瑶药南蛇风生药学研究

陈庆淑，袁经权，陈 路，刘振杰，刘华钢*

［1.海南省人民医院（海南医学院附属海南医院）， 海南 海口 570311；2.广西中医药大学 科学实验中心，广西 南宁530200；3.中国医学科学院药用植物研究所广西分所，广西 南宁 530023］

瑶药是民族药之一，在传统瑶药中，最具有代表性和民族特色的是“五虎九牛十八钻七十二风”类药材，南蛇风属于瑶药七十二风之一。瑶药南蛇风，亦称南蛇簕，为苏木科云实属喙荚云实Caesalpinia minax Hance 的干燥藤茎，分布于我国广东、广西、海南、四川、云南、贵州等省区，主要用于治疗感冒、尿路感染、尿血、急性肠胃炎、痢疾等症，为瑶医常用药之一[1]。据国内外文献报道，近年来学者对喙荚云实种子（苦石莲）的化学成分[2-7]、药理作用的研究较多,包括抗RSV、para-3 病毒活性[8-10]、抑制脂多糖刺激RAW264.7 细胞释放NO[11-14]、抑制小鼠黑色素瘤细胞增殖活性等[15]，但对瑶药南蛇风，即喙荚云实藤茎部位的研究鲜有报道[16-17]，其中生药鉴定方面的研究尚未见报道。为进一步研究喙荚云实植物，本实验收集了11 批次广西各不同产地的南蛇风药材，对其进行生药学研究。以期为南蛇风的开发利用和建立质量标准提供参考依据。

1 仪器和材料

RM 2155 型切片机（德国LEICA）；DM 2000 型生物显微镜（带有成像显微系统）（德国LEICA）；箱式电阻炉（沈阳节能炉厂）。

薄层色谱硅胶GF254板（批号：20110208，青岛海洋化工有限公司）。南蛇风药材采自广西南宁市邕宁区三塘镇，经广西中医药大学药用植物教研室韦松基教授鉴定为苏木科云实属植物喙荚云实Caesalpinia minax Hance 的藤茎，标本存于广西中医药大学科学实验中心。其余产地药材见表1。

表1 南蛇风样品信息Tab. 1 Caesalpinia minax Hance sample information

2 方法与结果

2.1 性状鉴别

本品呈长圆柱形，有分枝，直径1 ～ 6 cm；皮部表面灰褐色或黑褐色，粗糙，有些脱落，露出木质部，有些可见钝的皮刺，或有些残留皮刺基部；横切面可见皮部菲薄，木部黄白色，或者近内侧呈棕褐色，布满较密的小孔；质地疏松，易折断；髓部宽广，呈棕褐色或黄白色，质地较软，海绵状，或者完全脱落；气清香，味淡。主要鉴别特征为表面具有皮刺或残留的皮刺基部；髓部海绵状或有些完全退落成中空；质地疏松，易折断；气味浓郁者为佳。原植物见图1，药材见图2。

2.2 显微鉴别

2.2.1 横切面切片特征 横切面表皮细胞一层，外被角质层，嫩茎具皮刺；中柱鞘纤维较厚，成环状；韧皮部狭窄，筛管群分布在韧皮部外侧；形成层不明显；木射线多为1 列，或2 ～ 3 列，木纤维成群分布在木质部内侧；导管单个散在，或2 ～ 7 个成群分布；髓部外侧有1 ～ 3 列、切向延长的环髓区细胞，细胞较小，髓部细胞多数径向延长，少数类圆形，细胞间隙小。详见图3 ～ 5。

图1 南蛇风药材原植物图Fig. 1 Botanical origin of Caesalpinia minax Hance

图2 南蛇风药材图Fig. 2 Stems of Caesalpinia minax Hance

图3 南蛇风横切面的显微图Fig. 3 Transection feature of Caesalpinia minax Hance stems

图4 南蛇风皮刺显微图Fig. 4 Transection feature of Caesalpinia minax prickles

图5 南蛇风髓部显微图Fig. 5 Transection feature of Caesalpinia minax Hance pith part

2.2.2 粉末特征 粉末为黄绿色或黄褐色。具缘纹孔导管碎片较多，具缘纹孔排列密集，偶见网纹导管；石细胞易察见，呈类圆形、长圆形、狭卵形，壁厚，纹孔沟明显；嫩茎粉末中较易察见非腺毛，老茎中非腺毛难于察见；木纤维单个胞腔较宽或成束散在，晶鞘纤维较易察见；草酸钙方晶易察见，详见图6。

图6 南蛇风的显微粉末图Fig. 6 Powder feature of Caesalpinia minax Hance stems

2.3 理化鉴别

2.3.1 薄层色谱鉴别 分别称取南蛇风11 个产地药材粉末（过四号筛，65 目）各3 g，分别加入50 mL的氯仿回流提取2 h，滤过蒸干，残渣加甲醇2 mL 使溶解，作为供试品溶液。另取白桦脂酸对照品（批号：111802-201001，购于中国食品药品检定研究院），加甲醇制成每1 mL 含1 mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》四部）试验，吸取上述溶液各5 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（60 ～ 90 ℃）-丙酮-甲酸（4 ∶2 ∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱与对照品色谱在相同的位置上显相同颜色的斑点，详见图7。

图7 南蛇风样品的TLC 图Fig. 7 Thin-layer chromatograms of Caesalpinia minax Hance stems

2.3.2 水分测定 照《中国药典》2020 版“水分测定法（烘干法）”进行测定，测定11 批南蛇风样品的水分含量为7.5% ～ 9.1%，结果见表2。 综合多方面考虑药材质量的影响因素，故建议控制本品水分不得过11.0%。

2.3.3 总灰分和酸不溶性灰分 照《中国药典》2020 版“灰分测定法”项下总灰分、酸不溶性灰分测定法进行测定，测定样品总灰分在3.4% ～ 4.5%，酸不溶性灰分在0.2% ～ 0.3%，结果见表2。故建议控制本品总灰分不得过6.0%，酸不溶性灰分不得过0.6%。2.3.4 浸出物测定 照《中国药典》2020 版“浸出物测定法”项下的热浸法进行测定，实验中发现以水作为溶剂，过滤困难，故建议选择乙醇作为溶剂。测定样品浸出物含量为3.6% ～ 9.6%，结果见表2。故建议控制本品醇热浸出物不得低于3.0%。

表2 水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物测定结果Tab. 2 Results of the content determination of moisture, total ash,acidinsoluble ash, alcohol soluble extractives

3 讨论

本实验建立了南蛇风的生药学鉴别方法，从实验结果中可知，生药学特征明显，其嫩茎布满了刺，髓部海绵状；横切面可观察到中柱鞘纤维、环髓细胞、髓部细胞径向延长；粉末中石细胞的纹孔沟明显，具缘纹孔导管较多，非腺毛等特征进行鉴别；TLC 鉴别中，基于课题组前期从南蛇风中分离并鉴定得到白桦脂酸、白桦脂酸属羽扇烷型三萜类化合物，具有抗HIV、抗菌、抗肿瘤活性[15]，是目前具有开发前景的药物，其生物活性引起人们广泛关注。以上的药理活性和目前南蛇风的功效和药理方面的报道[16-17]相似，所以本实验选择白桦脂酸作为指标性成分，对其进行定性研究。通过不同薄层板、展开剂、显色剂等进行考察，其中以石油醚（60 ～ 90 ℃）-丙酮-甲酸（4 ∶2 ∶0.1）为最佳展开条件，分离效果较好，斑点清晰，重现性好，可用于南蛇风的定性鉴别。

4 结论

本实验确定了南蛇风的主要鉴别特征，其性状和显微特征明显，尤其是髓部特征，对药材真伪的鉴定具有指导意义。其薄层色谱法重现性好、灵敏度高、专属性强。同时可参考本实验南蛇风的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物的测定结果，拟定相关检查项的限度。前期的实验结果表明，喙荚云实种子苦石莲中的活性成分明确，具有潜在的药用价值，但药用资源有限，南蛇风为喙荚云实植物不同药用部位，其功效可能有相似之处，本实验研究了南蛇风的生药鉴别特征，为下一步南蛇风新药开发、质量标准的建立提供依据。