快速石蜡切片技术在病理检验中的应用

谭超华 李红全 李立 蔡晓燕

（广东省台山市人民医院病理科 广东台山 529200）

1 前言

在外科手术中， 快速病理诊断对选择手术方式具有重要意义。 在21 世纪发展的今天，我国医疗技术在不断进步，对于病情的检查也更加快速准确。快速石蜡切片方案，操作既简单又迅速，取得良好检验效果，其应用价值高[1-2]。 改良之后的石蜡切片技术对设备以及技术的要求都有一定程度的降低， 减少了成本投入，而且所需的时间也大为缩短，在一定程度上避免了人力的浪费， 而且检查结果也更加的准确，应该在临床上得到推广[3]。 本研究采用快速石蜡切片检验，报道如下：

2 资料与方法

2.1 一般资料

本研究经过本院伦理委员会批准， 研究对象为我院2017 年1 月～2020 年1 月病理科接受收治的190 例病理检验患者，均经过患者知情同意，其中男86 例，女 104 例，年龄 24～63 岁，平均（44.58±4.29）岁，受检组织分为：乳腺35 例；淋巴结15 例；宫颈25 例；卵巢 15 例；甲状腺 25 例；腮腺 15 例；胆囊 15例；阑尾10 例；胃肠镜活检20 例；支气管内膜活检15 例。

纳入标准：（1）依从性较好者。（2）资料完整。（3）无其他重要脏器功能受损。

排除标准：（1） 机体严重疾患且影响研究结果者。（2）合并其他肿瘤、心衰者。（3）中途因各种原因无法继续接受相关治疗而退出者。

2.2 方法

常规切片方案： 取新鲜病变组织， 实施常规固定、脱水、透明、浸蜡以及包埋切片，切片厚度在4 μm～5 μm 之间，并对切片实施HE 染色，最后在显微镜下进行观察。

进行快速石蜡切片方案： 此次研究所用设备有染片机、 包埋机、 烤片机以及切片机等； 试剂有af液、石蜡、硬脂酸以及丙酮等。启动快速处理仪，予以预热，使其温度达到72℃后，对病灶组织进行合理修整，使其呈现出薄片状，厚度以1.0～1.5 mm 为最佳，以甲醇固定液对其进行浸泡，约10 min 左右。 将标本组织取出后，予以水洗，约10 s 后，置于滤纸表面，使其水分被充分吸尽，再用丙醇进行浸泡，并予以超声处理，时长约15 min 即可，确保其上浮。 调制石蜡以及硬脂酸，两者间比例是3/1，将组织放入混合液中，约20 min 后，组织会逐渐沉底，再以镊子对其进行清压，确保无气泡出现。予以常规包埋以及常规切片， 使其快速冷却。 将切片的厚度控制在3.0 μm～4.0 μm 之间，于载玻片表面均匀摊铺切片后，将其置入烤片机中，予以烤片约10～15 s 即可，且将烤片温度控制在80℃以内。予以HE 染色，时长控制约43 min，并以中性树胶对其进行封固。

2.3 观察指标

统计并比较这2 种切片制作技术对病理检验技术的影响，通过2 种切片不同流程操作时间、标本制作时间进行评价。

2.4 统计学处理

采用SPSS19.0 统计软件对全文数据进行计算，计量资料以（均数±标准差）表示，t 检验，P 小于0.05判定其有无统计学意义。

3 结果

与常规切片方案固定操作时间、 第一次浸蜡操作时间、透明胶水操作时间、第二次浸蜡操作时间、切片制作时间相比， 快速石蜡切片方案显著较短（P＜0.05），参考表1。

表1 两种检验方案的操作时间对照（n=60，min）

4 讨论

外科手术在术中常会遇到诊断困难的情况，常常需要病理科提供快速准确的诊断， 术中病理具有局限性大、组织样本小、时间紧等特点，对诊断准确性影响较大。 传统诊断方法为冰冻切片与加温石蜡切片，加温石蜡切片方法在检验过程中，易出现收缩及组织变形等问题[4]；冰冻切片方法成本较高，只适合于小范围应用[5]。

研究发现，病理检验工作中，病理切片技术是否精良，不仅会影响检验时间，而且还会对检验质量造成影响，因此需重视[6]。 就目前而言，临床检验技术以冷冻技术以及石蜡技术为主， 但是在病理诊断工作中，冷冻技术往往无法继续切片，同时无法对切片厚度进行有效把握， 而石蜡技术操作程序呈现出复杂性特征，可能会使机体病理组织异常收缩，或者是在短时间内变硬，影响其诊断质量，以至于出错率异常升高[7]。 鉴于此，在快速病理检验工作中，落实快速石蜡切片方案体现出重要价值， 该检验方案除了不会受到地域因素、气候因素的影响外，同样不会受到环境因素影响，价值操作程序具有方便性，因此实践性较高[8]。 不仅如此，该检验方案所用设备以及仪器的普及性较高，予以切片镜检，除了能提升组织结构的整体清晰度外， 还能确保细胞组织形态的完整性，因此有助于提升检验工作质量，进一步控制固定操作、第一次浸蜡、透明脱水以及第二次浸蜡等程序的操作时间。本次研究结果表明，与常规切片方案固定操作时间、第一次浸蜡操作时间、透明胶水操作时间、第二次浸蜡操作时间、切片制作时间相比，快速石蜡切片方案显著较短（P＜0.05）。 快速石蜡切片技术可以对病人的患病部位进行精确诊断， 对于病人患病部位的病情以及病例特点都能够进行针对性的检测，大大提高了诊断的精确性。该技术对环境的包容度高，可以适应恶劣的环境条件，对于设备的要求也比较低，对于部分基层县级医院来说，还是便于操作的，而且该技术对人员技术要求也较为简单，应该在更多的临床中进行推广使用， 一定可以给更多人带来福音。为提升快速石蜡切片方案实践价值，在具体操作程序中，还需重视：（1）对脱水机中水槽的温度进行合理调整，以70℃～72℃为最佳，避免过高；（2）在取材中，需对病灶组织厚度进行合理把握，以1.0～1.5mm 为最佳， 避免过后影响检验质量；（3）在给予病理组织脱水时，要注意观察，根据气泡、组织质地、组织颜色等情况确定脱水的时间。 （4）石蜡以及硬脂酸的质量比设定为3∶1，对硬脂酸整体浓度进行有效控制，防止其浓度过高导致掉片问题出现，而浓度过低可能影响切片透明度；（5）烤片之前，为控制烤片时长，需用滤纸对余液进行有效吸除。（6）检验人员要与临床医师进行及时有效的沟通，以便明确对病理诊断相关的要求，为临床提供最佳诊断结果。

综上所述，临床病理检验工作中，选择快速石蜡切片技术，可行性高，可缩短各环节操作时长，同时还能确保检验工作质量，此方法可广泛应用于临床。