展及进展；既往也有研究表明，结核性胸膜炎患者可出现大量OSM的形成,其可在肺部与炎症介质集合，引起基质降解[11]。TGF-β1具有调节细胞增殖分化、刺激胞外基质分泌、抑制机体免疫反应的作用,研究报道在肺部，肺泡巨噬细胞、结核性肉芽肿上皮细胞均可分泌TGF-β1,刺激TGF-β1分泌增加即可构建肺纤维化动物模型，本研究结果进一步证实这一结论[12]。IFN-γ是1型辅助T淋巴细胞亚群特征性细胞因子,可活化细胞毒性T细胞，增加机体清除病菌的能力，本研究中发现结核病患者血清及胸腔积液内可存在IFN-γ表达明显增加,推测结核病存在局部免疫功能的增强，其表达量的升高可明确结核病的发生，与既往研究结果相符[13]。

研究报道部分结核性胸膜炎患者治疗后可出现胸液包裹、胸膜肥厚、黏连等情况，严重者甚至出现胸廓变形或结核性脓胸[14]。本研究结果显示，与治疗前比较,治疗后结核性胸膜炎患者血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ等因子水平均显著降低,提示血清、胸腔积液OSM、TGF-β1及IFNγ等因子的降低可能可一定程度反映治疗效果，这一结果或许可为病情评估及治疗效果评估提供一定参考。

目前临床对于标记物检测时间点及检测样本的比较仍报道较少,本研究结果显示入院时及治疗9d后各指标变化差值预测预后的曲线下面积均大于0.6，有一定预测价值。从获取资料的时间点来看，治疗前后差值变化预测的价值略高，在临床上采用治疗前后差值或可更好的反映治疗效果，分析其原因可能为尽管基线水平可一定程度反映入院时患者严重程度,但不同患者对药物治疗反应性有异质性，基线资料难以反映这一变化；而治疗前后差值可一定程度明确这种变化,可能更能反映治疗效果及预后。从标本获取来源来看，本研究中胸腔积液各指标曲线下面积均显著高于血清指标，提示胸腔积液有更高的预测价值,分析其原因可能为胸腔积液是炎性渗出液体,胸腔积液中细胞因子指标可直接反映病灶严重程度,相比于血清预测价值更高[15]。从指标上来分析，本研究中血清及胸腔积液OSM、TGF-β1预测预后的曲线下面积均显著高于IFN-γ，分析其原因可能为IFN-γ为免疫细胞因子，其受其他因素影响较多有关。

综上，结核性胸膜炎患者治疗后血清及胸腔积液OSM、TGF-β1及IFN-γ等因子水平均显著降低，各指标基线值及治疗前后差值均可一定程度预测患者预后，有一定应用价值。