托吡司特原料中的溶剂残留测定

李 翔

药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。很多有机溶剂对人体都有一定的危害，因此，为保障人体用药安全，需要对残留溶剂进行研究和控制。托吡司特是一种非嘌呤类的黄嘌呤氧化酶抑制剂，可用于治疗抗高尿血酸症和痛风[1-2]。托吡司特的合成过程中使用的有机溶剂有甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和N，N-二甲基甲酰胺（N，N-dimethylformamide，DMF）。因此本文参照ICH指导原则[3]和《中国药典》2015版四部附录0861残留溶剂测定法[4]及相关文献[5-6]，建立了气相色谱法，可以简便快速检测托吡司特中上述8种残留溶剂的含量。

1 仪器与试药

1.1 仪器 岛津GC-2010气相色谱仪；AOC-Ⅱ自动进样器。

1.2 试药 甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和N，N-二甲基甲酰胺均为色谱纯。托吡司特样品，批号20190406、批号20190411、批号20190416，均为某公司产品。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 采用安捷伦DB-624毛细管色谱柱（30 m×0.32 mm×l.8 μm）；程序升温：初始温度40 ℃维持6 min，以20 ℃/min的速率升温至220 ℃并维持5 min；载气为氮气；FID检测器，温度：260 ℃；进样口温度：240 ℃；分流进样方式；分流比为10:1；柱流速：2.0 mL/min；顶空平衡温度：90 ℃，平衡时间：30 min；进样量：1 μL。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液的配制 取甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和N,N-二甲基甲酰胺（DMF）适量，精密称定，分别加二甲亚砜溶解并稀释制成每1 mL含甲醇120 μg、乙醇200 μg、异丙醇200 μg、二氯甲烷24 μg、2-丁醇200 μg、三乙胺12.8 μg、甲苯35.6 μg、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）35.2 μg的混合溶液，作为对照品储备液。选取上述对照品储备液加二甲亚砜稀释制成每1 mL含甲醇60 μg、乙醇100 μg、异丙醇100 μg、二氯甲烷12 μg、2-丁醇100 μg、三乙胺6.4 μg、甲苯17.8 μg、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）17.6 μg的混合溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的配制 取托吡司特约0.2 g，精密称定，置10 mL量瓶中，用二甲亚砜溶解并定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

3 结 果

3.1 专属性试验 取上述8种溶剂适量，分别置10 mL容量瓶中，加入二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为8种溶剂的定位溶液。将上述定位溶液、空白溶剂二甲亚砜和对照品溶液分别注入气相色谱仪，按上述色谱条件进样测定，记录色谱图（图1），结果出峰顺序依次为甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和DMF，对照品溶液中各组分间分离度良好，空白溶剂二甲亚砜对被检测溶剂出峰无干扰。

3.2 线性和范围 分别量取2.2.1项下对照品储备液适量置10 mL量瓶中，加二甲亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成系列浓度对照品溶液。注入气相色谱仪，记录色谱图，以浓度x（μg/mL）为横坐标，峰面积y为纵坐标，进行线性回归，回归方程见表1。结果显示8种溶剂在各自浓度的线性范围内，浓度与峰面积线性关系良好。

图1 8种残留溶剂的色谱图

表1 8种残留溶剂的标准曲线方程、线性范围、相关系数、检出限和定量限

3.3 检出限和定量限 取对照品溶液稀释进样，以信噪比S/N≈3:1计算各溶剂的检测限，以信噪比S/N≈10:1计算定量限，结果见表1。

3.4 进样精密度 取2.2项下对照品溶液连续进样6次，测定各溶剂峰面积，计算其RSD。甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和DMF峰面积的RSD值分别为0.8%、0.8%、1.0%、4.3%、1.1%、3.5%、0.6%和3.4%，结果显示进样精密度良好。

3.5 回收率 取托吡司特约0.2 g，精密称定，置10 mL量瓶中，精密加入三个不同的浓度（相当于限度的80%、100%、120%）混合对照品溶液，溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液，测定并计算各溶剂的回收率，测定结果见表2，数据显示各溶剂的平均回收率及RSD值均符合相关规定。

表2 8种残留溶剂的回收率

3.6 样品测定 取托吡司特（批号20190406、批号20190411、批号20190416）约0.2 g，精密称定，置10 mL量瓶中，加二甲亚砜振摇使溶解，摇匀，作为供试品溶液，记录色谱图见图2，按外标法以峰面积计算，结果见表3。由测定结果可知，本品三批样品中只检出来2-丁醇（限度值为0.5%），结果显示，3批原料中8种溶剂残留量均符合《中国药典》2015年版的相关规定。

表3 样品中残留溶剂的测定结果

图2 样品的气相色谱图

4 讨 论

考虑到测定的8种溶剂中DMF沸点较高，不适宜采用顶空进样法测定[7-8]，且直接进样法方法比较简单，仅需要使用自动进样器，不需要其他装置，本文选择采用直接进样法测定溶剂残留。

本方法测定的溶剂有8种，极性差异大，沸点差异大，以程序升温气相色谱法测定，各溶剂间分离良好；高沸点溶剂二甲亚砜出峰时间比各残留溶剂的出峰时间要长，不会干扰各残留溶剂的测定。尽管在中国药典附录0861中未收载，托吡司特合成过程中使用到三乙胺，仍然对其进行了研究。本方法各残留溶剂线性关系良好，精密度良好，回收率符合要求，快速准确，能够满足托吡司特原料中溶剂残留测定要求。