血清SFRP4、SFRP5与妊娠期糖尿病的相关性研究

汤路路 韩秋峪 孟 琳 黄 杨 孙礼强

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus，GDM)是指妊娠期间首次发生或发现的糖代谢异常，是围生期常见的并发症之一。GDM对孕妇、胎儿及新生儿均会造成不良影响，其主要危害包括子痫前期、流产、早产、畸形、巨大儿、胎儿生长发育受限、新生儿低血糖、新生儿呼吸窘迫综合征及产后发展为2型糖尿病风险增加等[1]。妊娠期糖代谢的特点是葡萄糖需求量增加，胰岛素抵抗及胰岛素相对分泌不足。其发病机制与2型糖尿病相似，但具体机制并不明确[2]。

Wnt信号通路是重要的细胞信号转导网络，该通路的功能最常见于胚胎发育和癌症，在细胞的生长、分化、代谢、凋亡中起重要作用，亦介入了人类正常生理过程[3]。SFRP4、SFRP5是新型的脂肪因子，负调控Wnt信号通路，与肥胖、糖脂代谢、胰岛素抵抗等密切相关。目前，SFRP4、SFRP5在2型糖尿病中的相关研究较多，与GDM相关的研究较少。本研究通过观察孕产妇血清中SFRP4、SFRP5的表达，分析其与妊娠期糖尿病的相关性。

资料与方法

1.一般资料:选取2019年10月～2020年6月于笔者医院住院分娩的妊娠期糖尿病孕妇40例为GDM组，孕妇年龄20～36岁,平均年龄为27.8±4.1岁，孕周36～40周,平均孕周为38.0±1.1周。同期住院分娩的正常妊娠孕妇40例为对照组，孕妇年龄20～34岁，平均年龄为27.6±4.0岁，孕周37～41周，平均孕周为38.3±1.1周。诊断标椎参照第9版《妇产科学》[4]。妊娠24～28周及28周后行75g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)：空腹和服糖后1h、2h血糖值分别为5.1mmol/L、10.0mmol/L、8.5mmol/L。任何一点血糖值达到或超过上述标准即诊断为GDM。排除标准：①孕前有糖尿病及糖尿病家族史；②不良孕产史；③合并高血压，肝、肾功能不全、多囊卵巢综合征、内分泌疾病等；④不能配合本次研究样品采集者。两组孕妇年龄、孕周等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究通过笔者医院医学伦理学委员会批准实施，研究对象知情且同意。

2.研究方法：采集所有受试者入院第2天(分娩前)清晨空腹肘静脉10ml血液，应用AU680型全自动生化分析仪(贝克曼库尔特公司生产)测定受试者的空腹血糖(FBG),餐后2h血糖(2hPBG)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹胰岛素(FINS)、C反应蛋白(CRP)等指标；另抽取5ml静脉血于温室下静置2h后1000g离心15min，分离血清标记后储存在-80℃冰箱中，采用酶联免疫吸附实验方法(ELISA)测定血清SFRP4、SFRP5及白细胞介素-1β(IL-1β)水平，试剂盒为Bioswamp产品，操作步骤严格按照试剂盒说明书；稳态模型法评估胰岛素抵抗指数(insulin resistance index，HOMA-IR)=FBG×FINS/22.5。

结 果

1.GDM组与对照组间各指标的比较:GDM组的孕前BMI、FBG、2hPBG、FINS、HOMA-IR、TG、CRP、IL-1β、SFRP4水平均明显高于对照组，HDL-C、SFRP5水平均明显低于对照组(P<0.05)，详见表1。

表1 GDM组与对照组间各指标的比较

2.孕妇血清SFRP4、SFRP5与各指标相关性：血清SFRP4水平与孕前BMI、FBG、2hPBG、FINS、HOMA-IR、TG、CRP、IL-1β呈正相关(P<0.05)，与HDL-C呈负相关(P<0.05)，详见表2。SFRP5水平与孕前BMI、FBG、2hPBG、FINS、HOMA-IR、TG、CRP、IL-1β呈负相关(P<0.05)，与HDL-C呈正相关(P<0.05)，详见表2。

表2 血清SFRP4、SFRP5与各指标相关性分析

3.影响妊娠期糖尿病的单因素分析：采用χ2检验对影响产妇妊娠期糖尿病的相关实验指标进行单因素分析，BMI、SFRP4、SFRP5、HDL-C、IL-1β、CRP等指标比较，差异有统计学意义(P<0.05),详见表3。

表3 影响妊娠期糖尿病的单因素分析

4.血清SFRP4、SFRP5水平对GDM影响分析：以GDM为因变量(无=0，有=1)，以单因素分析有意义的指标为自变量进行二元Logistic回归分析，结果显示孕前BMI、SFRP4、SFRP5为GDM的独立影响因素，详见表4。

表4 影响GDM的多因素Logistic回归分析结果

讨 论

妊娠期糖尿病是妊娠期最常见的代谢紊乱。妊娠期糖尿病对孕产妇及胎儿的影响可分为短期和长期，短期影响包括新生儿低血糖、孕妇羊水过多、产后出血、巨大儿及难产等出现率大幅度升高；长期影响包括GDM患者确诊后10年内2型糖尿病的发生率超过50%，子代易出现青春期肥胖、糖耐量受损等，对产妇及子代的健康造成了严重威胁[5]。GDM的病因及发病机制并不十分明确，目前认为GDM是遗传因素、胰岛素抵抗、炎性因子、脂肪细胞因子等多种因素共同作用的结果[6]。

胰岛素抵抗是妊娠期糖尿病的病理生理基础之一，妊娠期体内释放大量雌孕激素、胎盘胰岛素酶等拮抗胰岛素，机体对胰岛素的敏感度下降，为维持正常糖代谢水平，胰岛素的需求量相应增加，若这一过程失去平衡，就会出现糖耐量异常，导致GDM[7]。本研究中GDM组与对照组患者HOMA-IR平均值均>1，这也说明了妊娠期会出现生理性胰岛素抵抗，而GDM组患者HOMA-IR水平明显高于对照组，证实了GDM患者会出现更为显著的胰岛素抵抗。GDM组患者的FBG、2hPBG、TG水平均明显高于对照组，HDL-C水平低于对照组的正常妊娠产妇，说明GDM患者确实存在糖代谢脂代谢紊乱的情况。

SFRP4是脂肪因子SFRPs成员之一，其可与炎性因子发生作用影响胰岛β细胞功能，通过Wnt信号通路抑制第一时相胰岛素的分泌，导致胰岛组织出现慢性炎症损害及胰岛β细胞功能紊乱[8]。Nunez Lopez等[9]研究表明SFRP4在调节全身胰岛素敏感度或抵抗中发挥作用，可能通过抑制血管形成和促进组织炎症在肥胖和2型糖尿病的病理生理过程中发挥重要作用。Mahdi等[10]和Bergmann等[11]研究表明，SFRP4的高表达与炎症和胰岛素分泌减少有关，可以在2型糖尿病发病前5年预测其发展，因此它可看作为2型糖尿病胰岛功能障碍的生物学标志物。Baldane等[12]研究结果显示，SFRP4可能被用作妊娠期糖尿病女性发生糖耐量异常的危险因素的潜在指标。

本研究中GDM组患者FBG、FINS、HOMA-IR均高于对照组，提示GDM患者血糖水平及胰岛素抵抗程度较正常妊娠产妇升高。GDM患者血清SFRP4水平也明显高于对照组，且与FBG、HOMA-IR、IL-1β等指标呈正相关，表明SFRP4水平越高，代谢紊乱、炎性反应及胰岛素抵抗程度越严重，GDM严重程度越高。回归分析结果显示SFRP4为GDM的独立影响因素，SFRP4表达水平升高是GDM的危险因素，这更能表明SFRP4在GDM的发生、发展过程中有重要作用。

SFRP5是一种新型抗炎脂肪因子，其通过与脂肪组织表达的Wnt5a结合，抑制Wnt非典型通路的下游靶点JNK的活化实现抗炎、改善胰岛素抵抗的作用[13]。Ouchi等[14]的动物实验中，在遗传性或饮食肥胖的动物中，SFRP5的表达下降，在肥胖和糖尿病小鼠中，急性给予SFRP5可以通过抑制炎性反应和Wnt5a通路来改善代谢功能和胰岛素抵抗，表明SFRP5是影响全身新陈代谢的胰岛素抵抗和脂肪组织炎症的重要介质。本研究中GDM组患者SFRP5水平显著低于对照组，与FBG、FINS、HOMA-IR、TG、IL-1β等指标呈负相关，表明SFRP5对GDM患者体内糖脂代谢紊乱、炎性反应及胰岛素抵抗程度有一定改善作用，也正说明这一点。Hu等[15]对2型糖尿病人群相关研究结果显示即使在糖耐量改变的早期阶段，如糖耐量受损，也存在较低的SFRP5水平，表明SFRP5可能是2型糖尿病代谢紊乱或胰岛素抵抗的相关因素。研究发现，GDM患者血清SFRP5的表达水平显著降低，与GDM风险增加显著相关[16]。本研究的回归分析结果显示，SFRP5为GDM独立影响因素，SFRP5表达水平下降是GDM的危险因素，说明SFRP5与GDM的发生、发展密切相关。

综上所述，脂肪因子SFRP4、SFRP5与GDM患者的糖脂代谢、胰岛素抵抗及炎性反应密切相关，在GDM的发生、发展过程中起重要作用。然而本研究纳入的样本量较小，SFRP4、SFRP5在正常妊娠人群及GDM患者血清中的表达情况仍需在以后的研究中进一步增加样本量予以证实，同时其具体表达及作用机制仍有待于进一步研究。