自体外周血干细胞对心肌梗死患者血清S1P、TGF-β1表达及心功能的影响

宁宏洁，赵育洁，牛思泉，胥良，杨少华，王地，信鹏程

心肌梗死是一种临床上较常见的心血管疾病，该疾病主要与冠状动脉（冠脉）形成血栓后，造成了心肌严重缺血及坏死有关[1,2]。相关数据显示，近几年心肌梗死的发病率逐渐上升，对患者健康造成严重威胁。临床上治疗心肌梗死有药物治疗和经皮冠脉造影介入治疗，虽具有一定疗效，但效果不佳[3,4]。近年来，外周血干细胞移植用于治疗心肌梗死成为研究的热点[5]。本研究采用自体外周血干细胞移植治疗心肌梗死，通过观察患者治疗前后血清1-磷酸鞘氨醇（S1P）和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达水平、心功能各项指标及不良心血管事件发生情况，分析自体外周血干细胞移植对心肌梗死患者的治疗效果，结果如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2016年2月至2018年11月于郑州市第七人民医院心内科确诊并住院治疗的心肌梗死患者76例作为研究对象，采用随机数字表法将患者分为治疗组和对照组两组（每组各38例）。治疗组中男性23例，女性15例，年龄40～61岁，平均年龄（51.39±6.41）岁。对照组中男性25例，女性13例，年龄38～60岁，平均年龄（50.91±6.07）岁。本研究经我院伦理委员会批准过，患者及家属均知情同意。

纳入标准：①符合心肌梗死的相关诊断标准[6]；②心肌梗死时间＜7 d ；③患者及家属自愿参加本项研究者；④临床资料齐全者。排除标准：①排除有经皮冠状动脉介入治疗（PCI）手术禁忌症者；②排除同时患有恶性肿瘤等严重疾病者；③排除有严重凝血功能障碍者；④临床资料不全者。

1.2 方法 对照组患者给予常规治疗。药物治疗：主要药物为阿司匹林、氯吡格雷、硝酸酯类、β-受体阻滞剂等。介入治疗：患者经冠脉造影术后行支架植入治疗。

治疗组在对照组常规治疗的基础上给予自体外周血干细胞移植治疗。具体方法为：外周血干细胞动员及采集：对治疗组患者连续5 d皮下注射300～600 μg/d包涵体G-CSF（生产厂家：麒麟鲲鹏生物制药有限公司，批号：030551，规格：300 μg/支），观察患者有无出现发热、心绞痛、皮疹、高凝状态、自发性脾破裂等。第6 d使用血细胞分离机（购自美国贝克曼公司，货号B31602）分离50 ml外周血干细胞。外周血干细胞移植：手术当日使用C型受臂心血管造影机，建立股动脉通路后在梗死相关动脉插入指引导管，将over the wire球囊放入支架内，将已分离的自体外周血干细胞悬液经球囊导管中心腔注入梗死血管远端。其中，每次注射2～3 ml，每次间隔3 min。在经冠状动脉输入过程中，要注意观察患者是否有低血压及心率失常现象的发生，若有可视情况缩短球囊封堵的时间。

1.3 研究方法 于清晨抽取受试者空腹的静脉血5 ml，离心后收集上层血清，保存于-80℃冰箱中。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清S1P、TGF-β1表达水平。将标准品加入酶标包被板上，将样品加入孔内，37℃温育30 min后用洗涤，拍干后加入酶标试剂，37℃温育30 min，洗涤后将其显色，再加入终止液到反应停止。应用超声心动图仪（购自荷兰飞利浦公司，型号：Affiniti 50），对所有患者治疗前后进行超声检查，并记录各患者的左室舒张末期容积（LVEDV）、左室射血分数（LVEF）、心室壁运动积分指数（WMSI）。

1.4 随访 对本研究中所有患者治疗出院后进行门诊复查或电话随访，为期1年，末次随访时间为2019年11月30日，死亡患者以死亡时间为随访截止期。观察患者1年内再发心肌梗死、梗死后心绞痛、心衰再住院及死亡等发生情况，并做好记录。

1.5 统计学分析 使用SPSS 22.0软件进行数据处理。吸烟等计数资料用构成比（%）描述，行 检验；血清S1P、TGF-β1表达水平等计量资料用均数±标准差（±s）描述，行t检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料比较 治疗组和对照组的平均年龄、体质指数（BMI）、性别以及糖尿病、高血脂、高血压及吸烟例数等进行比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），表1。

表1 各组基本资料比较结果

2.2 两组治疗前后血清S1P、TGF-β1表达水平比较 治疗前两组患者血清S1P、TGF-β1表达水平相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后两组患者血清S1P、TGF-β1表达水平均显著低于治疗前（P＜0.05），且治疗组明显低于对照组（P＜0.05），表2。

表2 两组治疗前后血清S1P、TGF-β1表达水平（±s）

表2 两组治疗前后血清S1P、TGF-β1表达水平（±s）

注：S1P：1-磷酸鞘氨醇；TGF-β1：转化生长因子-β1；与治疗前同组相比，aP＜0.05

组别 例数 S1P（pmol/mL） TGF-β1（μg/L）治疗前 治疗后 治疗前 治疗后治疗组38 316.83±30.74221.09±20.86a83.72±12.4846.53±9.16a对照组38 311.95±31.06261.58±25.41a83.54±12.6269.38±10.71a t值 0.688 7.592 0.063 9.995 P值 0.493 0.000 0.950 0.000

2.3 两组心功能指标水平比较 治疗前两组患者LVEDV、LVEF及WMSI水平相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后两组LVEDV、WMSI水平均显著低于治疗前（P＜0.05），且治疗组明显低于对照组（P＜0.05）；LVEF显著高于治疗前（P＜0.05），且治疗组明显高于对照组（P＜0.05），表3。

2.4 两组发生不良心血管事件的比较 两组患者再发心肌梗死、梗死后心绞痛及死亡发生率低于对照组，两组比较差异无统计学意义（P＞0.05），治疗组心力衰竭再住院发生率显著低于对照组（P＜0.05），表4。

3 讨论

心肌梗死属冠状动脉硬化性心脏病（冠心病）中较严重的一类疾病，也是全球范围内人类三大病死原因之一。该病具有病情重、发病急、致死率高且预后差等特点[7,8]。流行病学研究显示，随着人口老龄化加剧及人们生活方式改变，近年来中国心肌梗死患者发病率呈逐年上升的趋势，对患者健康造成了严重影响。临床治疗常用方法是药物治疗和手术介入治疗，虽在一定程度上可缓解症状，但无法从根本上恢复心肌细胞数量，患者梗死后易造成心功能不全，对逆转心室重构及心力衰竭等方面也不完全有效[9]。近年来，自体外周血干细胞移植在心血管疾病中的治疗引起了人们的广泛关注，并成为研究热点。本研究使用自体外周血干细胞移植对心肌梗死患者进行治疗，取得了一定疗效。

S1P是神经酰胺的代谢产物，广泛分布于各组织中，血液是机体内S1P的主要来源，研究显示，S1P具有广泛的生物学作用，如调控细胞的增殖、生长、分化及凋亡，控制心肌缺血，调节血管新生等[10,11]。谭丽等[12]研究发现，血浆S1P水平在动脉粥样硬化的发生发展中发挥了重要作用。本研究发现，治疗后两组患者血清S1P表达水平均显著低于治疗前，且治疗组患者低于对照组，提示自体外周血干细胞移植能有效降低血清中S1P水平。TGF-β1是TGF-β细胞因子家族的重要成员之一，在炎症介导、纤维化、胚胎发育及血管增生等反应中发挥着重要作用[13]。张瑞萍等[14]研究发现，上调心肌梗死大鼠Klotho基因表达，TGF-β1表达降低，大鼠心肌功能得到改善。本研究结果发现，治疗后两组患者血清TGF-β1表达水平均显著低于治疗前，且治疗组低于对照组，提示自体外周血干细胞移植能有效降低患者血清中TGF-β1水平。心功能是评价心肌梗死患者疗效的重要指标。本研究结果显示，治疗后两组患者LVEDV、WMSI水平均显著低于治疗前，且治疗组患者低于对照组，LVEF显著高于治疗前，且治疗组患者明显高于对照组，提示自体外周血干细胞移植能有效改善心肌梗死患者的心功能。此外，本研究还发现，两组患者再发心肌梗死、梗死后心绞痛及死亡发生率低于对照组，两组比较差异无统计学意义，治疗组心力衰竭再住院发生率显著低于对照组，提示自体外周血干细胞移植能减少不良心血管事件的发生，尤其是心力衰竭再住院的发生。

综上所述，自体外周血干细胞移植可降低心肌梗死患者血清S1P、TGF-β1表达水平，改善心功能，降低不良心血管事件的发生。但本研究病例数较少，结果可能存在一定偏差，下一步应增大样本量并进行深入研究。

表3 两组患者治疗前后心功能指标水平比较（±s）

表3 两组患者治疗前后心功能指标水平比较（±s）

注：LVEDV：左室舒张末期容积；LVEF：左室射血分数；WMSI：心室壁运动积分指数；与治疗前同组相比，aP＜0.05

组别 例数 LVEDV（mg） LVEF（%） WMSI治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后治疗组 38 140.11±21.43 123.08±18.28a 44.19±6.51 55.43±7.68a 1.31±0.25 1.13±0.14a对照组 38 139.08±20.94 132.87±19.46a 43.97±6.73 51.87±7.04a 1.33±0.22 1.25±0.18a t值 0.212 2.260 0.145 2.106 0.370 3.244 P值 0.833 0.027 0.885 0.039 0.712 0.002

表4 两组患者发生不良心血管事件的比较（n，%）