宫颈病变患者外周血免疫球蛋白及阴道灌洗液中免疫细胞因子水平变化及临床意义

戎凤敏，秦海霞，张景航，张娇

（新乡医学院第一附属医院妇科，河南 新乡 453100）

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤，早期常无症状体征，发展可有阴道流血、排液等症状，其发病率仅仅次于乳腺癌[1]。其在形成之前有很长的宫颈病变阶段，即宫颈炎和上皮内瘤变。因此，对疾病进展的早期诊断和评价是制定宫颈癌防治措施的关键[2]。同时大多数宫颈癌患者HPV检测呈阳性，大多数HPV感染患者具有足够的免疫防御机制对抗病毒，但部分宫颈癌患者存在免疫逃逸现象[3,4]。肿瘤免疫以细胞为主，T细胞在抗肿瘤免疫反应中发挥免疫调节和监测作用。在抗肿瘤免疫反应中，肿瘤患者常出现体液免疫抑制[5]。鉴于其在临床报道较少，因此本研究分析宫颈病变患者外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平变化，以期了解其余宫颈癌发生发展的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2017年03月-2019年03月本院收治的210例宫颈病变患者的临床资料，纳入标准：⑴均经病理学检查确诊；⑵年龄：28～65岁；⑶临床资料完整。排除标准：⑴严重肝肾功能不全及凝血功能异常者;⑵合并自身免疫系统疾病及其他恶性肿瘤者;⑶合并急慢性炎性反应疾病者；⑷合并精神障碍者。同时选取同期于本院进行体检的60例女性作为对照组。观察组：年龄29～65（45.26±7.03）岁。对照组：年龄28～68（46.73±7.11）岁，两组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 外周血免疫球蛋白水平 采集外周静脉血3ml，在室温下静置30～60min，存于EDTA抗凝管中,在1200r/min下离心10min,进行离心沉淀细胞，分离上清液后采用免疫扩散法（仪器及试剂均由上海信然生物技术有限公司提供）测定外周血中IgM、IgG、IgA表达水平。

1.2.2 洗液中免疫细胞因子水平 采用酶联免疫吸附法（奥地利公司提供的型号为Bioelisa ELX-800的酶标仪）检测IL-2、IL-4、IFN-γ水平，操作严格按照说明书进行。

1.3 统计学方法 采用SPSS20.0软件处理数据，计量资料以（）表示，行单因素方差分析及LSD-t检验，各变量间相关性采用Spearman相关分析、以相关系数r表示两资料间的相关性，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 四组外周血IgM、IgG、IgA水平和IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较 宫颈癌组外周血IgM、IgG、IgA水平低于对照组，慢性宫颈炎组和宫颈上皮内瘤变组外周血IgM、IgG、IgA水平高于对照组，慢性宫颈炎组、宫颈上皮内瘤变组和宫颈癌组阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平低于对照组，IL-4高于对照组（P＜0.05）；宫颈癌组外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平低于慢性宫颈炎组和宫颈上皮内瘤变组，IL-4高于慢性宫颈炎组和宫颈上皮内瘤变组（P＜0.05），宫颈上皮内瘤变组外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平低于慢性宫颈炎组，IL-4高于慢性宫颈炎组（P＜0.05）。见表1。

表1 四组外周血IgM、IgG、IgA水平和IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较（）

表1 四组外周血IgM、IgG、IgA水平和IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较（）

组别 IgM（g/L） IgG（g/L） IgA（g/L） IL-2（pg/ml） IL-4（pg/ml） IFN-γ（pg/ml）慢性宫颈炎组（n=60）宫颈上皮内瘤变组（n=72）宫颈癌组（n=78）对照组（n=60）F值P值5.28±2.65 3.05±1.47 0.82±0.33 1.37±0.52 15.248 0.000 20.22±8.35 17.11±6.02 6.81±2.05 12.31±4.18 19.630 0.000 5.95±2.73 3.65±1.51 1.45±0.23 2.39±1.10 146.547 0.000 27.31±8.65 23.65±6.14 12.16±3.08 35.69±7.42 118.050 0.000 2.88±0.30 5.27±1.64 13.15±4.26 1.32±0.20 268.137 0.000 26.41±8.20 20.16±6.13 14.77±2.95 34.62±7.48 65.173 0.000

2.2 HPV高危组和低危组外周血IgM、IgG、IgA水平和IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较HPV高危组外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平低于HPV低危组，IL-4高于HPV低危组（P＜0.05）。见表2。

表2 HPV高危组和低危组外周血IgM、IgG、IgA水平和IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较（）

表2 HPV高危组和低危组外周血IgM、IgG、IgA水平和IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较（）

组别 IgM（g/L） IgG（g/L） IgA（g/L） IL-2（pg/ml） IL-4（pg/ml） IFN-γ（pg/ml）HPV高危组（n=120）HPV低危组（n=90）t值P值0.80±0.35 0.96±0.48 2.794 0.006 7.02±2.14 9.65±3.34 6.936 0.000 1.56±0.30 1.98±0.44 8.218 0.000 13.18±3.22 16.95±5.12 6.529 0.000 12.84±3.60 9.46±2.77 7.411 0.000 15.23±3.40 18.41±5.28 5.296 0.000

2.3 IgM、IgG、IgA水平与IL-2、IL-4、IFN-γ水平的相关性Spearman相关分析显示，外周血IgM、IgG、IgA水平与阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平呈正相关性，与IL-4呈负相关（P＜0.05），见表3和图1～9。

图1 -9为IgM、IgG、IgA水平与IL-2、IL-4、IFN-γ水平的相关性

表3 IgM、IgG、IgA水平与IL-2、IL-4、IFN-γ水平的相关性

3 讨论

近年来，宫颈癌发病率呈上升趋势，且逐渐趋向年轻化，据相关报道显示，我国宫颈癌发病率为99/10万，死亡率为30.5/10万[6]。严重危及人们生命安全。在正常情况下，人体的免疫功能可防止病原微生物的入侵和感染，消除受损细胞。当机体的免疫监测功能失能时，异常转化细胞的处理能力降低，从而导致肿瘤的发生发展[7]。

免疫球蛋白是B淋巴细胞在抗原刺激下增殖分化成浆细胞后合成的与相应抗原特异性结合的抗体，主要分布在体内血清或分泌物中，在体液免疫中发挥重要作用，主要以IgA、IgG、IgM为主[8,9]。本研究结果显示，宫颈癌外周血IgM、IgG、IgA水平低于对照组，慢性宫颈炎组和宫颈上皮内瘤变组外周血IgM、IgG、IgA水平高于对照组，提示宫颈病变患者外周血免疫球蛋白水平异常,分析其原因可能为HPV感染基底细胞导致机体免疫防御屏障的激活，引起炎症反应，导致IgM、IgG、IgA升高。并且随着HPV的持续感染，HPV基因整合到宫颈细胞的染色体中，影响正常细胞，破坏免疫功能，宫颈癌患者的IgM、IgG、IgA降低[10]。肿瘤免疫在抗肿瘤免疫反应中发挥着重要的免疫调节和监测作用。特别是T细胞在人体免疫中发挥重要作用，分泌不同的细胞因子，发挥不同的免疫作用。Th1细胞主要分泌IL-2、IL-12、TNF-α及IFN-γ，增强细胞杀伤细胞毒性，刺激迟发性超敏反应，参与细胞免疫和移植排斥反应。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-6和IL-10，参与体液免疫[11,12]。IL-2是免疫应答和免疫调节的核心因素，可抑制肿瘤细胞增殖，提高细胞杀死抗原并诱导免疫细胞激活IFN-γ，IFNγ是入侵病原体细胞生产糖蛋白,可以诱发宫颈肿瘤细胞凋亡,增强特异性细胞毒性T细胞对肿瘤细胞和识别和开裂。IL-4抑制抗肿瘤免疫应答，促进Th2细胞分化和抗体产生,抑制Th1细胞功能[13]。本研究结果显示，慢性宫颈炎组、宫颈上皮内瘤变组和宫颈癌组阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平低于对照组，与谭超月等[14]报道一致，说明高表达IL-4和低表达IL-2、IFN-γ参与宫颈病变发生发展，IL-4的高表达可导致肿瘤逃避免疫监视，降低抗肿瘤免疫反应，促进宫颈恶性肿瘤的发生。IL-2和IFN-γ低表达可降低T淋巴细胞增殖和分化的调控，导致T淋巴细胞抗肿瘤作用减弱，细胞免疫功能紊乱，从而促进宫颈癌的发展[15]。

本研究进一步分析外周血免疫球蛋白及阴道灌洗液中免疫细胞因子水平在不同病变中的水平，结果显示，宫颈癌组外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平低于慢性宫颈炎组和宫颈上皮内瘤变组，IL-4高于慢性宫颈炎组和宫颈上皮内瘤变组，宫颈上皮内瘤变组外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平低于慢性宫颈炎组，IL-4高于慢性宫颈炎组，提示在宫颈病变过程中机体免疫受损，抗肿瘤能力降低，且随着病变程度的加重，外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平呈低表达，IL-4呈高表达，与曾月等[16]报道一致，提示宫颈局部免疫功能不平衡。由于机体无法有效响应细胞免疫和体液免疫反应，HPV继续被感染，从而促进子宫颈癌的发生发展。同时研究发现，HPV高危组外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平低于HPV低危组，IL-4高于HPV低危组，进一步证实了IgM、IgG、IgA、IL-2、IFN-γ、IL-4水平在HPV局部感染中具有重要作用，由于高危HPV的持续感染,细胞因子介导的抗肿瘤免疫抑制和阴道微环境紊乱促进了宫颈病变的发生，并由宫颈癌前病变发展为宫颈癌[16-18]。本研究创新之处在于：进一步分析外周血IgM、IgG、IgA水平与阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平的相关性，Spearman相关分析显示,外周血IgM、IgG、IgA水平与阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ水平呈正相关性，与IL-4呈负相关，说明外周血IgM、IgG、IgA水平和阴道灌洗液中IL-2、IL-4、IFN-γ水平与病情程度密切相关,有待于扩大样本量进一步分析其机制。

综上所述，宫颈病变患者外周血免疫球蛋白及阴道灌洗液中免疫细胞因子水平表达异常，并与宫颈病变和HPV感染程度程度密切相关，可辅助评估宫颈病变情况。