我国部分地区羊消化道寄生虫感染情况调查及球虫种类鉴定

2021-04-13刘林科菅忆晨王占铭李世杰王荣军宁长申张素梅菅复春

畜牧与兽医 2021年4期

刘林科，菅忆晨，王占铭，李世杰，王荣军，宁长申，张素梅，菅复春

(河南农业大学动物医学院，河南郑州 450046)

近年来，伴随着我国人民生活水平的提高，对羊肉的需求量日益增加，羊养殖数量也快速增长[1]。在养殖过程中，各种疫病的发生常给生产造成巨大的经济损失，其中寄生虫感染是影响羊等小型反刍动物生产效益的重要因素之一[2]。羊肠道寄生虫病可引起羊食欲不振、贫血、腹泻、生长发育不良，甚至造成死亡[3]。有些寄生虫病还能导致母羊妊娠率和后代存活率降低、产品产量及质量下降[4]。我国地域辽阔，羊品种丰富，不同地域、品种羊的肠道寄生虫感染情况，以及羊对寄生虫的抵抗力可能存在差异[2]。为了解我国部分地区羊春夏季节肠道寄生虫流行规律，对全国8个省寄生虫感染情况进行调查，以期为有效防控肠道寄生虫病提供参考，本次调查选取4大优势肉羊区域内的河南、江苏、吉林、辽宁、甘肃、贵州作为主要采样地，以及海南和青海共8个省份，涉及13个品种羊的共472份羊粪样进行检测。

1 材料与方法

1.1 样品收集

2019年4月至7月，对全国8个省16个地区的羊采集新鲜粪便样品，每份样品20～30 g，收集于洁净自封袋中，标明采集时间、地点、症状等相关背景信息，共采集样品472份，每份样品加入适量2.5%重铬酸钾，保存于4 ℃冰箱中备检。

1.2 样品检查方法

每份样品分别取5 g左右，采用水洗离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法进行检测[5]，并使用MoticBA310显微镜对观察到的卵囊和虫卵进行拍照。

1.3 粪便检查结果鉴定

对镜检检查到的寄生虫卵囊、包囊、虫卵等，依据其形态结构，参照文献[5]进行种类鉴定。

1.4 球虫的孢子化培养及虫种鉴定

参考陶立等[6]的方法，对黑山羊、波尔山羊和奶山羊的粪便样品进行球虫卵囊收集和培养，置于4 ℃冰箱保存备用，并依据形态进行虫种鉴定[6-9]。

1.5 数据分析

数据统计采用Pearson卡方检验，P<0.01表示差异极显著，P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 羊肠道寄生虫总体感染情况

对不同地区羊肠道寄肠虫感染情况调查结果见表1。

表1 不同地区羊感染肠道寄生虫的种类和感染率

本次调查的472份羊粪便样品中，肠道寄生虫总感染率为85.38%(403/472)，共检测到球虫、阿米巴、线虫、绦虫4类寄生虫的卵囊、包囊或虫卵，感染率分别为68.86%(325/472)、44.49%(210/472)、29.24%(138/472)、1.91%(9/472)。

2.2 肠道寄生虫混合感染情况

在472份样品中，共403份样品检测出寄生虫，其中单种病原感染率为38.98%(184/472)。2种寄生虫混合感染率为35.38%(167/472)，3种寄生虫混合感染率为10.38%(49/472)，4种寄生虫混合感染率为0.64%(3/472)，总混合感染率为46.40%(219/472)。

2.3 不同品种羊肠道寄生虫感染情况

在13个品种的羊中，黑山羊、波尔山羊、绒山羊、金堂山羊、努比亚山羊、撒能奶山羊、夏洛莱绵羊7种羊的球虫感染率在80.00%以上。黑山羊、槐山羊、奶山羊、细毛羊、美利奴绵羊4种羊的线虫感染率在40.00%以上。绦虫只在白山羊，黑山羊，波尔山羊，奶山羊，湖羊5种羊中被检测到。绒山羊和夏洛莱绵羊的球虫感染率高达80.00%以上，但没有检测到线虫。金堂山羊和努比亚山羊100.00%球虫感染率的同时，线虫感染率很低，分别只有10.00%和13.79%。

表2 不同品种羊感染肠道寄生虫感染情况

2.4 不同性别羊肠道寄生虫感染情况

对雌雄间的不同肠道寄生虫感染率进行统计分析，结果见表3。母羊和公羊的球虫感染率分别为77.78%(210/270)和30.91%(17/55)，母羊球虫感染率高于公羊，差异极显著(P<0.01)。母羊和公羊的绦虫感染率分别为0.74%(2/270)和5.45%(3/55)，母羊绦虫感染率低于公羊，差异显著(P<0.05)。母羊和公羊见阿米巴原虫和线虫的感染率差异不明显(P>0.05)。

表3 不同性别羊肠道寄生虫感染情况

2.5 寄生虫种类鉴定

在472份样品中共检测到4种线虫，1种绦虫。线虫分别为细颈线虫0.21%(1/472)、毛首线虫3.39%(16/472)、类圆线虫27.12%(128/472)、毛细线虫0.21%(1/472)，绦虫为扩展莫尼茨绦虫1.91%(9/472)。对阿米巴原虫未定种。在波尔山羊、黑山羊、奶山羊的样品中共检测到10种艾美耳球虫(见图1)。

A.毛首线虫虫卵(400×)；B.细颈线虫虫卵(200×)；C.毛细线虫虫卵(400×)；D.类圆线虫虫卵(400×)；E.扩展莫尼茨绦虫虫卵(400×)；F.阿米巴原虫包囊(1 000×)；G.阿氏艾美耳球虫(1 000×)；H.未孢子化球虫卵囊(1 000×)；I.艾丽艾美耳球虫(1 000×)；J.苍白艾美耳球虫(1 000×)；K.斑点艾美耳球虫(1 000×)；L.家山羊艾美耳球虫(1 000×)；M.山羊艾美耳球虫(1 000×)；N.阿撒他艾美耳球虫(1 000×)；O.羊艾美耳球虫(1 000×)；P.颗粒艾美耳球虫(1 000×)；Q.克氏艾美耳球虫(1 000×)图1 本次调查发现的寄生虫卵囊、包囊和虫卵

3种山羊感染球虫的种类及感染率详见表4。波尔山羊中发现的球虫种类丰富(10种)，其中阿氏和阿萨他艾美耳球虫为优势虫种，其次是山羊、艾丽、家山羊、克氏、颗粒艾美耳球虫，感染比例较少的为苍白、斑点和羊艾美耳球虫。而海南黑山羊感染球虫有7种，优势种类分别是艾丽、阿萨他、克氏艾美耳球虫。萨能奶山羊共感染6种球虫，其中羊、艾丽、山羊艾美耳球虫为优势种类。

表4 3种山羊球虫种类分布及感染率

3 讨论

3.1 羊肠道寄生虫感染情况分析

本次调查中羊肠道寄生虫总感染率为85.38%(403/472)。与景纪春等[10]对河南地区舍饲湖羊肠道寄生虫的调查结果(97.47%)，蔡为民等[11]对江苏地区19个羊场羊肠道寄生虫的调查结果(90.32%)，以及李梦婕等[12]对河南、吉林、辽宁和山东地区羊肠道寄生虫的调查结果(97.2%)相比，本研究结果的感染率较低。与唐莉等[13]对安徽省、河南省、江苏省和山东省部分地区羊肠道寄生虫的报道(54.99%)，以及张艳艳等[14]对新疆规模化舍饲羊场羊肠道寄生虫的调查结果(69.28%)相比，本研究结果相对较高。在混合感染方面，本次调查总混合感染率为42.58%(201/472)，与景纪春[10]、蔡为民[11]、李梦婕等[12]的报道相比较低。表明我国不同地区羊肠道寄生虫感染情况虽有差别，但整体上羊肠道寄生虫感染率依然很高，混合感染情况普遍。

此外，本研究共调查了16个地区的羊场，其中的12个地区羊场的羊肠道寄生虫感染率均在80%及以上，甘肃武威0(0/3)、江苏南通66.67%(8/12)、江苏徐州54.63%(59/108)、青海共和66.67%(2/3)的感染率较低。其中甘肃武威和青海共和的样品量较小，不足以代表总体的感染情况，还需进一步研究完善该地区的调查数据。江苏徐州羊场在平时并未做过驱虫，但其寄生虫感染率却相对较低，这可能与其高架床养殖模式有关。张宇新等[15]的报道也显示了高架床养殖的感染率61.34%(73/119)明显低于平地放养98.54%(135/137)，两者差异极显著。这说明高架床养殖模式有利于羊肠道寄生虫的防控，应积极推广。

马来西亚的调查结果显示，其球虫病患病率为89.2%，胃肠道线虫病患病率为52.3%[16]。韩国的报道显示其羊肠道寄生虫感染率为69.3%[17]。巴西帕拉伊巴报道的羊肠道寄生虫感染率为75.9%[18]。说明羊肠道寄生虫感染在不同地理环境，不同发展程度的国家都普遍存在，是全国乃至全球羊养殖业面临的一个挑战。

3.2 羊肠道寄生虫优势虫种

本次调查结果显示，球虫仍为羊肠道寄生虫的优势虫种，且在羔羊中最为严重。与张艳艳等[14]报道结果相一致。中国东北黑龙江省绵羊球虫感染率为92.9%，山羊为87.9%[19]。羔羊的球虫感染强度和患病率显著高于成年羊。本次调查对部分羊场羊的球虫感染强度进行了半定量分析，发现22份高感染强度样品中有18份为羔羊。这与羔羊易感性高、抵抗力低，且容易被带虫母羊传染有关。目前研究已证实，球虫病会引起羊只腹泻进而导致增重迟缓，给养殖场带来潜在的经济损失。羔羊感染球虫后，卵囊排出在断奶期前后达到高峰，随后由于宿主免疫功能的增强而逐渐减少[20]，这也对本研究的结果做出了合理的解释。因此，要关注妊娠母羊的球虫防控，以防止母子传播。羔羊球虫严重感染的危险因素包括：养殖密度大、卫生条件差和生理、营养等应激因素[20]。在当下集约化养殖条件下，随着养殖密度加大，球虫病也随之高发，养殖场应注意避免这些不利因素，并采取对产前母羊用药驱虫和哺乳期驱虫等措施，减少羔羊染虫率。

除球虫外，线虫也是反刍动物生产的主要限制因素之一，它们能够引起羊只骨骼生长迟缓、体重减轻和产奶量减少[21]。胃肠道线虫感染在全球羊养殖中也具有重要的经济意义，而山羊与线虫相互作用的特殊性可能影响胃肠道线虫的防治策略。山羊获得和表达针对胃肠道线虫免疫反应的效率都比绵羊低，因此山羊比绵羊对线虫更易感[22]。本次调查结果显示，山羊的线虫感染率为33.81%(119/352)，绵羊的为15.83%(19/120)，差异极显著，这与之前的研究结果是相一致的。因此，对山羊和绵羊的线虫防控要区别对待，山羊的线虫治理需要更加详细，规范的用药程序，用药前后需进行荷虫量监测，以便做好药效评价，为下次驱虫工作提供参考。

3.3 不同品种羊肠道寄生虫感染情况

3.3.1 不同品种羊肠道寄生虫感染差异

本次调查结果中，绒山羊和夏洛莱绵羊的球虫感染率高达80%以上，但却没有检测到线虫。金堂山羊和努比亚山羊球虫感染率100%的同时，线虫感染率却很低。这可能提示了不同品种羊对不同寄生虫有着不同程度的抗性。绦虫只在白山羊、黑山羊、波尔山羊、奶山羊、湖羊5种羊中被检测到，这可能与本次调查的羊场大部分都为舍饲饲养有关。李梦婕等-[12]报道显示，舍饲羊群与放牧羊群相比不易感染绦虫，和本次调查结果一致。13个品种中只有白山羊56.41%(22/39)和湖羊52%(39/75)寄生虫总感染率较低，上述样品来自于江苏省徐州市同一家养殖场，这可能与该场饲养管理和寄生虫防控水平较高有关。

目前关于宿主对寄生虫抗性差异的信息很少，了解这些将有助于设计更合理的控制程序。Haile等[2]的研究表明，当地羊的线虫抗性可能是由于该地区农业生态的变化，导致线虫虫卵的发育、存活和自由生活阶段的适宜性发生了变化，同时也可能是不同品种的宿主在第一次接触病原时，能够产生有效的保护性免疫反应导致的。羊的品种与寄生虫抗性之间的关系尚需要更多的试验来证实。

3.3.2 不同品种山羊感染的艾美耳球虫虫种差异

综合本研究和其他研究结果，不同地域山羊的优势艾美耳球虫种共有11种，常见的种类有阿氏、艾丽、克氏艾美耳球虫，但其中无一为所有山羊都感染的种类，说明不同地域和山羊品种间感染艾美耳球虫种类差异可能与其地势、气候和降雨量等差异有关，除此之外，也可能受饲料搭配和用药情况等多种因素影响[6，9，23-24]。蒋维东等[25]的报道显示，绵羊感染的球虫种类存在地理分布差异，但同一饲养条件和环境中，不同品种绵羊球虫感染种类分布差异不大。目前需要做进一步分子流行病学调查和动物感染试验，来揭示羊与不同种类球虫之间是否存在宿主-球虫的特异性和抗性关系。

3.4 不同性别羊肠道寄生虫感染情况

本次调查显示，母羊羊肠道寄生虫总感染率为88.52%(239/270)，公羊为63.64%(35/55)，差异极显著。母羊球虫感染率为77.78%(210/270)，公羊为30.91%(17/55)，差异极显著。景纪春等[10]报道，湖羊母羊和公羊的寄生虫总感染率分别为97.44%和97.52%，二者无显著差异。Mohamaden等[26]报道，埃及苏伊士地区球虫感染率雌性羊为65.22%(105/161)，雄性羊为47.5%(57/120)，差异极显著。这与本次结果相一致，显示了公羊对球虫具有更强的抵抗力。公母羊线虫的感染率没有显著差异，但雄性感染率略低于雌性，这与Haile等[2]的报道一致。但也有研究认为，母羊比公羊对线虫更有更强的抵抗力[27]。线虫感染与羊的性别是否存在相关性还需进一步研究确认。绦虫感染率在雌雄间差异显著，但目前相关报道较少。阿米巴感染率在雌雄间无显著差异。