急性热应激对肉鸡抗氧化指标的影响

许师源，张峻玮，张宏玲

（吉林农业科技学院 动物科技学院 132101）

热应激是家禽生产养殖中经常面临的问题之一，给禽业生产带来巨大的经济损失。当热应激发生时，如果不能及时采取积极有效的防治措施，持续的热应激会引起机体出现中暑，会对机体造成广泛损伤作用,危及体内各个系统,导致器官组织在功能和形态结构上发生改变,甚至造成动物死亡。本研究以肉鸡为试验动物，建立急性热应激模型，通过临床观察、抗氧化指标检测等技术，探讨热应激条件下肉鸡肝脏损伤的相关指标的变化。为探讨热应激条件下肉鸡肝损伤的发病机理提供理论依据，对预防和抵抗热应激有重要的实践指导意义。

1 材料与方法

1.1 试验动物及分组

将60只10日龄的肉鸡，随机分为对照组、热应激组、VC组，每组20只。各组动物常规饲养，自由采食饮水。所有鸡饲喂全价饲料，其中，VC组饮用水中预混入VC溶剂（按250mg/kg标准）。每日光照时间维持10h左右，温度维持在25℃左右，严格按照肉鸡饲养标准饲养。待鸡经过一周的环境适应后，除对照组外，热应激组和VC组鸡分别进行热应激处理（温度为38±1℃，湿度为55%～65%）。

1.2 样品采集与处理

待高温应激分别持续2h、5h和10h时，对照组、热应激组和VC组各选取5只鸡,进行心脏无菌采血，分离血清备用。

1.3 检测项目与方法

（1）NO含量测定——硝酸比色法；（2）GSH-Px活力测定——DTNB显色法。

1.4 数据分析

所有数据采用 SPSS软件对本次试验数据进行分析。

2 试验结果

2.1 热应激对肉鸡血清中NO含量影响

数据结果表明，热应激2h阶段，热应激组雏鸡血清中NO含量升高，VC组NO含量降低，热应激组与对照组相比，组间差异极显著（p＜0.01），VC组与对照组相比，组间差异不显著（p＞0.05）；5h阶段，热应激组和VC组NO含量有升高。

趋势；各组与对照组相比，组间差异极显著(p＜0.01)；10h阶段，VC组NO含量比5h阶段降低,但仍然高于对照组，与对照组相比差异极显著(p＜0.01)，热应激组NO含量继续升高，与对照组相比差异极显著，VC组与对照组比较差异显著。

表1 热应激肉鸡血清中NO含量的变化（U/mL，n=8）

2.2 热应激对肉鸡血清中GSH-Px活性影响

由表2可以看出，热应激2h阶段，热应激组和VC组肉鸡血清中GSH-Px活性略有下降趋势；与对照组相比，差异极显著（p＜0.01）。VC组与对照组相比，组间差异显著（p＜0.05）；5h阶段，热应激组和VC组GSH-Px活性继续降低；各组与对照组相比，组间差异极显著(p＜0.01)；10h阶段，VC组GSH-Px活性比5h阶段升高,但仍高于对照组，与对照组相比差异极显著(p＜0.01)，热应激组GSH-Px活性继续升高，与对照组相比差异极显著，VC组与对照组相比差异不显著(p＞0.05)。

表2 热应激对肉鸡血清中GSH-Px活性的变化（U/mL，n=8）

3 讨论

本研究发现，热应激组和VC组肉鸡血清中NO含量明显增高，同时GSH-Px活性下降。已有研究表明，热应激显著抑制机体氧自由基代谢，是造成该环境下机体免疫力下降的原因之一，氧自由基的产生在热应激性的病理过程中起重要作用[1]。在正常情况下，生物体内氧自由基产生、利用和清除保持着动态平衡，自由基清除主要依靠体内NO、SOD、GSH-Px等酶类物质[2]。当机体受应激刺激时，会诱导NO的产生，NO与体内超氧阴离子（0-2）等活性氧反应介导细胞毒作用，造成生物膜结构和功能损伤。谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）是机体内一种重要的过氧化物分解酶，能清除细胞内有害的过氧化代谢产物，阻止脂质过氧化连锁反应，从而对细胞膜结构和功能起到保护的作用[3]。过量的O-2，H2O2能使还原型谷胱甘肽氧化成氧化型谷胱甘肽，进而抑制GSH-Px酶的活性，引起动物免疫力下降，诱发各种疫病[4]。杨凤微等（2009年）研究证实，冷应激能引起雏鸡血清NO含量升高、GSH-PX活性降低，使机体抗氧化系统遭到破坏[5]。Gumuslu等学者在对小鼠慢性冷应激研究过程中，发现冷应激可使小鼠红细胞CuZn-SOD活性下降，GSH-Px活性升高[6]。

在热应激条件下，VC有利于维持细胞膜的完整性，能增强白细胞吞噬功能和网状内皮系统功能，另外VC能减轻热应激造成的氧化应激损伤，提高超氧化物酶和谷胱甘肽的活性。孙延鸣等发现，预先添加VC能显著改善热应激产蛋鸡血清ALT、LDH、TP等生化指标[6]。然而 Nockels却发现，高温条件下在肉鸡的日粮中添加200mg/kg VC并不能改善各项指标和减少死亡率。本试验结果中，热应激组肉鸡随着热应激时间的持续，NO含量升高，GSH-Px活性降低，总体趋势与所报道的研究结果基本一致，表明热应激时，肉鸡体内氧化-抗氧化平衡被破坏，导致氧自由基生成增多，对机体造成一定程度上损害。VC组在热应激初期NO含量降低,中期升高,末期又下降，NO总体水平比未添加组要低，说明VC在缓解热应激损伤方面起到了一定的作用。