核酸与酶联免疫检测血液病毒的效果评价

高雯丽

（石河子纺织医院 新疆 石河子 832000）

乙型肝炎病毒（HBV）为导致乙型肝炎的病原体，人类免疫缺陷病毒即艾滋病病毒（HIV），是导致人类免疫系统缺陷的一种病毒[1]。丙型肝炎病毒（HCV）具有异源性、可变性[2]。乙型肝炎病毒、艾滋病病毒、丙型肝炎病毒等均可通过血液进行传播，因此加强血液病毒检验为减少、预防输血中病毒传染的重要方式[3]。酶联免疫检测为酶免疫测定技术中被临床广泛应用的技术方式，利用酶分子与抗体、抗抗体分子共价结合，进行测定，具有较高临床价值[4]。核酸检测方式通过检测呼吸道标本、血液及粪便中判断有无外来侵入的病毒的核酸，进而确定有无被病毒感染。选取154份无偿献血者血液样本进行检测，内容如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年5月—2019年5月我院无偿献血者血液样本154份，分别对154份血液样本进行酶联免疫检测、核酸检测，对比酶联免疫检测、核酸检测两种检测方式的临床检测结果。154份血液样本中男性献血者、女性献血者分别85份、69份，年龄下限值为18岁，上限值为63岁，平均年龄（44.21±4.42）岁。采集无偿献血者血液样本后将获取的样本均放在2～8℃条件下存储，154份无偿献血者血液样本经梅毒、转氨酶检测表示可进行实验。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①血液样本合格，与各项目试验技术要求相符。排除标准：①存在乙肝、甲肝病毒的血液样本。

1.3 方法

对154份无偿献血者血液样本分别进行酶联免疫检测、核酸检测，检测人员在检测过程中需仔细观察检验图像、数据，保证数据准确、有效性。

核酸检测：使用医院提供的混样仪、核酸提取扩增系统、试剂等进行检查。将存储在2～8℃条件下的血液标本取出，在室温下对真空抗凝管中血液标本进行20 min离心、分离血清处理，结合后放于2～8℃条件下存储。经检查表明血液标本可进行实验后，将合格的血液标本放在样品条架上，根据分配试剂一级程序步骤进行操作。将100 μL A、B洗液，100 μL A、B洗脱液，加入B号96孔深孔板内，将50 μL磁珠、600 μL结合液体倒入A号96孔深孔板内。对样品展开裂解，注意预防样本污染。样品裂解完成后，将程序使用三级核酸提取出来，对B号96孔深孔板、A号96孔深孔板使用核酸提取仪提取核酸，调配扩增核酸反应溶液。使用四级核酸扩增程序提取标本量中核酸，将核酸提取后结合液倒入八联管内，在PCR仪器中扩增八联管，详细记录检测结果，将阳性汇集孔样本挑出，予以拆分实验，明确阳性样本。

酶联免疫检测：使用医院提供的检测系统、处理系统、试剂等进行检测，按照试剂内配套说明书进行操作。取出存储在真空抗凝管内的样本在室温下进行20 min离心，分离血浆，放于适宜条件下保存。离心结束后，使用全自动加样仪进行自动加样，使用全自动酶免分析仪展开分析，记录结果。

1.4 临床评价

对比分析核酸检测、酶联免疫检测方法等两种检测方式检测血液病毒的结果，分析临床检验血液病毒使用核酸检测、酶联免疫检测方法等两种检测方式的应用价值。

1.5 统计学处理

数据录入到SPSS 22.0软件统计分析，计量资料对比采用t检验，以（）表示，而计数资料对比采用χ2检验，以率（%）进行表示，P＜0.05，差异有统计学意义。

2.结果

2.1 核酸检测、酶联免疫检测方法等两种检测方式的检测结果

核酸检测方式检测艾滋病病毒的阳性率8.44%（13/154），酶联免疫检测方式检测艾滋病病毒的阳性率为2.60%（4/154），核酸检测方式检测艾滋病病毒阳性率高于酶联免疫检测（P＜0.05），差异有统计学意义；核酸检测方式检测乙型肝炎病毒的阳性率6.49%（10/154），酶联免疫检测方式检测乙型肝炎病毒的阳性率为1.30%（2/154），核酸检测方式检测乙型肝炎病毒阳性率高于酶联免疫检测（P＜0.05），差异有统计学意义；核酸检测方式检测丙型肝炎病毒的阳性率9.74%（15/154），酶联免疫检测方式检测丙型肝炎病毒的阳性率为3.25%（5/154），核酸检测方式检测丙型肝炎病毒阳性率高于酶联免疫检测（P＜0.05），差异有统计学意义，见表1。

表1 核酸检测、酶联免疫检测方法等两种检测方式的检测结果[n（%）]

3.讨论

艾滋病又可以称为获得性免疫缺陷综合征（AIDS），是因机体感染人类免疫缺陷病毒（HIV）导致的全身性疾病。感染HIV病毒后人体会出现不同程度的免疫功能缺陷，没有接受治疗的患者在疾病晚期容易并发多种严重感染、恶性肿瘤，最终走向生命尽头。艾滋病、乙型肝炎等疾病通过血液传播病毒，对人们生命健康安全造成较大威胁。使用有效的检测方式检验血液有利于减少医院纠纷、降低输血传播风险。酶联免疫检验为临床多见抗体、抗原测定方式。基于相关联的酶对免疫复合物发生酶催化反应进行测定。现如今多数血站使用基于2次酶联免疫检验方式对血液展开检测，发现该方式检出率不高，且漏诊、错诊较高，对血液检测效率产生较大影响，导致安全隐患增加[5]。核酸检测方式有利于控制输血有关因素导致正常人群感染、感染性疾病扩散，提高社会安全性。

本研究使用核酸检测方式检测艾滋病病毒阳性率、乙型肝炎病毒阳性率、丙型肝炎病毒阳性率均高于酶联免疫检测。提示核酸检测可有效提高临床检验血液病毒的准确性、减少漏诊，具有较高灵敏度、特异度。核酸检测方式运用病毒核酸扩增技术，将病毒扩增至阳性汇集孔，使检测病毒的灵敏度大幅度升高。并且在病毒窗口阶段也可进行检验，对减少漏诊、错诊率、缩短病毒窗口阶段具有极大临床意义。酶联免疫检测方式为临床多见的抗体、抗原测定方式，基于相关联的酶对免疫复合物发生酶催化反应测定。检测艾滋病病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等灵敏度较低与免疫静默感染、病毒变异、窗口期等有关。乙型肝炎病毒感染和季节有关，冬天气温较低，人体乙型肝炎表面抗原活性较低，表达水平低，导致酶联免疫检测方式发生漏检。

李玉泉[6]对血站检验科500例血液样本展开研究，发现核酸检测得到乙型肝炎病毒（HBV）阳性率高于酶联免疫检测，核酸检测得到人类免疫缺陷病毒（HIV）阳性率高于酶联免疫检测，表明对血液样本使用核酸检测方式进行检验有助于提高临床医疗质量、检验准确性。曹华琳[7]对26 325份无偿献血者血液样本发现核酸检测方式可检出酶联免疫检测无法检出的病毒变异，隐性感染、窗口期等情况，指出核酸检测方式利用扩增相应病毒颗粒RNA，并使用聚合酶链式反应检查基因扩增产物，降低疾病传播风险。核酸检测的临床应用效果良好，本结果与之一致。核酸检测方式对检测环境、检验工作者、血液标本等具有较高要求，若血液标本质量无法得到保证，将对核酸检测方式准确性产生直接影响。因此后续需加强血液样本质量监测,提高检验工作者技术水平，进一步保证临床血液检测质量。

综上所述，使用核酸检测方式检验血液病毒效果确切明显，有效提高检测准确率、血液制品安全性，筛选血液病毒效果良好，减少漏检率，适用于临床检验血液病毒。