微晶纤维素在硫酸氢氯吡格雷片中的应用研究

2021-05-06芦彩萍何红燕黄旺霍立茹吴小涛赵卿徐州医科大学江苏徐州000南京济群医药科技股份有限公司南京00

中南药学 2021年4期

芦彩萍，何红燕，黄旺，霍立茹，吴小涛，赵卿*（.徐州医科大学，江苏徐州 000；.南京济群医药科技股份有限公司，南京 00）

硫酸氢氯吡格雷作为血小板抑制剂是预防和治疗血栓性疾病的主要药物。其片剂因主药含量大，可压性及流动性不佳而较难制剂化，故需选用适宜的辅料进行制备[1-3]。微晶纤维素（microcrystalline cellulose，MCC）常作为片剂的填充剂、崩解剂、黏合剂等，具有抗结块、改善流动性及提高药物稳定性等作用。不同型号的MCC 具有不同特性，能够从结合性、崩解性及硬度等多方面影响片剂的质量[4-6]，而且在硫酸氢氯吡格雷片的处方组成中MCC 占比较大，因此MCC 的筛选尤为重要。本试验通过对比不同厂家、不同型号MCC 的主要功能性指标，分别制备处方研究其对硫酸氢氯吡格雷片制备过程中物料流动性、可压性及包衣片的溶出曲线、有关物质的影响，筛选出合适的MCC 作为硫酸氢氯吡格雷片的组成成分并进一步用于放大生产。

1 材料

1.1 仪器

AL104 型电子天平（METTLER TOLEDO）、6S-OCE-DM 微量电子天平（Sartorius）、U3000高效液相色谱仪（DIONEX），BM2000 显微镜（江南永新光学仪器有限公司），GL2-35 干法制粒机（张家港市开创机械制造有限公司），ZPS-8压片机（上海信源制药机械有限），S250SMART高速压片机（山东新马制药装备有限公司），三维混合机（南京锐霸科技有限公司），YD-35 硬度仪（天津市鑫洲科技有限公司），MB-35 水分测定仪（奥豪斯仪器有限公司），HELOS/BR-RODOS/T4 激光粒度测定仪（Sympatec），UV-2600 紫外分光光度计（日本岛津），FADT-1202 自动取样溶出仪（Focs），高效包衣机（深圳信宜特科技有限公司），药品强光照射试验箱（重庆永生实验仪器厂），恒温恒湿箱（施都凯仪器设备有限公司）。

1.2 试药

硫酸氢氯吡格雷片（Sanofi Pharmaceutical Co.，Ltd.，批号：7A497，规格：75 mg/片）；硫酸氢氯吡格雷片（南京济群医药科技股份有限公司，规格：75 mg/片，批号分别为200221、200227、200316、200331、200410-1、200410-2）；硫酸氢氯吡格雷（批号：100819-201605，纯度：99.9%）、氯吡格雷杂质Ⅰ（批号：510043-201502，纯度：100%）、氯吡格雷杂质Ⅱ（批号：510044-201502，纯度：100%）（中国食品药品检定研究院）；氯吡格雷杂质Ⅲ（QCC·USA，批号：12-JUL-17-03）；MCC SMCC50（JRS）；MCC KG802（旭化成株式会社）；MCC SH112（安徽山河药用辅料股份有限公司）；MCC PH101（旭化成株式会社）；薄膜包衣预混剂（上海卡乐康包衣技术有限公司）。

2 方法与结果

2.1 MCC 功能性指标的测定

结合原料流动性及可压性较差的性质并查阅相关产品介绍，选择4 种具有代表性MCC 的型号（SMCC50、KG802、SH112 及PH101）进行考察，通过其相关指标特性筛选出确定作为硫酸氢氯吡格雷片组成成分的可行性，MCC 的晶形图见图1。

图1 MCC 晶形图（100×）Fig 1 Crystal form of microcrystalline cellulose（100×）

2.1.1 粒子形态的测定使用生物显微镜观察各MCC 的粒子形态。其中KG802 类似细条状，SMCC50 及SH112 为不规则块状，PH101 类似颗粒球状。

2.1.2 粒径分布的测定使用激光粒径仪干法进样测定MCC 的粒径分布，分散压力为4 bar，进样速率70%，使用RAOXO 2.0 软件对MCC 的粒度分布进行分析，结果见图2。测量结果为SMCC50、KG802、SH112、PH101粒径X90分别为255.46、135.47、212.31、143.57 μm。

图2 MCC 粒度分布图Fig 2 Particle size of microcrystalline cellulose

2.1.3 流动性的测定测定MCC 的休止角以考察其流动性，具体方法为将漏斗固定于水平铁架台上，从漏斗中缓慢加入物料至物料圆锥体高度不再增加，量取物料垂直高度及圆锥体半径，以物料垂直高度及圆锥半径比为正切值计算休止角[7]，每批样品测量3 次取平均值，结果见表1。

2.1.4 堆密度、振实密度及压缩性指数参照2020年版《中国药典》（ChP2020）四部通则0993堆密度与振实密度测定法[8]，测定不同MCC 的堆密度及振实密度，根据公式压缩性指数＝100×（堆密度－振实密度）/堆密度，计算压缩性指数，每个样品测量3 次取平均值，结果见表1。

表1 MCC 功能性指标测定结果Tab 1 Microcrystalline cellulose functional indicators

2.1.5 水分的测定使用红外水分测定仪分别测定各样品水分，每份样品测量量约为3 g，测量温度为105℃，测量时间为5 min，每个样品测量3 次取平均值，结果见表1。

以上测定结果表明：不同型号的MCC 的各项指标均存在一定差异，将其作为硫酸氢氯吡格雷片组成成分，分别制备成制剂后进一步确定其影响片剂的关键指标及选择最终的型号。

2.2 制剂相关指标的测定

分别用型号为SMCC50、KG802、SH112、PH101 的MCC 与原料、乳糖、聚乙二醇、低取代羟丙纤维素过筛后称重混合，混合后物料进行干法制粒，样品批号对应为200221、200227、200316、200331，4 批样品其他辅料种类、用量以及制备工艺均不变。

2.2.1 混粉相关指标的测定

① 休止角的测定：取4 批样品混粉参照“2.1.3”项下方法测定休止角，每批样品测量3 次取平均值，结果见表2。

② 压缩性指数的测定：取4 批样品混粉参照“2.1.4”项下方法测定压缩性指数，每批样品测量3 次取平均值，结果见表2。

③ 颗粒率的测定：参照ChP2020 四部通则0982 单筛分法[8]测定4 批样品预混粉60 目以上的颗粒率，每批样品测量3 次取平均值，结果见表2。

④ 水分的测定：取4 批样品混粉参照“2.1.5”项下方法测定水分，每批样品测量3 次取平均值，结果见表2。

表2 混粉相关指标测定结果Tab 2 Mixed powder related indicators

结果表明使用KG802 型号的MCC 所制备的混粉休止角明显大于40°，流动性较差，需关注其片剂含量均匀度是否符合要求。

2.2.2 片芯相关指标的测定将4 批样品在同一压片环境及设备条件下分别压片后进行片剂相关指标的考察。

① 外观及黏冲：在压片过程中观察各批样品的外观性状及压片过程是否存在黏冲现象。4 批样品在实验室压片数量为500 片左右时均未出现黏冲现象，片剂表面光滑。继续进一步放大批量并使用工厂设备压制片剂，考察压片是否黏冲，以确定处方工艺的可行性，结果见表3。

② 硬度的测定：每批样品在连续压片过程中随机取样20 片使用MB-35 硬度仪测量片芯硬度，结果见表3。

③ 含量均匀度的测定：参照ChP2020 四部通则含量均匀度检查法[8]，每批样品取10 片片芯检测样品的含量均匀度，结果见表3。

④ 水分的测定：取4 批样品片芯各10 片放置于同一压片环境下相同时间后分别研磨，参照“2.1.5”项下方法测定水分，测量3 次取平均值，结果见表3。

表3 片芯相关指标测定结果Tab 3 Related indicators of tablets

结果表明MCC（SH112）、MCC（PH101）所制备的样品可压性较好。MCC（SMCC50）、MCC（KG802）在放大生产时压片出现黏冲现象，分析可能是这两个型号的MCC 自身水分较高，且在处方中占比较大导致物料水分较高，使原料在水分较高情况下产生黏性导致压片黏冲，且MCC（KG802）流动性较差，所制备的混粉流动性较差，导致片剂含量均匀度不合格。

2.2.3 溶出曲线的测定

① 溶出试验条件：溶出方法为桨法，分别以水、pH 1.2 盐酸溶液、pH 4.0 醋酸盐缓冲液、pH 6.8 磷酸盐缓冲液为溶出介质，转速分别为50、50、75、50 r·min－1，溶出介质体积均为900 mL，溶出介质温度均为（37±0.5）℃[9]。

② 溶液的配制：精密称取硫酸氢氯吡格雷对照品约8.5 mg 至250 mL 量瓶中，加入少量溶出介质超声溶解并定容得对照品溶液。分别于各取样时间点取出溶液10 mL，并补充同等温度的溶出介质10 mL，将所取样品溶液过滤，取续滤液3 mL 用介质稀释定容至10 mL 作为供试品溶液。

③ 溶出曲线的测定：将200316 及200331 批片芯均使用同一批薄膜包衣预混剂进行包衣，测定2 批样品包衣片及参比制剂（各12 片）在4 种介质中的溶出曲线，具体方法为取各样品对照品及供试品溶液，参照ChP2020 四部通则0401 紫外-可见分光光度法[8]在240 nm 处测量吸光度，按外标法计算溶出量，绘制溶出曲线，计算相似因子f2[10-11]。

④ 溶出曲线测定结果：结果表明2 批自制样品在pH 1.2、pH 4.0、pH 6.8 介质中的溶出曲线均与参比制剂相似，在水介质中200331 批样品溶出曲线与参比制剂相似，f2为68，200316 批样品溶出速率慢于参比制剂，f2为37，故接下来对200331 批样品进行影响因素试验，考察初步稳定性。溶出曲线见图3。

图3 参比制剂与2 批自制样品在4 种介质中的溶出曲线Fig 3 Dissolution curve of the reference preparation and 2 batches of self-made samples in 4 media

2.2.4 有关物质的测定

① 色谱条件：色谱柱为ULTRONES-OVM（150 mm×4.6 mm，5 μm）；柱温为25℃；流速为1.0 mL·min－1；进样量为10 μL；检测波长为220 nm；流动相为0.1 mol·L－1磷酸二氢钾-乙腈（75∶25，V/V）。

② 溶液的制备：取包衣片研磨后细粉250 mg，精密称定，置200 mL 量瓶中，加甲醇5 mL，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。取硫酸氢氯吡格雷对照品及氯吡格雷杂质Ⅱ对照品，精密称定，加甲醇溶解，用流动相稀释成每1 mL 含硫酸氢氯吡格雷2.5 μg 及杂质Ⅱ 5 μg 的系统溶液。取硫酸氢氯吡格雷对照品、氯吡格雷杂质Ⅰ、Ⅲ对照品，精密称定，置于同一量瓶中，加甲醇溶解用流动相稀释成每1 mL含硫酸氢氯吡格雷1 μg、氯吡格雷杂质Ⅰ 2 μg、氯吡格雷杂质Ⅲ 4 μg 的对照品溶液。

③ 测定方法：参照ChP2020 版二部硫酸氢氯吡格雷片有关物质检测方法。

④ 测定结果：取200331 批自制样品及参比制剂进行影响因素试验，将各样品分别放置于高温（60℃）、高湿（RH 92.5%）以及光照[（4500±500）Lx]条件下于5、10、30 d 取样检测有关物质。结果表明自制样品各杂质含量均不高于参比制剂，且杂质增长趋势与参比制剂基本一致，结果见表4。

表4 有关物质测定结果Tab 4 Related substances

2.3 不同批次MCC（PH101）主要功能性指标一致性考察

选用2 批不同批号（批号：1945、1854）MCC（PH101）参照“2.1”及“ 2.2”项下方法测定主要功能性指标并制备样品（批号分别为200410-1、200410-2）进行研究，以考察不同批次辅料功能是否具有一致性，并确定不同批次辅料制备的样品质量是否一致。结果表明，不同批次的MCC（PH101）主要功能性指标检测结果及制剂相关检测结果均无明显差异，表明该辅料无明显批间差异，制备的样品质量基本一致（见表5～7及图4）。