小尾寒羊口蹄疫-小反刍兽疫联合免疫效果评价

2021-07-02王雅雯努尔麦麦提麦麦提敏李仕林姜水兵郭良帅王新新焦海宏

现代畜牧兽医 2021年6期

王雅雯，努尔麦麦提·麦麦提敏，李仕林，姜水兵，郭良帅，王新新，焦海宏

（塔里木大学动物科学学院，新疆阿拉尔843300）

口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒引起的急性、热性、高接触性动物传染病，主要侵害牛、绵羊、山羊、猪等偶蹄动物[1]。口蹄疫对畜牧养殖业造成巨大的威胁，曾在多个国家流行[2]。口蹄疫共有7 种血清型，我国常见的有A 型、O型、亚洲Ⅰ型[3-4]。口蹄疫临床上表现为口腔黏膜、蹄部、乳房、乳头、鼻端、鼻孔出现水疱和溃疡，食欲下降，出现跛行，严重时可出现蹄壳脱落[5]。

小反刍兽疫（PPR）是由小反刍兽疫病毒（PPRV）引起的一种快速急性、高热性、高度接触性的动物传染病。该病的感染率高达100%，致死率高达90%[6]。PPRV 易感山羊，其次是绵羊。幼龄羊感染后临床症状更明显，死亡率较高[7-8]。小反刍兽疫发病初期，病羊鼻腔中带有清澈的鼻液，随着病情的加重转变为脓性卡他性鼻液、呼吸困难、患病羊口腔中呼出恶臭气体、眼部分泌物增多、出现结膜炎[9]；发病后期，病羊出现较为严重的腹泻、个别病羊排出血水、身体迅速消瘦并脱水、怀孕母羊出现流产[10]。

口蹄疫和小反刍兽疫是OIE法定报告动物疫病[11]，也是全球计划根除的动物疫病，我国将其列为一类疫病[12]，且被列为强制免疫病种[13]。目前，羊场需要强制免疫的疫苗有口蹄疫和小反刍兽疫，因病设防的疫苗有羊三联四防[14]、山羊支原体肺炎、羊痘、羊口疮、布鲁氏杆菌病。如果单独接种疫苗，每种疫苗间隔7 d免疫注射，免疫工作跨度时间长，增加基层防疫工作人员的工作量和工作强度。为简化免疫过程，实际工作中进行一些不同疫苗联合免疫的探索[15-16]。近几年，新疆也鼓励开展羊疫苗的联合免疫。本试验对小尾寒羊进行口蹄疫（A、O 型）和小反刍兽疫联合免疫，检测免疫抗体，进一步验证口蹄疫灭活苗和小反刍兽疫活疫苗联合免疫的可行性。

1 材料与方法

1.1 疫苗

口蹄疫（O型、A型二价）灭活疫苗（批号：2015017），保存于4 ℃，；小反刍兽疫活疫苗（Clone9 株，批号：2016025），保存于-20 ℃，均由新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产。

1.2 试剂

口蹄疫病毒A型抗体检测试剂盒（批号：92031）、口蹄疫病毒O型抗体检测试剂盒（批号：92051）、小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒（批号：93021）保存于4 ℃，均由北京纳百生物科技有限公司生产。

1.3 试验设计

试验选用由乌什某规模化羊场提供的未在疫苗保护期内的健康小尾寒羊共60只。其中，成年母羊、青年羊、断奶羊各20 只。试验羊临床症状检查健康，无临床疾病表现。按年龄分成3组，进行口蹄疫疫苗和小反兽疫疫苗的联合免疫试验。口蹄疫（O 型、A 型二价）灭活疫苗和小反刍兽疫活疫苗在颈部两侧同时分点注射，免疫剂量为0.5 mL/头。免疫7 d内观察试验羊的精神、食欲、体温及有无运动障碍、有无局部或全身反应或死亡等情况。免疫28 d后，进行采血，分离血清，检测抗体水平。

1.4 血清抗体水平检测

口蹄疫A型使用口蹄疫A型抗体检测试剂盒检测，具体操作按试剂盒说明书进行，判定标准：阴性对照的平均OD 值减去阳性对照的平均OD 值≥0.3，试验结果才有效。阻断率[IN%]≥30判定阳性，阻断率[IN%]<30判定为阴性。

口蹄疫O型使用口蹄疫O型抗体检测试剂盒检测，具体操作按试剂盒说明书进行。判定标准：阴性对照的平均OD 值减去阳性对照的平均OD 值≥0.3，试验结果才有效。阻断率[IN%]≥30判定阳性，阻断率[IN%]<30判定为阴性。

小反刍兽疫使用小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒，具体操作按试剂盒说明书进行。判定标准：阳性对照的平均OD 值≥1.0，且阴性对照的平均OD 值小于0.3。试验结果有效，S/P≥0.13判定为阳性；S/P<0.13，判定为阴性。

2 结果与分析

2.1 试验羊临床表现

联合免疫后，3组试验羊均未出现精神萎靡、采食量下降体温升高等临床症状。观察7 d，试验羊采食正常、精神状态正常，未出现死亡情况。

2.2 免疫羊抗体水平检测结果（见表1~表3）

由表1、表2 可知，免疫母羊、青年羊和断奶羔羊采集血清各20份，在联合免疫28 d内未发现任何局部或全身不良反应，且口蹄疫A型抗体阳性率结果均为95%，口蹄疫O型抗体阳性率结果为85~95%。检测结果均达到农业农村部规定的标准。

表1 口蹄疫A型抗体检测结果Tabl.1 Test results of foot-and-mouth disease type A antibody

表2 口蹄疫O型抗体检测结果Tab,2 Test results of foot-and-mouth disease type O antibody

由表3 可知，成年母羊、青年羊和断奶羊采集血清各20 份，在联合免疫28 d 内未发现明显的临床症状，小反刍兽疫的阳性率结果为75%~80%。检测结果均达到农业农村部的标准。

表3 小反刍兽疫抗体检测结果Tab.3 Test results of Peste des petits ruminants antibody

3 讨论

本试验结果显示，口蹄疫A 型3 个年龄段试验羊抗体检测结果分别为95%、95%、90%；口蹄疫O 型3 个年龄段试验羊抗体检测结果分别为85%、95%、85%；小反刍兽疫3 个年龄段抗体检测结果分别为80%、80%、75%。试验羊免疫抗体均达到农业农村部规定的标准（70%）。其中，断奶羊的小反刍合格率为75%。断奶羊的平均年龄段在3~4个月之间，体内存有部分母源抗体，母源抗体对疫苗免疫效果有干扰作用[17]。同场抽检单独注射口蹄疫和小反刍兽疫疫苗的抗体合格率分别为80%、85%。同场抽检结果达到农业农村部规定的最低标准。

许伟等[18]进行口蹄疫、小反刍兽疫、山羊支原体肺炎、羊痘4种疫苗2种或3种进行不同组同时分点注射进行免疫效果检测，口蹄疫和小反刍兽疫分点注射，未出现试验羊死亡和过敏现象，口蹄疫A 型免疫抗体检测结果为80%，口蹄疫O型免疫抗体检测结果为96.7%，小反刍兽疫免疫抗体检测结果为100%。冯春红等[19]进行山羊口蹄疫O 型和小反刍兽疫2 种疫苗分点注射的免疫效果，结果显示，口蹄疫O 型免疫抗体合格率为85%，小反刍兽疫免疫合格率为90%。两组试验数据均达到农业农村部规定的标准，与本试验结果相近。上述结果说明，口蹄疫疫苗和小反刍兽疫疫苗可以同时分点对羊只进行免疫，且具有良好的促进作用和较好的安全性，分点注射2种不同疫苗对动物进行免疫接种的方法可以应用于生产实践[20]。