一例雏鹅沙门氏菌感染的诊治

徐海军，爨淑楠，王书明，张圣尧，蒋平，佘德勇

(1.皖西学院 生物与制药工程学院，安徽 六安 237012；2.安徽金丰源畜牧科技有限公司，安徽 六安 237010)

鹅沙门氏菌病又称鹅副伤寒，是由多种沙门氏菌属引起的疾病总称。该病对雏鹅的危害较大，呈急性或亚急性经过，临床表现为腹泻、肠炎、败血症等。成年鹅多呈慢性或隐性感染。鹅副伤寒的主要病原是鼠伤寒沙门氏菌[1]。本文报道了一例鼠伤寒沙门氏菌引起的雏鹅副伤寒。

1 发病情况

2020年5月10日，六安市金安区中店乡某养鹅户送检4只18日龄雏鹅(尚未死亡)。经了解，该养殖户饲养了200只雏鹅。雏鹅在出壳时接种过小鹅瘟抗体和痛风抗体。4天前出现痛风症状，就在3天前又皮下注射了1次痛风抗体(2 mL/只)，同时在饮水中添加0.7 %小苏打。但仍有发病和死亡。临床症状表现为食欲减退或废绝，精神萎靡，蹲坐在地或侧躺， 无力行走，拉稀。近几天已累计死亡20只。遂于5月10日上午来就诊。送检雏鹅有两只表现间歇性角弓反张症状(2/4)。

2 剖检病变

剖检病变主要包括内脏痛风病变(1/4)；肝脏有大量大小不一的浅黄色坏死灶(1/4)(图1)；头部皮下有胶冻样水肿(2/4)，颅骨有出血点(3/4)(图2)；胰腺有两处火山口样坏死病变(1/4)(图3)；小脑坏死(1/4)；心内膜出血(3/4)(图4)；心包有少量黄色清亮积液(1/4)；鼻腔有较多稀薄粘液(3/4)。

3 病原分离鉴定

无菌采取肝脏涂布接种、脑组织划线接种于胰大豆蛋白胨琼脂平板，37 ℃培养18 h，结果肝脏和脑组织接种区长出大量灰白色、隆起、边缘整齐、表面湿润的菌落，直径在0.1～1 mm。挑取单个菌落分别转接于麦康凯平板和SS平板，37 ℃培养18 h，结果在麦康凯平板上长出灰色、隆起、边缘整齐、表面湿润的菌落；在SS平板上长出灰色、隆起、边缘整齐、表面湿润的菌落(图5)。说明分离到的细菌为不是大肠杆菌。对分离菌涂片、革兰氏染色、镜检，结果为革兰氏阴性杆菌(图6)。

4 分离菌16S rDNA测序鉴定

为对分离菌进行鉴定，取纯化的分离菌TSA平板生长菌落送到生工生物工程(上海)股份有限公司进行16S rDNA测序鉴定，结果该菌株被鉴定为鼠伤寒沙门氏菌。将保留的菌株重新接种SS平板培养，发现个别菌落呈黑色(图7)，经过多次传代，仍只有少量菌落呈黑色(图8)。

5 药敏试验

对分离菌进行药敏试验，结果表明该菌对丁胺卡那高敏，对新霉素、头孢曲松、恩诺沙星、粘杆菌素中敏，对氟苯尼考、阿莫西林低敏，对强力霉素、林可霉素耐药(表1)。

表1 药敏试验结果

6 治疗措施及效果

根据药敏结果，用新霉素和恩诺沙星进行治疗，分上下午饮水给药，剂量按使用说明，每日1次，连用4日。5月17日回访得知，除了个别病重鹅外，其余鹅已恢复正常。

7 讨论

雏鹅沙门氏菌感染在六安地区比较少见。沙门氏菌感染比较有特征性的病变包括心肌有白色结节、肝脏有灰黄或灰白色坏死灶。本病例中4只病鹅中仅有1只出现肝脏灰黄色坏死灶病变。本病例中还出现颅骨出血和头皮下胶冻样水肿、胰腺坏死病变。胰腺火山口样坏死病变多见于禽流感病毒感染的水禽胰腺。但本病例通过抗菌素治疗就控制了病情，因此可以排除感染禽流感的可能。本病例中胰腺的火山口样坏死病变是否由沙门氏菌引起，还有待进一步研究。因此，从流行病学、临床症状和病理变化上，本病例尚不足以确诊为沙门氏菌感染。

为了确诊本病，对病原进行了分离鉴定。本病例分离菌初次在SS平板上传代培养时，没有出现黑色菌落，所以开始时排除了沙门氏菌。但接着通过16S rDNA测序确定分离菌为沙门氏菌。因此将保留的菌种重新划线接种SS平板，结果有少量菌落呈黑色。但挑取黑色菌落在SS平板上反复传代多次，最终也只有一部分菌落呈黑色。陈朝喜[2]等发现从不同动物(牦牛、禽类和犬)粪便中分离的沙门氏菌在SS 琼脂平板上大多数为无色透明菌落，部分菌株在菌落中央呈黑色或黑褐色，与本研究有相似之处。但本研究还发现即使是中央呈黑色的单菌落进行划线传代培养后，又会长出大量无色透明菌落和少量中央呈黑色的菌落。沙门氏菌在SS培养基上的菌落表现为中央黑色，是因为产生的硫化氢与培养基内的铁发生反应生成黑色的硫化亚铁。但是要产生足够的硫化氢，需要该菌落发育良好，硫化氢能够在其中聚集，这样才能形成黑色的硫化亚铁。因此发育不良的小菌落或者刚刚形成的小菌落，往往是观察不到菌落中央黑色的，成片的菌苔也因为营养竞争过于激烈而往往不能产生黑色。本研究说明沙门氏菌产生硫化氢的生化特性非常不稳定，对这一现象在分离鉴定沙门氏菌时应特别注意，以免发生误判。