Hns 对紫贻贝和牡蛎的急性毒性试验

邵跃

（锦州市科学技术研究院，辽宁 锦州 121000）

海洋污损生物，是指粘附在船舶的底部、海里的浮标以及各类人工设施上的动物、植物、微生物的总称，其严重影响了人类正常的生产生活[1]。为了避免海洋污损生物，通常采用涂装防污涂料的方法[2]。Hns 是从植物中提取到的一种毒性物质。对于其机理和作用暂不清楚，现研究Hns 对海洋污损生物——紫贻贝和牡蛎的毒性效应，来确定Hns是否可作为新型低毒、高效的防污试剂而被广泛应用。

1 研究方法

1.1 试验用品

紫贻贝和牡蛎（大小均等，紫贻贝约7 cm，牡蛎约个体长度在8 cm）；Hns（粗提物，无臭，有淡淡的酒精味，易溶于水，有泡沫状物质产生，由大连大学提供，母液质量浓度为10.000 g/L）；砂滤后海水温度（20±1）℃，pH 值 为7.9～8.1，盐度30。

1.2 预试验方法

急性毒性试验在不投喂状态下，采用静态试验方法。通过预试验分别确定了紫贻贝和牡蛎的致死浓度范围，其中对紫贻贝的致死质量浓度为5～500 mg/L，对牡蛎的致死质量浓度为10～320 mg/L。

1.3 正式试验

按照之前准备试验确定的Hns 对牡蛎和紫贻贝的致死浓度范畴，依据等对数间距原则确定相应的浓度组和空白对照组，并设置各浓度组和空白对照组3 个平行。在对紫贻贝进行急性毒性试验中，Hns 的质量浓度设置为5，15，32，80，200 和500 mg/L；在对牡蛎进行急性毒性试验中，Hns 的质量浓度设置为10，20，40，80，160 和320 mg/L。箱中装满10 L 过滤海水，再放入10 个大小一致的紫贻贝或牡蛎，投入对应体积的母液，曝气，连续观察2 种生物对Hns 的中毒反应，并分别记录24，48，72 和96 h 药物作用下紫贻贝和牡蛎的死亡数。

手动刺激紫贻贝和牡蛎的外壳，如发现外壳无闭壳现象，可判断为死亡，并及时捞出。检查次数为每天1 次以上。

试验结束后，用概率单位法[3]计算出Hns 分别对紫贻贝和牡蛎24，48，72 和96 h 的半致死浓度（LC50），并作X2回归检验，求出24，48，72 和96 h半致死浓度的95%置信区间，以及在药物作用下紫贻贝和牡蛎的安全浓度[4]。

式中：h——小时；

LC50——半致死浓度，mg/L。

2 结果与讨论

2.1 结果

紫贻贝和牡蛎接触Hns 溶液时，每个浓度的3个平行组间的毒性无差异统计学意义（P＞0.05），各浓度组在各个时间段的死亡百分率见表1 和表2。由表1 和表2 可见，紫贻贝和牡蛎的死亡百分率随着浓度和暴露时间的的增加而增加。

根据紫贻贝和牡蛎在24，48，72 和96 h 的病死率，采用概率单位法求出Hns 对紫贻贝和牡蛎在24，48，72 和96 h 的半致死浓度（LC50）以及半致死浓度的95%置信区间和对紫贻贝的安全浓度（表3）。通过表3 数据可以看出，牡蛎对Hns 的抗药性要比紫贻贝大，前者大约是后者的8 倍。

表1 紫贻贝暴露于Hns 溶液中的死亡比例

表2 牡蛎暴露于Hns 溶液中的死亡比例

表3 Hns 对紫贻贝和牡蛎急性毒性计算结果 mg/L

2.2 讨论

急性毒性试验是指在接受大剂量某种药物后发生的迅速而严重的毒性反应，它能提供关于药物对人体毒性影响的初步数据。半致死浓度（LC50）是评价药物毒性大小的重要指标，其数值越大，就说明该药物越安全[5]。

由表1 和表2 可见，紫贻贝和牡蛎的死亡百分率随着Hns 浓度的增加及暴露时间的增加而升高，这与贾晓平等[6]探究的翡翠贻贝接触石油类物质的试验结果一致。

由表3 可见，Hns 对紫贻贝和牡蛎这2 种生物的半致死浓度差异很大，可见这两种的抗药性具有显著性差异：牡蛎的抗药性比紫贻贝的抗药性要大，前者大约是后者的8 倍。根据我国农药毒性的划分等级：ρ（48 hLC50）＜1 mg/L 为高毒性，ρ（48 hLC50）=1～10 mg/L 为中毒性，ρ（48 hLC50）＞10 mg/L 为低毒性[5]，可得出结论：Hns 对紫贻贝和牡蛎均属于中毒性药物。与贾晓平等[6]调研得出翡翠贻贝接触0 号柴油后的96 h 半致死浓度为1.41 mg/L，南海原油对翡翠贻贝的96 h 半致死浓度为4.17 mg/L 的结论相比，紫贻贝和牡蛎对Hns 的敏感性要低于0号柴油而高于南海原油，这说明Hns 对紫贻贝和牡蛎等污损生物产生毒害作用要比南海原油大，而比0号柴油小。假设将Hns 应用于防污涂料中，虽然对污损生物有一定的防污作用，但仍会对其他海洋生物造成一定的毒性作用，影响海洋的生态系统平衡。总之，Hns 还没有达到低毒高效的最佳防污试剂的要求。