鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞与EBV-DNA水平的相关性研究

刘家豪，黄伟义，蔡永林，汤敏中，董良哲

（广西壮族自治区梧州市红十字会医院，广西 梧州 543002）

0 引言

鼻咽癌是临床常见恶性肿瘤疾病，患者症状有鼻塞、涕中带血、头痛等[1]，肿瘤会对患者的视觉、听觉神经造成影响，并损害脑神经的健康，还易发生转移，导致患者死亡[2]。鼻咽癌患者治疗期间，受到病痛、化疗毒副反应等的影响，非常容易出现焦虑抑郁的情况。加强鼻咽癌患者的病情诊断和症状分析非常重要，除了常规的影像学检测方法，还可以通过血清检测来对患者病情加以了解，研究发现，检查患者的外周血循环肿瘤细胞、EBV-DNA水平等可以及时观察到患者体内有无肿瘤细胞和EB病毒，一般来说，EBV-DNA荧光定量检测（EBV-DNA）检验值＜400是正常的，如果高则说明病毒复制[3]。EBV-DNA高可能与鼻咽癌有关，对于鼻咽癌的判断具有重要意义。本次研究中，抽取100例鼻咽癌患者作为观察对象，检测分析患者的外周血循环肿瘤细胞和EBV-DNA水平，探究鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞与EBV-DNA水平的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料。本研究中，将广西壮族自治区梧州市红十字会医院在2019年4月至2020年4月收治的100例鼻咽癌患者作为观察对象。基础资料：选取的患者中男52例，女48例，年龄41.50～68.50岁，平均（55.00±33.23）岁。本研究纳入标准：①确诊为鼻咽癌的患者；②患者神志清晰并且自主签署知情同意书；③患者在实验期间配合相关数据调查统计；④患者无其他严重病症或对实验指标产生影响的疾病。排除以下患者：①有智力障碍、身体较差无法进行实验观察的患者；②未签署知情同意书的患者；③中途停止接受观察的患者。

1.2 方法。利用CTCBIOPSY®检测系统，采用ISET技术过滤分离受检者外周血，将分离后的滤膜采用瑞氏吉姆萨染色进行细胞形态学判定及采集图像；再利用CD45免疫细胞化学技术进行排除法检测，并进一步通过原位杂交技术检测EBERs进行验证，确定受检外周血中鼻咽癌CTCs及其数量，同时检测EBV-NDA。统计对比两组观察对象的外周血循环肿瘤细胞和EBV-DNA等的阳性率、临床病理参数特征等。

1.3 统计学处理。产生的各项数据运用SPSS 19.0版本软件实现统计分析工作，运用t检验验证二元比较正态分布资料，应用方差分析功能验证多项比较正态分布资料，如果SPSS 19.0给出P＜0.05的结果，表明各项数据比较具有统计学意义。

2 结果

2.1 鼻咽癌患者基础资料分析。根据对鼻咽癌患者的资料分析得知，不同性别、年龄段患者的外周血循环肿瘤细胞阳性率，差异无统计学意义（P＞0.05），患者病理分期中T1和N1最为常见，详见表1。

表1 鼻咽癌患者基础资料分析

2.2 患者的EBV-DNA水平等检测分析。本组患者中外周血循环肿瘤细胞和CTCs、EBV-DNA水平、临床病理参数特征等，与常规正常值进行比较，差异有统计学意义（P＜0.05），详见表2。

表2 两组观察对象的EBV-DNA水平等比较（±s）

表2 两组观察对象的EBV-DNA水平等比较（±s）

组别 EBV-DNA VCA-IgA CTCs鼻咽癌患者 7.4±0.5 525.3±10.6 28.5±2.3健康正常值 2.1±0.3 311.5±10.3 17.8±1.6 t 6.3856 105.2385 12.4850 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 外周血循环肿瘤细胞水平与患者生存率分析。研究发现，EBV-DNA＜500，CTCs=0，一年生存率是86.0%，500＜EBV-DNA＜10000，生存率为76.7%，EBVDNA＞10000，生存率为60.0%，患者的EBV-DNA，CTCs水平越高，生存率越低，详见表3。

表3 外周血循环肿瘤细胞水平与患者生存率分析

3 讨论

我国是鼻咽癌的高发地区，此病还存在有一定的遗传现象，鼻咽癌主要是受到病毒（EB病毒）、环境（亚硝胺、性激素失调）等的影响[4]，最终在鼻咽部位形成肿瘤。鼻咽癌的危害非常大，许多患者需要接受手术、化疗等治疗，身体往往需要承受较大痛苦，许多患者在治疗期间表现出情绪低落，治疗依从性不高。我国的鼻咽癌患者存在一定的区域聚集性，在两广、湖南、福建等地的发生率非常高[5]。通常情况下，80%左右的鼻咽癌患者，可以经过针对性治疗控制病情，延长患者的寿命。在对患者的病情进行监测的过程中，可以结合观察临床病理参数来分析患者病情，比如外周血循环肿瘤细胞、EBV-DNA水平等[6]。外周血循环肿瘤细胞会以不同的形态存在于人体的外周血中，可以表现为单个游离状态，也可以聚集成团。外周血循环肿瘤细胞可以在人体随着血液进入到淋巴系统，导致患者出现肿瘤细胞转移的情况[7]。而EBV-DNA水平则是针对鼻咽癌患者的一种非常有效的检测方法，主要是检测EB病毒的DNA情况，如果检测检查结果是阳性，说明体内有eb病毒的感染，需要应用抗病毒的药物进行治疗的，EBV-DNA在医学上是非洲淋巴细胞瘤病毒.EBV-DNA水平超过500份/mm时，预后明显最差[8-9]。本次研究中，抽取100例鼻咽癌患者者作为观察对象，检测患者的外周血循环肿瘤细胞和EBV-DNA水平，对比探究鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞与EBV-DNA水平的相关性。根据检测结果分析，鼻咽癌患者中外周血循环肿瘤细胞和EBVDNA等的阳性率、临床病理参数特征等，与普通健康者进行比较，具有显著差异（P＜0.05）。通过评估鼻咽癌患者治疗前的外周血中的循环肿瘤细胞数量及EBVDNA水平，有望为精准识别复发和转移高危患者提高参考指标，从而有利于早期进行个体化治疗，从而降低患者复发率和转移转移率，改善其预后。

综上所述，鼻咽癌患的外周血循环肿瘤细胞与EBVDNA水平具有一定特征性，主要与T、M、N分期等有关，与性别、年龄、病理类型等的关系不大，可以作为临床评判鼻咽癌的重要标准。