血清晚期糖基化终末产物肽水平在维吾尔族人群2型糖尿病早期筛查中的应用价值研究

吉米兰木·麦麦提明，木尼拉·阿不都乃依木，王新玲，阿不来提·艾则孜，热孜万古丽·乌斯曼，马艳荣，张凯迪

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）发病早期多隐匿，且诊断常延迟4～7年，因此尽早确诊并采取积极有效的治疗方案对患者病情的控制具有十分重要的意义。《中国2型糖尿病防治指南（2017年版）》中将毛细血管血糖监测作为血糖检验的首选方法［1］。而许多研究发现，单纯选择空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）进行糖尿病筛查存在一定的漏诊风险［2-4］。糖耐量试验（oral glucose tolerance test，OGTT）也是临床最常见的糖尿病检测方法，但与毛细血管血糖检测相似，均需要禁食以减少影响研究的各种因素。因此，需要一种能够为糖尿病诊断提供支持的较为简单、快速且稳定的血清学指标。

晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products，AGE）与糖尿病血管系统的并发症存在一定的相关性，可以作为血管并发症预测及病情评价的重要参考指标［5］。AGE直接测定在临床的难度较高，而晚期糖基化终末产物肽（AGE-P）是AGE在蛋白酶降解后结合特殊蛋白或靶组织细胞后的产物，具有检测流程简单、结果稳定可靠的优点。本研究通过分析AGE-P在维吾尔族2型糖尿病筛查中的作用，探讨其是否可以作为维吾尔族人群糖尿病筛查的关键指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年2月—2019年12月于新疆维吾尔自治区人民医院行健康体检的受检者1 100例。糖尿病诊断标准参考《中国2型糖尿病防治指南（2017年版）》［1］中的相关标准。纳入标准为：（1）年龄18～82岁；（2）维吾尔族；（3）入组前未进行OGTT［1］；（4）未使用血糖控制类药物；（5）无急性感染性疾病。排除标准：（1）存在自身免疫性疾病；（2）合并血液系统、心脑血管系统疾病；（3）合并甲状腺疾病，肝、肾功能性障碍；（4）合并原发性结缔组织疾病；（5）合并代谢系统疾病；（6）合并神经系统疾病。以OGTT结果为诊断T2DM的金标准。依据OGTT结果将受试者分为糖尿病组（n=75）和正常糖耐量组（n=1 025）。

1.2 方法 记录所有受检者的年龄、身高、体质量、腰围、舒张压（DBP）、收缩压（SBP）等一般指标，计算体质指数（BMI）。采集所有受检者的外周空腹静脉血，采用葡萄糖氧化酶法测定FPG、餐后2 h血糖（2 hPG），电化学分析法检测糖化血红蛋白（HbA1c），氧化酶法检测总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG），化学发光免疫成像法检测高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），全自动分析法检测尿素氮、尿酸、血肌酐。

采集受检者清晨空腹外周静脉血3 ml，在2 500 r/min（离心半径为15 cm）的速度下离心5 min后静置，取上部血清保存待测。将20 μl血清加入480 μl的三氯乙酸（TCA）的离心管，之后加入三氯甲烷100 μl，萃取脂质至有机相，以2 500 r/min（离心半径为15 cm）离心10 min后，抽取20 μl水层，以高效液相色谱法测定AGE-P，流速设置为0.5 ml/min，荧光检测系统的激发波长设定为370 nm，发射波长设定为440 nm。每份样本均测量3次，以最高峰值为结果进行记录，通过标准曲线法进行定量。所有标准品进行标准工作曲线绘图，以拟合方程完成绝对值的计算。

1.3 统计学方法 采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析。符合正态分布的计量资料以（±s）表示，两组间比较采用成组t检验；绘制实验室检查指标诊断维吾尔族人群发生T2DM的受试者工作特征曲线（ROC曲线），并计算约登指数、灵敏度、特异度、ROC曲线下面积（AUC）。双侧检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 两组一般指标比较 糖尿病组年龄、BMI、腰围、DBP、SBP均高于正常糖耐量组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表1）。

表1 两组一般指标比较（±s）Table 1 Comparison of general indicators between tow groups

表1 两组一般指标比较（±s）Table 1 Comparison of general indicators between tow groups

注：1 mm Hg=0.133 kPa；BMI=体 质 指 数，DBP=舒 张 压，SBP=收缩压

SBP（mm Hg）糖尿病组 75 53.2±12.6 29.6±3.6 101.2±10.3 84±11 135±14正常糖耐量组 1 025 40.0±13.1 25.3±4.0 88.2±10.4 75±11 118±15 t值 8.487 8.874 10.457 6.629 9.014 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001组别 例数 年龄（岁）BMI（kg/m2）腰围（cm）DBP（mm Hg）

2.2 两组实验室检查指标比较 糖尿病组血清FPG、2 hPG、HbA1c、TC、TG、LDL-C水平高于正常糖耐量组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组血清AGE-P、HDL-C水平及尿素氮、尿酸、血肌酐水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05，见表2）。

表2 两组实验室检查指标比较（±s）Table 2 Comparison of laboratory indicators between tow groups

表2 两组实验室检查指标比较（±s）Table 2 Comparison of laboratory indicators between tow groups

注：FPG=空腹血糖，2 hPG=餐后2 h血糖，HbA1c=糖化血红蛋白，AGE-P=晚期糖基化终末产物肽，TC=总胆固醇，TG=三酰甘油，HDL-C=高密度脂蛋白胆固醇，LDL-C=低密度脂蛋白胆固醇

血肌酐（μmol/L）糖尿病组 75 9.06±2.94 14.23±5.15 7.33±1.84 24.31±6.02 5.13±1.16 3.14±2.79 1.27±0.35 3.01±0.74 5.76±1.18 346.1±88.2 83.3±21.9正常糖耐量组 1 025 4.99±0.50 5.13±1.19 5.18±0.38 24.84±9.06 4.36±0.82 1.46±0.52 1.31±0.34 2.52±0.64 5.83±1.37 333.0±84.2 79.3±14.7 t值 37.673 43.151 29.838 0.499 7.606 15.935 0.982 6.329 0.431 1.304 0.160 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 0.618 ＜0.001 ＜0.001 0.327 ＜0.001 0.667 0.193 0.109组别 例数 FPG（mmol/L）2 hPG（mmol/L）HbA1c（%）AGE-P（U/ml）TC（mmol/L）TG（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）尿素氮（mmol/L）尿酸（μmol/L）

2.3 血清 FPG、2 hPG、HbA1c、AGE-P筛查维吾尔族人群发生T2DM的价值 绘制血清FPG、2 hPG、HbA1c、AGE-P筛查维吾尔族人群发生T2DM的ROC曲线（见图1），结果显示，血清FPG筛查维吾尔族人群发生T2DM的约登指数为0.854，灵敏度为88.0%，特异度为 97.4%，AUC 为 0.957〔95%CI（0.943，0.968），Z=25.718，P＜0.001〕；血清AGE-P水平筛查维吾尔族人群发生T2DM的约登指数为0.055，灵敏度为74.7%，特异度为19.8%，AUC为0.507〔95%CI（0.477，0.537），Z=0.203，P=0.839〕（见表3）。

图1 血清FPG、2 hPG、HbA1c、AGE-P筛查维吾尔族人群发生T2DM的ROC曲线Figure 1 The ROC curve of serum FPG，2 hPG，HbA1c and AGE-P levels in screening for T2DM in Uygur population

表3 血清FPG、2 hPG、HbA1c、AGE-P筛查维吾尔族人群发生T2DM的价值Table 3 The value of serum FPG，2 hPG，HbA1c and AGE-P levels in screening for T2DM in Uygur population

3 讨论

T2DM早期患者的尿糖、血糖、HbA1c等均存在一定问题［6］，其中尿糖容易受到多种因素的干扰而存在灵敏度不高的问题，因此不推荐作为筛查T2DM使用［7］。血糖则是确定耐糖量是否存在异常的关键性指标，其灵敏度和特异度均较高，能满足临床筛查T2DM的要求。美国糖尿病协会推荐FPG作为糖尿病诊断的金标准，而世界卫生组织则以OGTT为关键指标减少糖尿病漏诊情况的发生［8］。在当前主流观点中，早期AGE特别是HbA1c是糖尿病8～12周血糖控制的核心指标［9］。而红细胞在机体内的平均存活时间为120 d，所以HbA1c能够反映机体2～3个月的糖代谢情况，因此，有观点认为AGE可准确反映血糖的长期控制效果。AGE-P作为AGE降解产物在临床中更易获得，其对T2DM的筛查作用有待研究。

本研究结果显示，维吾尔族人群中糖尿病患者的年龄、BMI、腰围、DBP、SBP及血清FPG、2 hPG、HbA1c、TC、TG、LDL-C水平明显高于正常人群，表明年龄、BMI、腰围、DBP、SBP及血清FPG、2 hPG、HbA1c、TC、TG、LDL-C水平的升高均可以作为糖尿病风险升高的依据。本研究结果显示，糖尿病人群血清AGE-P水平与正常糖耐量人群不存在差异，该结果与多数研究结果存在明显差异［10-12］。有研究显示，机体AGE水平可能与糖尿病前期不存在明显的相关性；且许娟等［13］通过皮肤AGE无创检测得出了相近的结论。血清AGE-P是AGE降解的终末产物，其在机体中的水平与糖基化以及肾脏清除功能有明显的关系，因此其检测方法也是影响检测结果的主要因素，在流动注射分析方法中光波波长的相关物质也可能对荧光检测结果有影响，而本研究结果与其他研究不同的原因可能与以上因素有一定的关系；同时，本研究人群均为维吾尔族人群，可能存在地域及其他因素的影响。本研究结果显示，血清FPG筛查维吾尔族人群发生T2DM的约登指数为0.854，灵敏度为88.0%，特异度97.4%，AUC为 0.957〔95%CI（0.943，0.968）〕； 血 清 AGE-P筛查维吾尔族人群发生T2DM的约登指数为0.055，灵敏度为74.7%，特异度为19.8%，AUC为0.507〔95%CI（0.477，0.537）〕；且血清AGE-P筛查维吾尔族人群发生T2DM的AUC小于血清FPG、2 hPG、HbA1c；表明血清AGE-P筛查糖尿病的灵敏度较高而特异度较低，可能存在较高的误诊风险，不建议作为维吾尔族T2DM筛查的关键指标。血清AGE水平的升高是由长期高血糖状态引发的，而在糖尿病早期筛查中多数患者发病时间较短，因此体内AGE累积不明显。AGE可通过食物摄入［14］，在饮食结构中糖摄入较多也可能导致血清AGE-P检测结果偏高，而弱化正常人群与糖耐量异常人群的检测结果差异。

综上所述，血清AGE-P水平在T2DM患者中并未表现出明显的升高，且其筛查T2DM的特异度、约登指数均较低，因此不建议作为维吾尔族T2DM高危人群筛查的指标。本研究未对AGE-P与血糖相关机制进行研究，需要在后期研究中不断完善，明确AGE-P的作用机制。

作者贡献：吉米兰木·麦麦提明进行研究的构思与设计、资料收集与整理、结果分析与解释，负责撰写论文及英文的修改；吉米兰木·麦麦提明、木尼拉·阿不都乃依木、王新玲、阿不来提·艾则孜、热孜万古丽·乌斯曼进行研究可行性分析，资料收集与整理，研究实施；吉米兰木·麦麦提明、木尼拉·阿不都乃依木、阿不来提·艾则孜、热孜万古丽·乌斯曼、马艳荣、张凯迪进行数据整理；吉米兰木·麦麦提明、阿不来提·艾则孜负责文章的质量控制及审校，对文章整体负责、监督管理。

本文无利益冲突。