72例孕早期NT增厚胎儿的染色体核型及妊娠结局分析

赖玉青，邓国生

颈部透明层(nuchal translucency,NT)是早孕期胎儿颈后皮肤下液体积聚，超声征象表现为颈后无回声区[1]。目前关于NT增厚的截断值仍存在争议，临床上一般将NT≥2.5 mm或NT≥3.0 mm视为NT增厚[2]。早孕期胎儿NT增厚与染色体异常、结构异常密切相关。目前，染色体核型分析是诊断染色体疾病的金标准。本研究通过分析72例NT增厚胎儿的核型，探讨NT增厚与胎儿的染色体异常风险及妊娠结局情况的关联性，现报告如下。

1 对象与方法

1.1研究对象 选择2019-01～2020-04在我院优生遗传科就诊的NT增厚(NT≥2.5 mm)胎儿72例，均于妊娠早期经超声检查确诊，并行绒毛染色体核型检测。孕妇年龄21～40岁，孕周11～13+6周。其中单纯性NT增厚54例，NT增厚且合并其他超声特征异常(包括颈部水囊瘤、鼻骨未显示、淋巴水囊瘤、腹部液性暗区、脐膨出、心脏结构异常、全身皮肤水肿、脐带根部稍强回声团、静脉导管血流异常、颈部无回声区、胎儿A波倒置、露脑畸形等)18例。本研究获我院医学伦理委员会批准(批号YX20200306-3)，所有研究对象签署知情同意书。

1.2研究方法

1.2.1 绒毛染色体核型分析 在超声引导下经腹穿刺绒毛10～20 mg，用0.9%无菌NaCl溶液清洗干净后在日本奥林巴斯SZ61双目体视显微镜下挑选出绒毛组织，经手术刀片剁碎，0.25%胰酶消化，并接种于3 ml羊水细胞培养基(广州白云山)的培养瓶中，置37 ℃，5%CO2条件培养(美国Thermo Forma 3111 CO2培养箱)。后经传代、收获细胞和制片，将制好的片分AB线各1～2张，采用德国蔡司AXIO Imager.Z2全自动扫描仪进行扫描，应用Metasystem分析软件进行分析。常规计数20个细胞，分析5个细胞的核型。

1.2.2 超声测量NT及分组方法 采用日本东芝TOSHIBA APLIO400彩色多普勒彩超诊断仪、PVT-674BT10C3经腹部探头频率3～10 MHz进行测量，测量时胎儿头臀长为45～84 mm，相当于11～13+6孕周。NT测量在正中矢状切面上进行，此切面亦是测量头臀长的标准切面。应尽可能放大图像至只显示胎儿头颈部及上胸部，使测量游标的轻微移动只改变测量结果的0.1 mm。并根据NT的增厚情况将研究对象分为2.5 mm≤NT<3.5 mm组(30例)、3.5 mm≤NT<4.5 mm组(25例)和NT≥4.5 mm组(17例)。

1.3随访 随访通过电话方式进行，随访内容：(1)绒毛膜穿刺术后7 d胎儿丢失情况；(2)妊娠结局,包括终止妊娠、继续妊娠情况；(3)分娩时间、方式及分娩孕周；(4)新生儿性别及出生体重；(5)新生儿出生后外观有无畸形及其一般生长发育情况。

1.4统计学方法 应用SPSS16.0统计软件进行数据分析，计数资料以例数(百分率)[n(%)]表示，组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1染色体核型情况 在72例NT增厚胎儿中，检出染色体异常22例(30.56%)。其中21三体8例(11.11%)，18三体5例(6.94%)，45,X 4例(5.56%)，13三体2例(2.78%)，47,XYY 1例(1.39%)，平衡易位1例(1.39%)，嵌合体1例(1.39%)。

2.2三组染色体核型异常率比较 检测结果显示，2.5 mm≤NT<3.5 mm组、3.5 mm≤NT<4.5 mm组和NT≥4.5 mm组的染色体核型异常率分别为16.67%(5/30)、24.00%(6/25)和64.71%(11/17)，三组比较差异有统计学意义(χ2=12.577,P=0.002)。其中，NT≥4.5 mm组染色体核型异常率显著高于2.5 mm≤NT<3.5 mm组和3.5 mm≤NT<4.5 mm组(P<0.05)，2.5 mm≤NT<3.5 mm组与3.5 mm≤NT<4.5 mm组比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.3NT增厚特征与染色体核型异常的关联性 54例单纯性NT增厚者中检出染色体异常11例(20.37%)，18例NT增厚合并其他超声特征异常者中检出染色体异常11例(61.11%)，比较差异有统计学意义(χ2=10.560,P=0.001)。

2.4妊娠结局 从抽取绒毛1周起随访至胎儿足月分娩。72例NT增厚胎儿，绒毛膜穿刺术后7 d无胎儿丢失。22例终止妊娠，其中因严重致死、致残染色体病终止妊娠16例(包括21三体8例，18三体5例，13三体2例，嵌合体1例)，应孕妇及其家属要求选择终止妊娠5例(包括45,X 4例，47,XYY 1例)，NT增厚合并颅内结构异常终止妊娠1例。成功分娩50例，其中1例右耳前发现5 mm×5 mm肉芽肿性赘生物，其余均存活，无明显不良预后。

3 讨论

3.1目前在产前诊断染色体疾病的检查中，G显带染色体核型分析是临床常用的检测方法，可以检测出染色体的数目异常和结构异常。本研究72例NT增厚胎儿中检出染色体异常22例(30.56%)，以21三体为主(11.11%)。21三体是21号染色体在减数分裂过程中不分离或姐妹染色单体提前分离所致。欧阳鲁平等[3]报道的130例胎儿NT增厚病例中，异常核型检出率为26.9%(35/130)，亦以21三体为主(7.69%)。莫伟英等[4]报道的62例NT增厚胎儿中，21三体检出率达6.45%，说明NT增厚胎儿21三体检出率较高。国外学者[5]的研究显示，NT增厚胎儿中染色体核型异常发生率达14.2%。因此，在超声软指标中，NT增厚可作为胎儿染色体异常诊断的强指标[6]。本次研究有22例孕妇选择终止妊娠，成功分娩50例，其中1例右耳前发现5 mm×5 mm肉芽肿性赘生物，其余均存活，无明显不良预后。

3.2早孕期胎儿NT增厚与染色体异常等密切相关，且NT增厚的程度越大，胎儿染色体异常的风险越高。本研究结果显示，2.5 mm≤NT<3.5 mm组、3.5 mm≤NT<4.5 mm组和NT≥4.5 mm组的染色体核型异常率分别为16.67%(5/30)、24.00%(6/25)和64.71%(11/17)，三组比较差异有统计学意义(χ2=12.577,P=0.002)。其中NT≥4.5 mm组染色体核型异常率显著高于2.5 mm≤NT<3.5 mm组和3.5 mm≤NT<4.5 mm组(P<0.05)，2.5 mm≤NT<3.5 mm组和3.5 mm≤NT<4.5 mm组比较差异无统计学意义(P>0.05)。这与马莹和陈奕[7]的研究结果相似。薛淑雅等[8]的研究报道也提示，NT增厚的程度与染色体异常具有关联。

3.3本研究结果显示，单纯性NT增厚胎儿的染色体异常发生率显著低于NT增厚合并其他超声特征异常者(20.37% vs 61.11%，P<0.05)，提示NT增厚且合并其他超声特征异常时，胎儿染色体异常风险更高，这与相关文献[5，8～10]结果相似。染色体核型分析是目前应用最为广泛的产前诊断手段，也是诊断染色体疾病的金标准[11～13]，然而其常受到细胞培养成功率、细胞分裂指数及标本质量的影响，且不利于快速诊断,也不能检出染色体片段<5 Mb的微小缺失及微重复[14，15]。染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis，CMA)能够检出100 kb以上染色体微小缺失及微重复[8]，能在一定程度上弥补染色体核型分析的不足，这可能会是将来分子遗传技术发展方向。

综上所述，孕早期胎儿NT增厚与染色体异常密切相关，NT增厚的程度越大，胎儿发生染色体异常的风险越高；且超声提示NT增厚合并其他异常指征时，胎儿染色体异常风险更高。