蒺黄蒲绞汤干预高脂血症大鼠的作用和作用机制研究

李佳维，杨建梅（通讯作者）

（上海市徐汇区中心医院 上海 200031）

高脂血症（HLP）是一种脂质代谢紊乱引起的一种或多种脂质高于正常的疾病。动脉粥样硬化（AS）最常见的危险因素是高脂血症，AS又是心脑血管疾病的病理基础，故可以说高脂血症是心脑血管疾病的元凶。本此实验研究了蒺黄蒲绞汤对高脂血症模型大鼠的降脂作用，为临床提供有效的实验依据。

1.资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1实验试剂及仪器 全自动生化分析仪（日立7180）、酶标仪（Thermo）、台式水平离心机（Eppendorf，5810R 德国）等。TC、HDL-C、LDL-C试剂盒（积水医疗）、TG试剂盒（日本和光）、TNF-α、IFN-γ elisa试剂盒（达优）、CTRP9、APN elisa试剂盒（上海樊克生物）等。

1.1.2实验动物 6周龄清洁级SD雄性大鼠，体重（180±20）g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司（SCXK(京)2015-0001）。大鼠饲养于上海中医药大学实验动物中心，饲养环境温度为（24±2）℃，自由采食饮水，适应性饲养。

1.1.3实验药物 蒺黄蒲绞汤处方为：绞股蓝15 g，黄精15 g，生蒲黄15 g，白蒺藜15 g，地龙12 g，上述组方中药材10剂混合，经浸泡煎煮浓缩调节至含生药0.48 g/mL（小剂量）、0.96 g/mL（中剂量）和1.92 g/mL（大剂量），4℃冰箱保存备用。所有药材均购自上海同济堂药业有限公司。辛伐他汀片：规格20 mg/片，杭州默沙东制药有限公司，批号：LO18189。

1.1.4高脂饲料配方 90.5%基础饲料，1%胆酸，3%胆固醇，5.5%花生油。

1.2 方法

1.2.1高脂血症模型的建立 参照文献[1]的方法，改进并建立大鼠高脂血症模型。将6周龄SD清洁级雄性大鼠48只，按体重分为6组，每组8只，分别为正常组、模型组、辛伐他汀组、蒺黄蒲绞汤小、中、大剂量组。正常组予普通饲料，余各组均以高脂饲料。各组大鼠食物均经自由摄取4周。

1.2.2药物干预 大鼠适应性喂养后，造模的同时开始给药，正常组、模型组每日以2 mL蒸馏水灌胃。辛伐他汀组灌服辛伐他汀7.5 mg/kg·d，蒺黄蒲绞汤小剂量组灌服蒺黄蒲绞汤4.5 g/kg·d，中剂量组灌服9 g/kg·d，大剂量组灌服18 g/kg·d，连续给药4周。每周称重1次，调整药物剂量。

1.2.3标本采集及检测 给药第28 d后禁食（不禁水），0.3%戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔注射，腹主动脉取血分离后-20℃冰冻保存待测。检测TC、TG、LDL-C、HDL-C。ELISE法检测TNF-α、IFN-γ、APN、CTRP9。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件进行分析。计量资料符合正态分布时数据采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 蒺黄蒲绞汤对高脂血症大鼠血脂的影响

与模型组比较：正常组的TC、TG、LDL-C水平低于模型组，HDL-C水平高于模型组（P＜0.01）,提示成功建立高脂血症大鼠模型。辛伐他汀组、蒺黄蒲绞汤大剂量组可降低TG、TC、LDL-C，升高HDL-C（P＜0.01）。中剂量组可降低TG、TC、LDL-C（P＜0.01）。小剂量组可降低TG、TC（P＜0.01）。

与辛伐他汀组比较：蒺黄蒲绞汤小剂量组在降低TG、TC方面疗效低于辛伐他汀组（P＜0.05）,在升高HDL-C、降低LDL-C方面疗效低于辛伐他汀组（P＜0.01）。中剂量组在降低LDL-C方面疗效低于辛伐他汀组（P＜0.05）。大剂量组降低TG、TC、LDL-C，升高HDL-C疗效与辛伐他汀组无显著差异（P＞0.05）。见表1。

表1 各组大鼠血脂水平比较（±s，mmol/L）

表1 各组大鼠血脂水平比较（±s，mmol/L）

注：与模型组比较，**P＜0.01，*P＜0.05；与辛伐他汀组比较，▲▲P＜0.01，▲P＜0.05。

组别 只 TG TC正常组 8 0.33±0.11** 1.27±0.19**模型组 8 0.65±0.11 2.21±0.11辛伐他汀组 8 0.35±0.07** 1.64±0.25**蒺黄蒲绞汤小剂量组 8 0.48±0.15**▲ 1.85±0.15**▲蒺黄蒲绞汤中剂量组 8 0.38±0.09** 1.60±0.26**蒺黄蒲绞汤大剂量组 8 0.32±0.08** 1.56±0.13**组别 只 HDL-C LDL-C正常组 8 0.51±0.06** 0.17±0.02**模型组 8 0.37±0.07 0.57±0.06辛伐他汀组 8 0.48±0.06** 0.28±0.04**蒺黄蒲绞汤小剂量组 8 0.37±0.05▲▲ 0.53±0.12▲▲蒺黄蒲绞汤中剂量组 8 0.43±0.07 0.39±0.07**▲蒺黄蒲绞汤大剂量组 8 0.47±0.05** 0.36±0.09**

2.2 蒺黄蒲绞汤对高脂血症大鼠TNF-α、IFN-γ的影响

与模型组比较：正常组、辛伐他汀组、蒺黄蒲绞汤小、中、大剂量组的TNF-α与模型组相比无显著差异（P＞0.05）。正常组的IFN-γ低于模型组（P＜0.01）。辛伐他汀组、蒺黄蒲绞汤小、中、大剂量组均能降低IFN-γ（P＜0.01）。

与辛伐他汀组比较：蒺黄蒲绞汤小、中、大剂量组在降低TNF-α的作用上与辛伐他汀组无显著差异（P＞0.05）。大剂量组降低IFN-γ的作用优于辛伐他汀组（P＜0.05）。见表2。

表2 各组大鼠血清TNF-α、IFN-γ比较（±s，pg/mL）

表2 各组大鼠血清TNF-α、IFN-γ比较（±s，pg/mL）

注：与模型组比较，**P＜0.01,*P＜0.05；与辛伐他汀组比较，▲▲P＜0.01，▲P＜0.05。

组别 只 TNF-α IFN-γ正常组 8 3.09±0.28 1.84±0.27**模型组 8 3.90±0.68 3.08±0.46辛伐他汀组 8 3.10±0.24 2.10±0.23**蒺黄蒲绞汤小剂量组 8 3.15±0.17 1.99±0.33**蒺黄蒲绞汤中剂量组 8 3.13±0.38 1.96±0.23**蒺黄蒲绞汤大剂量组 8 3.04±0.23 1.72±0.25**▲

3.讨论

蒺黄蒲绞汤立方以“化痰降浊，活血通脉”为治疗原则，由绞股蓝，黄精，蒲黄，白蒺藜，地龙组成。方中绞股蓝为君药，有清热解毒，化痰降脂之效。以黄精为臣药，能健脾以助水湿运化，杜绝生痰之源。以生蒲黄为臣药，能祛瘀活血降脂。以白蒺藜为臣药，有疏肝理气以助脾运，行气活血以促降脂之功效。以地龙为佐药，有清热、熄风、通络之效，能加强活血通络的作用。诸药并用，共奏化痰降浊，活血通脉之功。

1980年就有相关报道干扰素可引起脂质代谢紊乱。其中IFN-γ升高可导致TG及LDL-C的升高，HDL-C的降低，能促进TNF-α等炎症因子的分泌,促进血管内皮炎症的发生，从而形成动脉粥样硬化。TNF-α由单核-巨噬细胞分泌而来，TC的明显升高，促使大量TNF-α分泌，直接损伤血管内皮细胞。TC穿透内膜，在血管内壁形成动脉粥样硬化斑块[2-3]。本次研究检测了血清IFN-γ、TNF-α水平，发现蒺黄蒲绞汤具有降低炎症因子的作用，可通过降低IFN-γ，抑制TNF-α，减轻炎症，起到调脂作用。APN是一种脂肪细胞因子，有调节脂肪组织和血管的功能，具有抗动脉粥样硬化、抗炎等多种生物学效应[4-5]。

综上所述，本次研究检测了血清APN、CTRP9水平，发现蒺黄蒲绞汤可能通过调节脂肪细胞因子水平，抑制炎症，调节脂代谢紊乱。