系统性红斑狼疮患者血清PS-PLA1、DNase1L3和Lp-PLA2水平检测及临床意义*

张绍君,郭亚萍,李俊巧,陈 颖,刘 欣,宋文杰

保定市第一中心医院：1.风湿免疫科；2.西院检验科；3.西院康复医学二科，河北保定 071000

系统性红斑狼疮(SLE)是好发于育龄期女性的自身免疫性疾病，可累及全身多个器官，临床表现复杂，发病机制不尽相同，多数患者死于感染或并发的心血管疾病[1]。SLE目前尚无根治方法，探讨与SLE疾病相关的分子机制有助于指导临床治疗，改善患者预后。磷脂酰丝氨酸特异性磷脂酶A1(PS-PLA1)是一种特异性作用于磷脂酰丝氨酸并产生溶血磷脂酰丝氨酸的磷脂酶，被认为是一种参与免疫系统的溶血磷脂介质[2]。脱氧核糖核酸酶1 like 3 (DNase1L3)是一种能够消化染色质中脱氧核糖核酸的分泌型核酸酶，以短片段的形式存在于外周血，其表达缺失可能导致抗脱氧核糖核酸反应和自身免疫[3]。脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)是新型血管炎性反应标志物，与心脑血管疾病有关，近期研究发现Lp-PLA2在自身免疫性疾病中发挥重要作用[4]。本研究拟检测79例SLE患者血清PS-PLA1、DNase1L3、Lp-PLA2水平，分析其与疾病活动度、血脂指标和肾功能的关系，旨在探讨SLE的发病机制，为临床治疗提供一定参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 纳入标准：(1)经临床首次诊断为SLE，符合《系统性红斑狼疮诊断及治疗指南》[5]中相关诊断标准；(2)既往无SLE病史；(3)SLE 疾病活动度评分(SLEDAI评分)≥5分。排除标准：(1)合并自身免疫性肝炎、自身免疫性胃炎、风湿或类风湿等其他免疫性疾病；(2)急慢性感染、血液系统疾病；(3)多囊肾、高血压肾病、糖尿病肾病、肾癌；(4)合并糖尿病、代谢综合征。选择2018年1月至2020年4月本院风湿免疫科收治的79例SLE患者为SLE组；男11例，女68例；年龄22～48岁，平均(29.05±6.17)岁。另选择同期于本院进行体检的50例体检健康志愿者为对照组；男9例，女41例；年龄21～52岁，平均(30.71±6.02)岁。SLE组和对照组性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究获得本院伦理会批准，患者及其家属均知情同意并签署知情同意书。

1.2方法 所有受试者均采集空腹静脉血3 mL(SLE组入院当日采集，对照组于体检当日采集)，室温静置30 min血液凝固取上层液于离心管中，置于Microfuge 20低速自动平衡离心机(美国贝克曼库尔特公司)3 000 r/min离心15 min(离心半径10 cm)后取上清液上机检测，当日未能完成检测的标本-70 ℃保存于Snowsong DW-105W型超低温冰箱(上海兰嫩有限公司)，所有标本48 h内完成检测。酶联免疫吸附试验法检测血清PS-PLA1、DNase1L3、Lp-PLA2水平，所用仪器为Fluostar Omega全自动多功能酶标仪(德国BMG Labtech公司)，试剂盒购自上海酶联生物科技公司。采用罗氏(上海)Modular全自动生化分析仪检测血脂指标和肾功能指标，包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血清尿素(Urea)、血清肌酐(Scr)。

1.3SLE疾病活动度评价 SLE患者入院后收集临床和实验室资料，采用SLEDAI评分[6]，根据胸膜炎、黏膜溃疡、新发皮疹、脱发、脓尿、蛋白尿、血尿、管型尿、肌炎、关节炎、脉管炎、脑血管意外、发热、血小板降低、白细胞减少、视觉受损、颅神经损伤、狼疮性头痛共计18项内容评价SLE疾病活动度，0～4分表示基本无活动，5～9分表示轻度活动，10～14分表示中度活动，≥15分表示重度活动。根据SLEDAI评分结果将患者分为轻度组(21例)、中度组(32例)、重度组(26例)。

2 结 果

2.1SLE组和对照组PS-PLA1、DNase1L3、Lp-PLA2、血脂指标、肾功能指标比较 SLE组入院时血清PS-PLA1、Lp-PLA2水平高于对照组，DNase1L3水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);SLE组血清TC、TG、LDL-C、Urea、Scr水平高于对照组，HDL-C水平低于对照组，差异有统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 SLE组和对照组 PS-PLA1、DNase1L3、Lp-PLA2水平、血脂指标、肾功能指标水平比较

2.2不同疾病活动度SLE患者血清PS-PLA1、DNase1L3、Lp-PLA2水平比较 血清PS-PLA1、Lp-PLA2水平均随疾病活动度的增加而升高(P趋势检验<0.05)，轻度组、中度组、重度组整体比较，差异有统计学意义(P差异分析<0.05)；DNase1L3随疾病活动度的增加而降低(P趋势检验<0.05)，轻度组、中度组、重度组整体比较，差异有统计学意义(P差异分析<0.05)。见表2。

表2 不同疾病活动度SLE患者血清PS-PLA1、DNase1L3、Lp-PLA2水平比较

2.3相关性分析 Pearson相关分析显示，PS-PLA1与SLEDAI评分、TC呈正相关，与HDL-C呈负相关(P<0.05)，与其他指标无相关性(P>0.05)。Lp-PLA2与LDL-C、SLEDAI评分、Urea、Scr呈正相关，与HDL-C呈负相关(P<0.05)，与其他指标无相关性(P>0.05)。DNase1L3与SLEDAI评分呈负相关(P<0.05)，与其他指标无相关性(P>0.05)。见表3。

表3 血清PS-PLA1、DNase1L3、Lp-PLA2水平与疾病活动度、血脂指标和肾功能指标的相关性分析

3 讨 论

SLE是由环境、遗传等因素引起的以B淋巴细胞异常活化、自身抗体产生、免疫复合物沉积为主要病理特征的自身免疫性疾病[7]。随着疾病进展，SLE可累及多个脏器，尤其是肾脏，常威胁患者生命安全[8]。SLE患者血脂异常发生率在65.3%～84.6%，合并血脂异常SLE患者心血管疾病发病风险明显增加[1]，因此，探讨与SLE疾病活动度、血脂异常和肾功能损伤相关的生物学标志物有助于指导临床治疗和改善患者预后。

PS-PLA1是产生溶血磷脂酰丝氨酸的磷脂酶，属于第2代生物活性脂质介质，从细胞膜中释放的花生四烯酸衍生而来，通过细胞间信号转导参与人体各种生理反应，与细胞活化有关[9]。目前PS-PLA1在SLE中的发病机制尚不清楚，本研究结果显示，SLE组患者血清PS-PLA1水平明显升高，且随着疾病活动度增加而升高，说明PS-PLA1参与SLE发病和疾病活动过程，可为SLE疾病活动评估提供参考。相关性分析结果显示，PS-PLA1水平与SLEDAI评分、TC呈正相关，与HDL-C呈负相关，提示PS-PLA1在SLE疾病活动和血脂异常机制中可能发挥一定作用，但具体机制尚不清楚。动物研究显示，载脂蛋白A-I转基因小鼠PS-PLA1高度表达，PS-PLA1过表达导致载脂蛋白A-I水平增加88%，TC水平增加78%，PS-PLA1参与体内脂质分解、代谢及细胞胆固醇外排过程，PS-PLA1过表达通过抑制清道夫受体-BI介导的胆固醇外排过程，进而增加血脂水平[10]。

DNase1L3是脱氧核糖核酸酶Ⅰ家族成员之一，具有3-OH端脱氧核糖核酸片段，能编码分裂单链和双链DNA的蛋白质，在细胞凋亡和坏死过程中参与核内脱氧核糖核酸的碎片化。目前研究显示，DNase1L3基因功能缺失与SLE家族遗传有关，DNase1L3参与强直性脊柱炎、类风湿关节炎、多发性肌炎/皮肌炎等多种自身免疫性疾病发病过程[11-14]。本研究结果显示，SLE患者血清DNase1L3水平明显降低，且随着SLEDAI评分的升高而降低，DNase1L3水平与SLEDAI评分呈负相关，SUN等[14]报道显示，强直性脊柱炎患者血清DNase1L3水平呈升高状态，DNase1L3水平与疾病活动度、补体C3、C反应蛋白水平呈正相关，CARBONELLA等[12]研究显示，SLE、多发性肌炎/皮肌炎患者中血清DNase1L3水平明显降低，而类风湿关节炎患者血清DNase1L3水平保持不变，说明DNase1L3在不同自身免疫性疾病中可能存在不同的作用机制。本研究观察DNase1L3与血脂指标、肾功能之间均无明显相关性，说明DNase1L3可能并不参与SLE血脂异常和肾损伤过程。

Lp-PLA2是新型炎症标志物，由巨噬细胞和淋巴细胞合成，可诱导单核细胞聚集于血管内膜并形成巨噬细胞，巨噬细胞凋亡后形成泡沫细胞，参与动脉粥样硬化进程，Lp-PLA2 主要与血脂结合，其中80%的Lp-PLA2 与LDL 结合，其对于动脉粥样硬化的作用与其结合的脂蛋白类型有关[15-16]。Lp-PLA2在SLE的研究报道尚不多见，本研究发现SLE组血清Lp-PLA2水平高于对照组，Lp-PLA2水平随着疾病活动度增加而升高，说明疾病活动度高的SLE患者Lp-PLA2活性更高，Lp-PLA2可用来评估SLE活动度。本研究结果显示，Lp-PLA2与SLE患者血脂指标HDL-C、LDL-C均存在相关性，说明Lp-PLA2可能通过调节脂质代谢参与SLE发病过程，此外，本研究还发现Lp-PLA2与SLE患者Urea、Scr呈正相关，提示Lp-PLA2水平升高可能导致SLE肾损伤。近年来研究显示，肾脏功能受损时，单核细胞Lp-PLA2 mRNA表达上调，导致Lp-PLA2活性升高[17-18]。SLE患者血清PS-PLA1、Lp-PLA2水平升高，DNase1L3水平降低，PS-PLA1、Lp-PLA2、DNase1L3水平均与SLE疾病活动度有关，Lp-PLA2、PS-PLA1可能参与了SLE血脂异常过程，且PS-PLA1可能在SLE肾损伤进程中发挥一定作用。值得注意的是，本研究纳入的样本量较少，且表3中r最大为0.631，呈中强相关，其相关性有一定误差，后续可通过多中心调查、大样本量的研究提高数据准确性。