瑶药葫芦钻的质量标准研究

屈信成　罗小珍　覃兰芳　胡琦敏

【摘 要】 目的：建立和完善瑶药葫芦钻的质量标准。方法：依据2010年版《中国药典》附录相关方法，对葫芦钻药材进行性状、显微及薄层色谱鉴别，对水分、总灰分、浸出物进行检查。结果：确定了葫芦钻药材的性状、显微及薄层色谱的特征；水分拟订为不超过15.00%，总灰分限度≤ 15.0% ；浸出物含量不得少于6.0%。结论：研究结果可作为制定和完善葫芦钻药材质量标准的依据。

【关键词】 瑶药；葫芦钻；质量标准

【中图分类号】R29 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2017）03-0036-04

Study on the Quality Standards Of Pothos Chinensis

QU Xincheng1 LUO Xiaozhen1 QIN Lanfang1 HU Qimin2*

1.Guangxi Institute of Traditional Chinese Medicine，Nanning 530022，China2.Guangxi Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Quality Standards，Nanning 530022，China

Abstract：Objective To conduct the Quality Standards of Pothos chinensis.Methods Based on the 2010 edition of the China pharmacopoeia appendix relevant methods， for hoist the Pothos chinensis medicinal properties， microscopic and TLC identification， inspection on moisture， total ash， extract. Results confirmed the Pothos chinensis properties， microscopic and TLC characteristics； Moisture formulates for may not be over 15.00%. The total ash content limit of 15.0% or less； Extract content shall not be less than 6.0%. Conclusion The results can be used as to develop and perfect the basis of Pothos chinensis quality standard.

Keywords：Yao Medicine；Pothos Chinensis；Quality Standards

瑶药葫芦钻为天南星科植物石柑子Pothos chinensis（Raf.）Merr.的干燥全草。为瑶族常用药物之一，《中国瑶药学》、《广西本草选编》、《中药大辞典》和《中国现代瑶药》等均有记载[1-4]。葫芦钻俗名石柑子、石葫芦、巴岩香、青蒲芦茶、藤桔等，在广西大部分地区均有出产，台湾、湖北、广东、四川、贵州、云南等地也有分布。葫芦钻具有行气止痛、消积、祛风湿、散瘀解毒的功效。临床主要用于治疗心、胃气痛，疝气，小儿食积胀满，血吸虫晚期肝脾肿大，风湿痹痛，脚气，跌打损伤，骨折，中耳炎，耳疮，鼻窦炎等[5-6]。研究表明，葫芦钻中含有琥珀酸（succinic acid）和香草酸（vanillic acid） [7]；并可能含有苷类、生物碱、黄酮、蒽醌、香豆素、萜类内酯、甾体、三萜类、糖类、有机酸、氨基酸、蛋白质、挥发油和油脂等化合物[8]，其乙酸乙酯和正丁醇部位的提取物在体外对肿瘤细胞生长具有抑制作用[9]。原植物形态及生藥学研究在《中国植物志》等已有记载[10-11]，但葫芦钻在质量标准方面的研究报道不多，为了完善葫芦钻的质量标准故行此研究。

1 仪器与材料

1.1 材料 葫芦钻12个样品分别于2014年和2015年采于广西上思和马山等市县，经广西中医药研究院赖茂祥教授鉴定均为天南星科植物石柑子Pothos chinensis（Raf.）Merr.。实验中将所有12批样品（每批500g）进行粉碎处理，并统一过40目筛，备用。实验用硅胶G薄层板（批号：20121108，青岛海洋化工厂），实验用试剂均为分析纯。12批样品的详细信息见下表1。

1.2 仪器 ERMATOKY0416旋转式切片机（日本）；AK-400A摇摆式粉碎机（浙江）；Ni-U尼康高级生物显微镜及视频成像装置（日本）。

2 方法

依据2010年版《中国药典》附录的性状、显微、水分、总灰分、浸出物测定法及薄层色谱法进行实验。显微鉴别实验取部分药材茎和叶按石蜡切片法制作切片，取适量药材粉末按粉末制片法制作粉末片，切片在显微镜下观察并照相。

3 结果

3.1 性状鉴别 本品茎呈圆柱形，直径0.2～0.6cm，长可达1m；表面灰绿色，具细纵棱，多分枝，节明显，节上可见不定根，节间长1～3cm；质轻、硬，易折断，断面皮部纤维性。叶纸质，互生，卵状椭圆形或披针形，长5～10cm，宽1.5～3cm，先端渐尖，基部无毛；叶柄长l～6cm，具倒卵形的叶状翅。气微，味淡。见图1。

3.2 显微鉴别

3.2.1 叶横切面 上表皮细胞1列，类方形，外被角质层；下表皮细胞明显比上表皮细胞小，表皮细胞内易见草酸钙簇晶，直径15～30μm。叶肉组织分化明显，栅栏组织为2～3列类圆形细胞，通过主脉；海绵组织发达，为多层排列疏松的薄壁细胞。主脉维管束1个，周围散生数至10余个小维管束，维管束外韧型，维管束外有明显木化的厚壁组织包围。下表皮内侧有2～3列厚角组织。叶肉组织细胞内有草酸钙簇晶和方晶分布，直径11～36μm。见图2。

3.2.2 根状茎横切面 表皮细胞一列，排列紧密，外被角质层。皮层宽广，外侧有2～3列类圆形厚壁细胞，在角隅处更为明显；皮层内散有多数叶迹维管束，维管束鞘纤维成环；内皮层明显。中柱鞘纤维3～7列环状分布，木化；维管束周木型或有限外韧型，多数维管束可见一大型导管，维管束和维管束鞘纤维周围的细胞中有的含草酸钙簇晶和方晶，形成晶鞘纤维。见图3。

3.2.3 粉末 灰绿色。纤维淡黄色，分离或成束，先端钝尖或平截，直径16～31μm。叶上表皮细胞垂周壁较平直，叶下表皮细胞壁波状弯曲，气孔多为环式气孔，副位细胞4个；叶表皮细胞中有的含草酸钙簇晶，直径15～38μm，含晶细胞周围可见辐射状角质纹理；草酸钙方晶多散在或存在于薄壁细胞中，直径8～36μm；草酸钙簇晶少见，直径13～21μm。导管淡黄色，螺纹或具缘纹孔导管，直径19～43μm。非腺毛单细胞，直径32～56μm，长91～356μm。见图4。

3.3 薄层色谱鉴别 取本品粉末1g，加甲醇30mL，超声处理1h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；另取葫芦钻对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（8∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（365 nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。12批样品按本法检验，均符合规定，且薄层色谱分离效果好，斑点圆整清晰，比移值适中，重现性好。见图5。

耐用性实验考察：采用点状点样①对自制板、预制板（青岛海洋化工厂提供，批号：20121108）的展开效果进行考察；②对不同展开温度：8℃、32℃进行考察；③对不同湿度的点样环境：50%、90%进行考察；结果均表明本法的耐用性良好。

3.4 检查 在制定本品检查指标限度时，根据本品的特点，主要考察每种方法对所测本品的适用性，重点考察了水分、总灰分和浸出物三项指标，并根据多批样品的实测数据制定限度。

3.4.1 水分 照水分测定法（《中国药典》2010年版一部附录Ⅸ H 第一法）测定。共考察测定了12批葫芦钻药材样品的水分含量。

以上12批葫芦钻药材水分含量试验结果，最高水分含量为14.66%，最低水分含量为8.88%，因此，将本品水分拟定为不超过15.00%。

3.4.2 总灰分 照灰分测定法（《中国药典》2010年版一部附录Ⅸ K）测定，共考察测定了12批葫芦钻药材样品的总灰分含量。测定结果见表3。

由上表结果可知，12批样品的总灰分在15%以下，因此，将本品总灰分拟定为不超过15%。

3.4.3 浸出物 迄今，关于葫芦钻化学成分研究的报道极少，经查阅国内外文献[6，8，11]可知，葫芦钻含有有机酸（琥珀酸、香草酸等）、蒽醌、挥发油，另外可能含有苷类、生物碱、黄酮、香豆素、萜类内酯、甾体、三萜类、糖类、氨基酸、蛋白质和油脂等类化合物。若用水提取，提取液中的杂质较多，而且对极性较小的活性成分溶解性能不佳。而乙醇是最常用的有机溶剂，具有溶解性能好、穿透力强的特点，大多数天然活性成分都能在乙醇中溶解。因此，考虑用醇溶性浸出物来考察葫芦钻中所含活性成分的多少，而加热提取一方面有利于化学成分的溶出，另一方面又节省了实验时间，故确定采用热浸法来进行实验。曾对比两种不同浓度的乙醇（50%乙醇、95%乙醇）作为提取溶剂的提取效果，对比实验结果表明，50%乙醇的提取效果较95%乙醇的提取效果更优（以HLZ-6为供试品，前者浸出物含量为10.4%，后者浸出物含量为5.0%；另一方面，葫芦钻以全草入药，叶在其中占较大部分，用95%乙醇提取时，叶绿素等杂质较多），最终确定以50%乙醇为提取溶剂，照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录XA）测定，本品12批浸出物，实验结果见表4。

由上表结果可知，本品12批样品的浸出物最高含量为18.8%，最低含量6.3%，均在6.0%以上，因此，制定葫芦钻药材醇溶性浸出物含量时，照醇溶性浸出物测定法（《中国药典》2010年版一部附录 X A）项下的热浸法，本品浸出物含量不得少于6.0%。

4 结论

研究表明葫芦钻在性状、显微及薄层色谱方面有明显的特征，性状方面如茎具细纵棱，多分枝，节明显，节上可见不定根；质轻、硬，叶纸质，互生，叶柄长具倒卵形的叶状翅。显微鉴别方面叶横切面：上表皮细胞外被角质层；表皮细胞内易见草酸钙簇晶，栅栏组织通过主脉；主脉维管束1个，周围散生数至10余個小维管束，维管束外有明显木化的厚壁组织包围。叶肉组织细胞内有草酸钙簇晶和方晶分布，根状茎横切面：表皮细胞外被角质层。皮层宽广，外侧有2～3列厚壁细胞，在角隅处更为明显；皮层内散有叶迹维管束，维管束鞘纤维成环；内皮层明显。中柱维管束外韧型，多数维管束可见一大型导管，维管束和维管束鞘纤维周围的细胞中含草酸钙簇晶和方晶。粉末中叶上表皮细胞垂周壁较平直，叶下表皮细胞壁波状弯曲，气孔多为环式，副位细胞4个；叶表皮细胞中含草酸钙簇晶，含晶细胞周围可见辐射状角质纹理；草酸钙方晶多散在或存在于薄壁细胞中，草酸钙簇晶少见，非腺毛单细胞。薄层色谱方面葫芦钻供试品色谱与对照药材色谱在相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。将葫芦钻药材水分拟订为不得过15.00%，总灰分拟定为不得过15%，醇溶性（热浸法）浸出物含量不得少于6.0%。这些结果可作为制定和完善葫芦钻药材质量标准的依据。

参考文献

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（收稿日期：2016-11-18 编辑：穆丽华）