普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤前后血清中色素上皮衍生因子水平探讨

周昱川 王冰 李红 凌彬

[摘要]目的：通過研究普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤前后血清中色素上皮衍生因子（Pigment epithelium-derived factor，PEDF）水平变化，进而探讨普萘洛尔治疗血管瘤的作用机制。方法：收集增殖期的血管瘤患者35例，消退期的血管瘤患者17例，脉管畸形患者7例，唇腭裂患者10例，增殖期血管瘤患者、消退期血管瘤患者给予心得安治疗，并且收集治疗前后的血液标本。用人PEDF-ELISA试剂盒检测每个分组中患者的血清PEDF水平，所得数据使用SPSS 21.0统计软件分析。结果：增殖期血管瘤组治疗前的血清PEDF水平最低，消退期血管瘤组治疗前血清PEDF水平最高，差异有统计学意义（P<0.05）。增殖期血管瘤治疗后1、3、6、9个月的血清PEDF水平高于治疗前，差异有统计学意义（P<0.05）。消退期血管瘤治疗后1、3个月的血清PEDF水平高于治疗前，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：本实验初步验证了普萘洛尔治疗血管瘤前后PEDF水平变化，提示PEDF在婴幼儿血管瘤的发生、发展、消退中起了重要作用。

[关键词]婴幼儿血管瘤;普萘洛尔;色素上皮衍生因子;血管内皮生长因子;脉管畸形;β受体阻滞剂

[中图分类号]R732.2    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2021）05-0063-03

Serum levels of Pigment Epithelium-derived Factor before and after Propranolol Treatment of Infantile Hemangioma

ZHOU Yu-chuan，WANG Bing，LI Hong，LING Bin

（Department of Oral and Maxillofacial Oncological Surgery，the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University/Hospital of Stomatology，Xinjiang Uygur Autonomous Region Institute of Stomatology，Urumqi 830054，Xinjiang，China）

Abstract： Objective  To explore the mechanism of propranolol in the treatment of infantile hemangiomas by studying the serum levels of pigment epithelium-derived factor （PEDF） before and after the treatment of infantile hemangiomas with propranolol. Methods  35 cases of hemangiomas in proliferating period， 17 cases of hemangiomas in involuting period， 7 cases of vascular malformation and 10 cases of cleft lip and palate were collected， the first two objects were treated with propranolol and blood samples were collected before and after the treatment. The human PEDF-ELISA kits were used to measure the serum of PEDF levels in each group， analysis was performed by using SPSS 21.0. Results  The serum PEDF level before treatment was the lowest in proliferating hemangiomas group， but was the highest in involuting hemangiomas group， the differences were statistically significant （P<0.05）. The serum PEDF levels of proliferating hemangiomas group at 1， 3， 6 and 9 months after treatment were higher than that before treatment （P<0.05）. The serum PEDF levels of involuting hemangiomas group at 1 and 3 months after treatment were higher than that before treatment （P<0.05）. Conclusion  This study preliminarily verified the changes of PEDF in the treatment of infantile hemangiomas with propranolol， which suggested PEDF played an important role in the occurrence， development and regression of infantile hemangiomas.

Key words： infantile hemangiomas; propranolol; pigment epithelium-derived factor; vascular endothelial growth factor; vascular malformation; β-blockers

血管瘤又称婴幼儿血管瘤（Infantile hemangiomas，IH），是发生在婴幼儿中的最常见的血管源性良性肿瘤，具有自发性消退的生物学特点[1-2]，目前，临床上是口服心得安，即普萘洛尔片来治疗血管瘤，但治疗机制尚未明确。色素上皮衍生因子（Pigment epithelium-derived factor，PEDF），在1989年首次由Tombran-Tink等[3]研究人员从胎儿的视网膜色素上皮细胞的培养液中分离出，色素上皮衍生因子最重要的作用是诱导血管的退化，是目前所研究出的最具潜力的内源性抑制血管形成的因子[4]。所以，本次提出的假设是：普萘洛尔在治疗增殖期婴幼儿血管瘤时是否可诱导PEDF提前进行自分泌，进而起到促进血管瘤消退的作用。因此，本研究采集血管瘤患儿口服普萘洛尔前后的血液标本，采用酶联免疫吸附法检测血清中PEDF的水平，进而探讨普萘洛尔治疗血管瘤的作用机制。

1  资料和方法

1.1 病例资料：本次研究收集了就诊于新疆医科大学第一附属医院（附属口腔医院）颌面肿瘤外科的血管瘤患儿、脉管畸形患儿、唇腭裂患儿的病历资料及血液标本。收集了52例婴幼儿血管瘤患儿（其中包括：35例增殖期血管瘤患儿，17例消退期血管瘤患儿），7例脉管畸形患儿（均诊断为静脉畸形），10例唇腭裂患儿，其中唇腭裂患儿作为非血管疾病组。

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准：①依据ISSVA血管瘤与脉管畸形的分类标准，结合彩色多普勒超声检查，诊断为增殖期及消退期的血管瘤患儿;②血管瘤患儿在使用普萘洛尔治疗前没有采用过其他治疗方法;③血管瘤患儿，根据血管瘤的自然病程将年龄小于等于12月龄，纳入增殖期组;年龄大于12月龄，纳入消退期组。

1.2.2 排除标准：①血管瘤瘤体局部溃疡;②心动过缓、心脏严重畸形;③哮喘或哮喘家族史患儿;④脉管畸形患儿，唇腭裂患儿出现感冒，上呼吸道感染，肺炎，腹泻等;⑤年龄大于3岁。

1.3 分组：严格依据纳入、排除标准入选病例，将入选的病例分为4组：①增殖期血管瘤组;②消退期血管瘤组;③脉管畸形组;④非血管疾病组。采用普萘洛尔治疗血管瘤患儿，进行治疗前后比较。

1.4 方法

1.4.1 婴幼儿血管瘤的治疗方法及随访：明确诊断为血管瘤的患儿，普萘洛尔口服治疗，口服剂量为2mg/kg/d[5-6]，连续口服后1、3、6、9个月复查。病变处进行拍照存档，患儿血液留取样本。

1.4.2 PEDF检测：血管瘤患儿留取治疗前、后的血液，脉管畸形组、非血管疾病组患儿均留取治疗前的血液标本，使用无任何添加剂的采血管采集约1.5～2ml外周静脉血，离心后抽取血清后分装、标号，-80℃冰箱保存。实验试剂选择人PEDF-ELISA试剂盒（武汉博士德生物公司，产品编号：EK0896），采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorent asssy，ELISA）测定血清中PEDF的含量，实验步骤参照说明书。

1.5 统计学分析：实验数据使用SPSS 21.0软件分析，数据为计量资料，用均数±标准差表示，采用秩和检验进行统计学分析，P<0.05为差异具有统计学意义。

2  结果

2.1 各组治疗前血清中PEDF的表达：治疗前增殖期血管瘤组血清PEDF水平最低，消退期血管瘤组明显高于其余三组，差异具有统计学意义（P<0.05）。这一结果提示，色素上皮衍生因子在血管瘤的消退期参与一定的促进血管瘤病变消退的作用。

2.2 普萘洛尔治疗后婴幼儿血管瘤患儿血清中PEDF的表达：将增殖期血管瘤治疗前与治疗后1、3、6、9个月的血清中PEDF水平进行比较，结果提示：随着普萘洛尔治疗时间的推移，血清PEDF水平逐渐升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。将消退期血管瘤治疗前与治疗后1、3个月的血清PEDF水平进行比较发现，通过普萘洛尔药物治疗后，血清PEDF水平明显增高，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表3。这一结果提示普萘洛尔可能诱导PEDF的分泌从而促进血管瘤的消退。

2.3 典型病例：腮腺区血管瘤患儿，口服普萘洛尔片，剂量为2mg/kg/d，口服后1、3、6、9个月后随访复查，可见右侧腮腺区血管瘤逐渐消退。见图1。

3  讨论

色素上皮衍生因子PEDF是丝氨酸蛋白酶抑制剂家族成员，于1999年首次被Dawson DW[4]发现具有抗血管新生的活性，在人体大部分器官及血浆中均有表达，在肿瘤研究领域，PEDF被认为可通过直接抑制肿瘤细胞和间接抑制血管新生两种方式来抑制肿瘤组织的生长[7]。研究显示，他与其他抑制血管的因子不同，他是选择性的促使血管内皮细胞凋亡，即只对异常的新生血管起到抑制作用，并不对已经成熟的血管起作用[8-9]。血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）是一种重要的调节血管生成的因子，可以促使血管内皮细胞增长，研究显示增殖期婴幼儿血管瘤中，VEGF的表达是升高的[10-11]。VEGF和PEDF是相互作用的一对血管生成、抑制因子，研究顯示在低氧的条件下，可以诱导VEGF等因子高表达，同时降低PEDF的生成，当VEGF与PEDF之间的平衡关系被打破时，继而出现病理性的新生血管。Li M等[12]研究发现PEDF在消退期的血管瘤组织中和mRNA表达中显著高于增殖期，而VEGF在消退期的血管瘤组织中和mRNA表达中明显低于增殖期。Kyung-Jin Kim[13]等研究者，将增殖期、消退期、消退完成期的血管瘤组织进行免疫组化实验，结果提示：PEDF在增殖期血管瘤组织中低表达，而在消退期组织中则为高表达。

通过口服普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤后，瘤体逐渐消退，血清中PEDF的含量也较治疗前逐渐升高，值得注意的是，增殖期婴幼儿血管瘤治疗后PEDF的变化水平并没有消退期的PEDF变化明显，但是从治疗效果上来说，增殖期即开展治疗比等到消退期时再治疗其效果更好。而本次研究发现治疗前消退期的PEDF水平明显高于增殖期时PEDF水平，若在增殖期时使用普萘洛尔联合PEDF进行治疗，可能可以缩短临床治疗时间，增加治疗效果，同时为存在普萘洛尔口服禁忌的患儿提供新的且有效的治疗方法，进一步指导新药的研发。

[参考文献]

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[13]Kyung-Jin Kim，Sitkiewicz A，Andrzejewska E，et al.Local serum level of vessel endothelial gorwth factor in infantile hemangioma. intriguing mechanism of endothelia growth[J].Cytokine，2010，49（2）：141-147.

[收稿日期]2020-05-27

本文引用格式：周昱川，王冰，李紅，等.普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤前后血清中色素上皮衍生因子水平探讨[J].中国美容医学，2021，30（5）：63-65.