针刺“四关穴”对发热小鼠体温的观察

◇吉首大学医学院 高玉妍 王冰卉 彭思云 陈思洁 伍雨田 张 赟

目的：观察针刺“四关穴”后，发热小鼠体温的变化。方法：通过皮下注射干酵母混悬液建立发热小鼠模型30只，随机分为对照组、西药组、针刺组，每组各10只，对照组仅造模；西药组予以复方对乙酰氨基酚溶液灌胃；针刺组小鼠针刺双侧合谷、太冲，直刺0.2 cm，并配合捻转泻法。另正常体温小鼠10只，不做任何处理；记录各组小鼠治疗前后体温，比较各时间点各组之间的温度差异情况。结果：针刺“四关穴”对于发热小鼠具有肯定的退热作用。

发热（fever）是临床常见症状，祖国医学认为发热是由于机体感受外邪、内伤积损，或因机体营卫失和、肺失宣降而出现体温升高的一类病证[1]。临床研究表明，针刺对于发热的治疗效果显著[2]，临床多选用大椎、少商、合谷、曲池等穴来退热[3]。《标幽赋》中提出“寒热痹痛，开四关而已之”，四关穴即为双侧合谷和太冲。合谷属阳经，主气，清轻升散主升，太冲属阴经，主血，重浊下行，主降。两穴相配，气血调和、升降协调、阴阳顺接，故对于阴阳失衡，气血失调的各种病症能起到较好的协同治疗作用[4]。本文是在构造发热小鼠模型的基础上，观察针刺四关穴对发热小鼠的体温影响。

1 材料与方法

1.1 动物及分组

昆明种小鼠40只，SPF级，雄性，体重20 g，由长沙市天勤生物技术有限公司提供，动物许可证：SCKX（湘）2019-0014。饲养于吉首大学实验动物中心，环境温度25 ℃，相对湿度60%左右，光照时间12 h/d，自由饮食饮水喂养。采用随机分组法将小鼠分为正常组、对照组、西药组、针刺组，每组10只，并用苦味酸溶液染色编号。

1.2 试剂

干酵母片（每片含酵母0.2 g）由广东五洲药业有限公司，配合生理盐水配置成20%浓度的酵母菌混悬液40 ml；复方对乙酰氨基酚片（每片含量0.3 g）由西南药业股份有限公司生产，配合生理盐水配置成10%浓度的复方对乙酰氨基酚混悬液20 ml。

1.3 仪器

华佗牌针灸针（规格：0.30 mm×13 mm，江苏苏州医疗用品厂有限公司）、体温枪（东莞市振海电子科技有限公司）。

2 实验方法

2.1 模型制作方法

将小鼠在室温为20 ℃～25 ℃的实验室内适应3 d，每天上午10:00用体温枪测量小鼠腹部体温3次（每次间隔20 s），取平均值。实验前一天上午10:00测量小鼠体温，每隔0.5 h测量一次，连续4次，取4次体温的平均值作为基础体温，剔除体温波动超过0.3 ℃的小鼠。实验前 24 h禁食不禁水。造模方法：实验当日上午7:30在小鼠背部皮下注射20%的酵母悬液（10 ml/kg），建立小鼠发热模型。据文献记载，小鼠注射干酵母混悬液后，体温会经过一次明显的下降，至4 h左右恢复正常，随后体温开始升高，6 h～8 h达到高峰，发热持续＞12 h[5]。

2.2 分组处理

小鼠随机分为正常组、对照组、针刺组和西药组。正常组不做任何处理，其余组皆进行造模，对照组不进行任何干预；西药组使用10%对复方乙酰氨基酚溶液灌胃（600 mg/kg）；针刺组针刺双侧合谷、太冲，并配合使用捻转泻法，每10 min行针一次加强针感，留针20 min。根据中国针灸学会学术部提供的《大鼠穴位图谱》及比较解剖学原理，参照人体经穴定穴，选取合谷、太冲。合谷：前肢第1、第2掌骨之间；太冲：后肢第1、第2趾跖骨之间。

3 观察项目及指标检测

成功皮下注射酵母菌混悬液后，每2 h测一次体温，造模8 h后，分组进行处理，每1 h测量一次体温，记录体温变化值。

实验数据用均数±标准差（±s）表示，用统计学软件SPSS25.0进行统计分析处理，组间采用重复测量资料方差分析，用直线相关方法分析变量间关系，P<0.05表示具有统计学意义。

4 结果

由图1可见：随着时间变化，正常组体温维持在较为恒定的状态，对照组、西药组、针刺组的小鼠体温呈上升趋势，在8 h升至最高，而后下降，升温幅度>0.8 ℃，且具有显著性（^P<0.05）说明小鼠热证模型造模成功。

图1 各组小鼠体温变化的趋势图

由表1可见，造模成功小鼠予以干预后。随着时间的变化,体温均有不同程度下降,治疗后3小时（造模后11 h）体温降至最低，4小时后（造模后12 h）均开始回升。

表1 各组小鼠在不同时间段的体温记录表

与对照组相比，西药组和针刺组具有显著差异性（#P<0.05，*P<0.05）；而西药组和针刺组不具有显著差异性（**P>0.05），说明针刺与西药对于降温均有疗效，但之间为明显差异。西药组出现两例小鼠体温低于正常值，而无法测得其准确数值的情况，而针刺组、正常组及对照组小鼠并未出现明显不良情况，可见针刺治疗相比西药治疗更为绿色、健康且行之有效。

5 讨论

发热是常见的临床症状，可由多种原因引起。西医治疗多采用服用退烧药的方法[6]，中医治疗方法可选用针刺放血，服食中药[7]。《针灸大成》曰：“四关四穴，即两合谷，两太冲穴是也。”，《说文解字》解释“关”—以木横持门户也，意即重要的关卡或枢纽。合谷和太冲分别是手阳明大肠经、足厥阴肝经之原穴，是本脏腑原气经过和留止的部位，通过三焦运行于全身，是推动全身气化的重要动力。发热时病机无外乎气血、阴阳、寒热失调。合谷、太冲为经典配穴，两穴一阴一阳，一气一血，一脏一腑，一升一降，阴阳经相配，上下相配，气血同调、阴阳同调、脏腑同调，共奏清热利湿、调和阴阳之功。机体阴阳平衡，气血调和、体温即回落至正常状态。

此实验结果表明，针刺四关穴具有明显的退热作用，其退热效果与对乙酰氨基酚相近，对乙酰氨基酚是临床常用的解热镇痛抗炎药，具有一定程度的肝肾毒性。而针刺退热具有绿色、环保、无毒副作用的优点，并且针刺四关穴退热还具有选学精炼，取穴方便，操作简便的优点，值得推广。

干酵母皮下注射是造成小鼠及大鼠发热的常用方法，所造成的发热类型为炎症感染性发热。其具有开始时间，持续时间，升热高度，升温趋势较为稳定的优点，且操作简便易行。