高效液相色谱法测定复方氨酚烷胺胶囊中对乙酰氨基酚的溶出度

郭倩倩 荆 辉 河南省三门峡市食品药品检验检测中心 472000

复方氨酚烷胺胶囊，是常用的感冒类用药。常用于缓解感冒所引起的发热、头痛等症状，对预防感冒也有一定效果[1-3]。其执行标准为《卫生部药品标准》，在该标准中，未规定溶出度的检查。而溶出度的高低对于固体制剂在人体内起作用大小非常关键，也可以从侧面考察该药的制备工艺等参数[4-6]。为了进一步了解复方氨酚烷胺胶囊在人体中的溶出情况。我们选用高效液相色谱法来测定对乙酰氨基酚的溶出量。现报道如下。

1 仪器与试剂

1.1 仪器 Waters e2695高效液相色谱仪系统(Empower 2操作系统)，Waters 2998二极管阵列检测器，天津市天大天发科技有限公司ZRS-8G型智能溶出仪，上海科导超声仪器有限公司SK2510HP超声波清洗器，德国赛多利斯BSA224S电子分析天平。所用仪器均在检定周期内。

1.2 试剂 色谱纯醋酸(南京化学试剂股份有限公司)，色谱纯甲醇(天津市四友精细化学品有限公司)，水为超纯水，分析纯盐酸(郑州龙达化工产品有限公司)。对乙酰氨基酚对照品(中国食品药品检定研究院，批号：100018-201610)；复方氨酚烷胺胶囊(四川依科制药有限公司，批号：190102、181105、180704)。

2 方法

2.1 溶出条件设置 根据《中国药典》(2015年版)通则0931[7]的相关要求，该复方制剂溶出采用第一法转篮法。每个转篮内放1粒样品，转速设定为100r/min，取样时间设定为45min。溶出溶液为0.1mol/L的盐酸。

2.2 高效液相色谱条件设置 高效液相色谱柱使用Agela C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)，流动相为甲醇∶1%醋酸水溶液(15∶85),柱温箱设定温度为(30±2)℃，检测波长设置为254nm，流动相流速设置为1.0ml/min。

2.3 供试品溶液制备 取0.1mol/L的盐酸6份,每份900ml，分别加入6个溶出杯中，将加入溶出液的溶出杯超声20min以排除气泡。超声完毕后，放入溶出仪，待溶液温度稳定在37℃时，放下转篮，以100r/min开始转动，计时开始，在特定的时间取样10ml，过滤，取续滤液3ml加入10ml棕色容量瓶中，用0.22μm的滤膜过滤后进行色谱分析。

2.4 对照品溶液制备 精密称取对乙酰氨基酚对照品20.12mg，置于100ml的棕色容量瓶中，加适量流动相超声使溶解，用流动相稀释至刻度,作为对照品储备液。精密吸取对照品储备液5ml，加入10ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为对照品溶液。

2.5 进样及计算 精密吸取对照品、供试品溶液各10μl按照上述条件进行色谱分析，根据对乙酰氨基酚的色谱峰面积，对其含量进行计算。

3 试验结果

3.1 线性关系试验 精密吸取对照品储备液6份，每份1ml，分别置于100ml、50ml、25ml、20ml、10ml、5ml棕色的容量瓶中，加流动相稀释至刻度。摇匀后，按照“2.2”和“2.5”中规定的方法进行试验。峰面积作为纵坐标(Y)，浓度作为横坐标(X)，进行线性回归分析。可得回归方程为：Y=30 675X+568.45(r=0.999 7)；提示在2.07～207.66μg/ml的范围内，对乙酰氨基酚线性关系良好。

3.2 精密度试验 精密吸取对照品溶液，按照“2.2”和“2.5”中规定的方法进行试验，连续进样6次，根据峰面积计算其RSD为0.9%。对乙酰氨基酚对照品的色谱图见图1。

图1 对乙酰氨基酚对照品色谱图

3.3 回收率试验 取已知对乙酰氨基酚含量的复方氨酚烷胺胶囊内容物适量(约相当于对乙酰氨基酚10mg)10份,每份10mg，分别置于100ml棕色容量瓶中，分别精密称取对照品适量分别加入容量瓶中，用流动相溶解并定容至相应刻度，摇匀后滤过，按照“2.2”和“2.5”中规定的方法进行试验，见表1。

表1 回收率试验结果

3.4 溶出度试验 按照“2.1”中设置的溶出度方法，分别取3批样品各6粒，加入溶出仪进行试验，在15min取样检测；同法，另取样品进行试验，分别在30min、45min、60min取样进行检测。另取对照品28.03mg，加入100ml棕色容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度。按照“2.2”和“2.5”中规定的方法进行试验。计算各样品相对于标示量的平均溶出度。结果表明，在45min时，溶出率基本可以达到100%。见表2。

表2 溶出度试验结果

4 讨论

4.1 取样时间的选择 《中国药典》(2015年版)规定，硬胶囊剂的崩解时限为30min，在30min时取样发现溶出率在75%左右，这说明在30min的时候，对乙酰氨基酚还没有完全释放到溶液中。这可能和药物的制备方法、工艺等有关。在45min时取样检测发现溶出率基本在100%左右，因此，笔者将取样的时间定到45min。

4.2 溶出介质的选择 对乙酰氨基酚呈酸性且在水溶液中不易溶，因此，不能选择水作为溶出介质。0.1mol/L的盐酸溶液接近人胃液的溶度，在此种溶液中进行溶出度试验，更符合人吃药后药物转化的实际情况，并且对乙酰氨基酚在此种酸性溶液不易解离，利于应用高效液相色谱法进行测定。

4.3 溶出转速的选择 根据《中国药典》(2015年版)中的实例，转速一般为50r/min、75r/min和100r/min，本试验按照这三个转速均进行了试验，试验结果发现采用50r/min、75r/min时，完全溶出所需要的时间较长。为了节约时间，更快速、准确地得到试验结果，本试验采用100r/min进行试验。本试验采用环境友好的试剂进行试验。能快速、准确地测定复方氨酚烷胺胶囊中对乙酰氨基酚的溶出度。测定结果准确可靠。利用溶出度试验，更准确地模拟了药品在体内的溶出状况，为安全用药提供了科学依据,建议在标准中加入对其溶出度的检查。