上海地区健康成人甲状腺自身抗体参考区间的建立*

吴玉梅,高永辉

华东疗养院检验科，江苏无锡 214065

抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)与抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)是自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者血清中常见的两种抗体，与AITD的发生、发展密切相关，也是AITD诊断与预后评估的重要指标[1]。研究表明，TGAb、TPOAb不仅在Graves病和桥本甲状腺炎中阳性率较高，还在健康人群中也有着较高阳性率[2]。国内目前关于TGAb、TPOAb生物水平参考区间建立的报道较少。本研究采用回顾性分析方法，按照中国合格评定国家认可委员会(CNAS)ISO15189相关准则,以及实验室医学联盟(IFCC)规定的参考标准[3],对来本院体检的1 394例健康成人的血清TGAb、TPOAb结果进行统计分析，以初步建立适合本院实验室的参考区间，为临床AITD的诊断提供可靠的依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1-12月在本院进行体检的健康成人1 394例，其中男779例，女615例；年龄22～75岁，平均(34.25±10.62)岁。研究对象在进行体检和实验室检查后，参照《中国甲状腺疾病诊治指南》[4]，按以下标准纳入本研究：无严重的心、肝、肾等重要脏器疾病史；无甲状腺疾病手术史、个人史和家族史；无甲状腺功能异常；甲状腺超声提示无结节及肿瘤，血清促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)和游离甲状腺素(FT4)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)检测结果均在正常范围。

1.2仪器与试剂 仪器为雅培I4000化学发光免疫分析仪；TGAb、TPOAb检测试剂盒、校准品均购自美国雅培公司；质控品为英国朗道公司生产的免疫复合质控品。

1.3方法 晨起空腹抽取研究对象静脉血3～4 mL，室温静置30 min,置于低温高速离心机以3 000 r/min离心10 min，分离血清后进行检测。每天质控通过后，按照仪器和试剂说明书的标准操作规程在4 h内对TGAb、TPOAb进行检测(化学发光免疫分析法)。

1.4参考区间验证 根据中华人民共和国卫生行业标准WS/T 402-2012《临床实验室检验项目参考区间的制定》[5]要求，对建立的参考区间进行验证。选取2020年4-6月于本院进行初次健康体检的149例表观健康者的血清标本，用同样的方法检测血清TGAb、TPOAb水平，将结果与本研究建立的参考区间(以P2.5～P97.5表示)进行比较，并计算R值(参考区间内的标本数/总标本数)，要求R>0.95。

1.5统计学处理 采用SPSS25.0统计软件对结果进行统计分析，将所有数据从小到大排列，以疑似离群点和其相邻点的差值(D)与数据全距(R)的比值>1/3为离群值。用Shapiro-Wilk检验对数据进行正态性检测，偏态分布资料以M(P25，P75)表示，两组间比较采用Mann-WhitneyU检验，多组间比较采用Kruskal-Wallis检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1甲状腺自身抗体的正态性检验 1 394例健康成人的血清甲状腺自身抗体结果经Shapiro-Wilk检验，男、女性均呈偏态分布。

2.2各年龄段男、女性血清TGAb、TPOAb水平比较 按≤30岁、>30～40岁、>40～50岁、>50～60岁、>60岁分别对男、女性进行分组，各年龄段男性分别为96、312、244、108、19例，女性分别为173、256、142、39、5例。男性与女性各年龄段血清TGAb、TPOAb水平比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，女性血清TGAb、TPOAb水平均高于男性，见表1。

表1 各年龄段男、女性血清TGAb、TPOAb水平比较[M(P25～P75),IU/mL]

2.3男、女性血清TGAb、TPOAb参考区间 男、女性各自5个年龄段内的血清TGAb、TPOAb水平比较，差异均无统计学意义(H=7.391、6.654、4.656、8.860，P>0.05)，因此，只需按性别建立参考区间。以95%CI(P2.5～P97.5)计算参考区间。健康成年男性的TGAb、TPOAb参考区间分别为0～6.09、0～3.68 IU/mL；健康成年女性的TGAb、TPOAb参考区间分别为0～10.59、0～14.33 IU/mL。

2.4参考区间的验证 纳入18～63岁男性80例、18～65岁女性69例。其中血清TGAb水平在参考区间的人数为145例，R值为0.97，血清TPOAb水平在参考区间的人数为143例，R值为0.96，均验证通过。

3 讨 论

桥本甲状腺炎和Graves病是临床上比较常见的甲状腺自身免疫性疾病，涉及多种自身抗体异常，其中促甲状腺素受体抗体(TRAb)、TGAb、TPOAb与其密切相关[6-7]。抗体水平的变化，可作为桥本甲状腺炎和Graves病的诊断及鉴别标准[8-9]。此外，有研究表明，甲状腺自身抗体水平的升高与分化型甲状腺癌的发生具有一定的相关性[10]。但有研究报道，无明显甲状腺疾病的健康人群中，TPOAb阳性率达4.35%[11]，因此TPOAb参考区间、TGAb和(或)TPOAb抗体阳性的界定对临床甲状腺疾病的诊断价值仍待讨论。

目前大部分实验室使用的参考区间来自厂家的试剂说明书，该参考区间通常是由厂家自己建立的，其选定的人群可能与实验室服务人群有一定差异[12]。因受地域、人群、种族不同的影响，参考区间也同样存在着差异。此外，国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)建议每个临床实验室都要建立符合本地人群特征的参考区间，或至少能够验证由其他途径获得的参考区间[13]。因此，各个实验室应根据本地人群特征建立适合自己的参考区间，这对临床精准诊断具有重要的意义[14]。

本研究采用灵敏度高、检测范围广的雅培I4000化学发光免疫分析仪对健康成人血清TGAb、TPOAb水平进行检测。结果发现，血清TGAb、TPOAb水平呈偏态分布，女性血清TGAb、TPOAb水平高于男性，差异有统计学意义(P<0.05)，这可能与雌激素水平的变化可刺激甲状腺细胞上的受体有关[15]。另外，男、女性各自5个年龄段内的血清TGAb、TPOAb水平差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究按照《临床实验室检验项目参考区间的制定》规则[5]，以95%CI(P2.5～P97.5)计算男女的参考区间。健康成年男性的TGAb、TPOAb参考区间分别为0～6.09、0～3.68 IU/mL；健康成年女性的TGAb、TPOAb参考区间分别为0～10.59、0～14.33 IU/mL。与试剂说明书提供的欧美人群的TGAb(0～4.11 IU/mL)、TPOAb(0～5.61 IU/mL)参考区间比较，除男性的TPOAb参考区间缩小外，其余参考区间均变大，因此，若继续沿用厂家的参考区间可能会造成过高的假阳性率。

综上所述，建立适合本实验室人群的血清TGAb、TPOAb参考区间，能够更好地为临床诊断提供可靠依据。但本研究仍有不足之处：研究对象主要是来本单位健康体检的人群，研究结果不能完全代表一般人群；入选者人数较少，可能会给结果带来偏倚。此外，国内同类研究结果较少，缺少与其他结果的比较。