基于HPLC测定的苯磺酸氨氯地平片杂质测定研究

王赞朋

（亚宝药业集团股份有限公司，山西 运城044602）

苯磺酸氨氯地平片作为一种治疗心脏疾病的药物，主要能够起到降血压的治疗效果，尤其针对慢性心绞痛具有显著的治疗成效[1]。近年来，苯磺酸氨氯地平片在市场上越来越受到心脏疾病患者的认可。考虑到苯磺酸氨氯地平片在制作过程中会存在一些杂质，为保证苯磺酸氨氯地平片的药品质量，必须对其进行精准测定并降解，进一步提高苯磺酸氨氯地平片药品纯度。基于此，苯磺酸氨氯地平片杂质测定方法应势而生[2,3]。在我国，以往针对苯磺酸氨氯地平片杂质测定方面的相关研究中，主要采用近红外光谱模型，测定苯磺酸氨氯地平片杂质，但传统测定方法由于对苯磺酸氨氯地平片杂质色谱的分析精度低，导致测定结果与实际相比存在较大残差。由此可见，传统测定方法存在显著不足有待解决，HPLC测定又称高效液相色谱测定，主要应用原理为通过分析色谱的高效液相，将物质中的成分分离，有针对性的加以检测，进而保证其测定精度。因此，有理由将HPLC测定应用在苯磺酸氨氯地平片杂质测定中，本文基于HPLC测定设计苯磺酸氨氯地平片杂质测定方法，致力于最大限度上提高苯磺酸氨氯地平片杂质测定的高效液相色谱分析精度，进而降低其测定残差。

1 HPLC测定

HPLC测定在本质上属于色谱法的其中一种，主要针对液体，以流动相的方式，分离液体中的各成分，进而对不同成分进行有针对性的测定[4]。HPLC测定以其独特的优势受到了市场多方行业的重点关注，结合以往研究表明，该项测定技术具有极高的适用性，能够适用于70%以上的有机化合物中。区别于传统的测定技术，HPLC测定技术因为具有灵敏度较高的特点，在液态色谱检测技术中占有重要地位，是药品杂质测定的理想手段之一。HPLC测定技术对于常规的亲水性分子检测的识别程度高，并且检测周期短，在确保测定精度的同时，最大限度上提高杂质测定效率，以此HPLC测定在市场中的应用较为广泛，常被人们美誉为高精度、高效率检测技术。本文基于HPLC测定设计的苯磺酸氨氯地平片杂质测定方法。

2 基于HPLC测定的苯磺酸氨氯地平片杂质测定方法

2.1 基于HPLC检测苯磺酸氨氯地平片杂质酸碱性

在苯磺酸氨氯地平片杂质测定过程中，本文基于HPLC检测苯磺酸氨氯地平片杂质酸碱性。

首先，将苯磺酸氨氯地平片制成粉状，加入流动相，使其能够满足HPLC测定需求；然后，选用一台高效液相色谱仪，将上述制成溶液倒入高效液相色谱仪，为了更好分析高效液相色谱，根据分离的阴阳离子，检测苯磺酸氨氯地平片中所含杂质的酸碱性方法。第一步，用纯净的蒸馏水将苯磺酸氨氯地平片试剂样本稀释至5%浓度，使用医用pH值检测试纸，检测酸碱度，作为初期值。同时记录稀释溶液中金属元素杂质的酸碱度[5]。第二步，选取丁甲酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸等水质常见酸，控制酸基中空基，建立新的离子团，使用样本填充离子团空隙，使其与带酸离子融合，形成强阳性酸基，增强分离基的选择性，起基与碱性离子上的结合，形成组合氢键，生成气相色谱。划分试剂中多种亲水性有机酸的定期分析条件，找到与检测酸性匹配的碱性离子，进而确定试剂中酸性离子的游离形式，判断是否为腐蚀性酸性物质，多次检测水质获取结果平均值，将所得平均值与可溶水酸对比，直至得到与之匹配的结果，得出试剂中含金属元素的酸碱性。

2.2 划分苯磺酸氨氯地平片杂质高效液相色谱条件

在得出苯磺酸氨氯地平片杂质酸碱性检测结果的基础上，基于HPLC检测划分苯磺酸氨氯地平片杂质高效液相色谱条件[6]。通过分离试剂样本中小分子竣酸，利用苯磺酸氨氯地平片中含杂质离子的排斥特性，改变试剂中常见的无机离子等价特性，包括：F-、cl-、OH-2、PS-4等，浓缩试剂溶液，并过滤掉多余的等价元素，避免影响高效液相色谱分析结果，判定阴离子在试剂中的最高浓度。使用相等浓度的淋洗装置对样本加热7min，按照元素梯度分离法，抑制阳离子与阴离子的交换。基于乳酸可取代阴阳离子中的空基原理，选择高效液相色谱代替传统检测中使用的其它化学物质，分离有机酸与无机酸，简化传统的检测过程。使用低浓度盐酸与DAP作为样本清洗液，分离试剂中的杂质。疏水性离子与盐酸反应，通过等浓度淋洗样本，选择一次进样分析方法，引入阳离子分离柱，被析出的阴离子以团状物形态依附在分离柱之上，其离子价呈现由高至低排列顺序，待静置12～15min后即可实现分离水质中的阴、阳离子的目的。

2.3 完成苯磺酸氨氯地平片杂质测定

在划分苯磺酸氨氯地平片杂质高效液相色谱条件的步骤中，虽然苯磺酸氨氯地平片中大部分杂质阳离子已经处于完全分离的状态下，但是仍有极少部分的阳离子滞留于试剂中，会引发检测误差，影响分析结果的准确性。为进一步降低检测误差，基于HPLC测定避免试剂中阳离子相互作用，采用酸性较弱的淋洗液深度清洗试液，保证试剂中所有杂质阳离子均处于完全分离状态的条件下，分析试剂中所有杂质阳离子；最后，运用高效液相色谱柱确定高效液相色谱条件。以此，实现基于HPLC测定的苯磺酸氨氯地平片杂质测定。

3 实验测定及分析

3.1 实验准备

设计实验分析，本次实验选取一粒苯磺酸氨氯地平片作为实验样品，通过化学成分分析可知，苯磺酸氨氯地平片中含有杂质A，针对苯磺酸氨氯地平片进行杂质测定的试验研究。实验目的为证明HPLC测定方法在苯磺酸氨氯地平片杂质测定中的准确性。实验所使用的检测环境与测试仪器清单详见表1。

表1 设计试验仪器工作条件

结合表1所示：本次实验测定苯磺酸氨氯地平片杂质含量时，设定X光管电压为80kV、电流为80mA，晶体选用LiF150，准直器为200μm。首先使用本文基于HPLC测定设计方法，测定苯磺酸氨氯地平片杂质含量，通过黑盒工具-QAcenter测得测定残差，记为实验组；再使用传统方法，测定苯磺酸氨氯地平片杂质含量，同样通过黑盒工具-QAcenter测得测定残差，记为对照组。实验主要内容为测试两种方法的测定残差，测定残差越低证明测定精度越高。使用QAcenter软件测定残差数据。实验在同等条件下进行8次，以消除误差的影响。

3.2 实验结果分析与结论

在同样环境下反复进行8次实验，记录每一次实验数据（见表2）。

表2 测定残差实验结果记录表

分析表2数据，发现设计的基于HPLC测定方法检测所的残差值明显低于传统方法的对照组，准确度更高，更适合于用于苯磺酸氨氯地平片杂质测定。

4 结束语

HPLC测定方法通过理化结合的方式，通过离子特定光谱检查苯磺酸氨氯地平片药剂中杂质含量，方法更为简便，测定更为快捷，可以更为高效的完成药剂杂质测定工作。通过实验对比测试的方式，也证明了这一点。研究工作也存在不足之处，还需要在测定的准确性方面深入探讨，优化试剂配比，固化检验步骤，真正将HPLC测定方法应用于实际之中。