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新型鹅星状病毒致雏鹅痛风及其综合防控

2021-03-28作者侯展鹏高智均江丹莉潘建秋黄运茂付新亮

广东饲料 2021年1期
关键词:雏鹅星状痛风

◆作者:侯展鹏 高智均 江丹莉 潘建秋 黄运茂 付新亮

◆单位:1.仲恺农业工程学院动物科技学院;2.广东省水禽健康养殖重点实验室

雏鹅痛风是由新型鹅星状病毒(Goose Avastrovirus,GoAstV)引起的一种以雏鹅的心包、肾脏、肝脏等内脏及关节出现大量尿酸沉积为主要特征的急性传染性疾病。该病主要发生于5~20日龄雏鹅,感染的雏鹅精神沉郁、食欲减退、消瘦、四肢瘫痪等,严重者死亡,死亡率高达30%。研究表明,在不同品种、不同饲养方式的种鹅群中均有发生。由于该病的致病机制尚不明确,导致AstV在鹅群中迅速传播,给水禽养殖业带来了严重的损失。目前对于鹅新型痛风并无有效的治疗方案,为此应加强生物安全和综合防控措施,以保障我国养鹅业的健康可持续发展。

1 病原学

星 状 病 毒(Avastrovirus,AstV)属于星状病毒科星状病毒属,为单股正链RNA病毒,直径约为28-30nm。该病毒粒子无囊膜结构,核衣壳呈二十面体球形对称结构,在电镜观察到该病毒呈五角或六角星状,因此命名为星状病毒。该病毒基因组具有三个开放阅读框(ORF1a、ORF1b和orf2b),5'和3'的非编码区以及poly-A组成。在ORF 1a和ORF 1b(AAAAAC)的重叠区都有保守的滑序列,在ORF 1a和ORF 1b指导ORF 1ab融合蛋白的合成,间隔区存在于绝大多数鸟类星状病毒的开放阅读框1b的终止密码子和开放阅读框2的起始密码子之间,而重叠在少数的开放阅读框中ORF 1a和ORF 1b编码非结构蛋白,其对基因组复制有反应,ORF2编码病毒体形成所需的病毒衣壳蛋白。根据星状病毒感染动物类型的不同可划分为:哺乳类星状病毒(Mamastrovirus,MAstV)和禽星状病毒(Avastroviruses,AAstV)两个属,其中AAstV,由33个不同的病毒基因型所构成;MAstV包含7种基因型。禽星状病毒的宿主包括:火鸡、鸡、鸭、鸽等鸟类,主要引起的胃肠道疾病,并导致鸡、鸽肾炎以及鸭病毒性肝炎的发生。GoAstV与其他种属星状病毒同源性均小于70%,遗传距离较远,根据基因组序列的差异,可能存在的致病性有显著差异。由于星状病毒在自然环境下非常稳定,对酚类、季铵盐类等大多数常用消毒药物不敏感,对热和酸等条件比较耐受,但能被0.3 %甲醛、0.1 %的β-丙内酯、90 %甲醇等消毒剂彻底灭活。

2 流行病学

GoAstV具有广泛的组织噬性,病死雏鹅的肾脏、心脏、大脑、肝脏等均可分离出病毒。其传播途径主要是经过消化道感染,即粪-口途径传播,其中被星状病毒污染的水源、食物均可成为传染源,为其他物种的潜在感染和病毒的跨宿主传播提供有利条件。雏鹅痛风的发生无明显季节性,由于空气温度、湿度偏高,同时雏鹅抵抗力低下,饲养环境差、饲养管理不当等,给病毒的传播提供了非常有利的条件。但雏鹅痛风在其他月份某些地区均能继续流行,表明GoAstV还存在其他传播方式,通过大量研究数据表明,AstV除了通过粪-口途径传播以外,还可以通过直接接触传播和间接接触传播。

3 临床症状与病理变化

3.1 临床症状

雏鹅感染GoAstV后,病雏会出现精神不振、羽毛松乱,行动迟缓、食欲相对正常,消瘦、排灰白色水样粪便,并污染肛门附近的羽毛,发病后期食欲减退渐至废绝,关节肿胀、跛行、卧地不起、不愿走动,部分病鹅会出现单脚站立或呈现蹲姿,喙部尿酸盐沉积、蹼苍白最终衰竭死亡,病程大概持续3-7d。

3.2 病理变化

GoAstV具有广泛组织嗜性,导致机体可引起病雏体内多组织器官病变,剖检可见心脏和肝脏表面被大量白色的尿酸盐渗出物所覆盖,肝脏肿大、淤血,心包、气囊上有豆腐渣样尿酸盐沉着,肾脏肿大,色泽变淡,在表面沉积白色斑点状尿酸盐;输尿管集聚过多的尿酸盐而发生阻塞,明显肿胀变粗。部分病死鹅脾脏、肝脏、肾脏、肠系膜等表面覆盖一层白色薄膜;颈部皮下、腿部肌肉及腿部关节腔中出现点状或者片状尿酸盐沉积。

4 诊断

根据病因、病史、特征性症状和剖检变化可作出初步诊断为雏鹅痛风,雏鹅痛风虽然难以根据流行病学,临床症状、病理变化确定其病因,但引起雏鹅痛风的因素大多是饲养管理条件差,钙磷比例失衡,维生素A缺乏、病毒感染、寄生虫感染。若需确定雏鹅痛风的病因,还需要通过实验室进行进一步的诊断,目前实验室的诊断方法包括电镜法、病毒分离鉴定和血清学试验、分子生物学诊断等。

4.1 电镜法

电镜法是最原始用于检测星状病毒的方法,通过电镜直接观察病毒的形态结构和病毒大小的特点进行直接判断,若从样品中观察到呈五角或六角的星状带纤突、直径约为29 nm的病毒颗粒,基本可以确定为星状病毒(AAstV),此方法较为直观,但灵敏度与特异性不强。

4.2 病毒分离鉴定

采集患病病鹅肝、肾、脾等内脏器官进行PBS进行匀浆处理,接种到9~13日龄鹅胚的尿囊腔或卵黄囊中,一般传代培养到第三代时,鹅胚出现死亡,可见死亡鹅出现胚尿囊膜增厚,胚体出血明显的现象。组织病理学检查可见肾脏上皮细胞出现变圆、聚团、脱落等明显的病变。

4.3 血清学检测法

由于目前尚无GoAstV的疫苗应用,若血清中检测出GoAstV的抗体,则一定存在GoAstV的感染。酶联免疫吸附试验(ELISA)与血清中和实验(NT)是检测星状病毒最常用的血清学检测方法,其中ELISA具有快速、简便、特异性强的特点。Zhao等建立了一套用于检测鸭星状病毒血清抗体的间接ELISA检测技术,如今已有市面上已有检测禽星状病毒的ELISA试剂盒,为快速诊断禽星状病毒提供了更为便捷的方式。

4.4 分子生物学方法

邱思语等,建立了GoAstV的qPCR检测方法,SYBR Green I实时荧光定量PCR与普通PCR相比,SYBR Green I实时荧光定量PCR具有灵敏度高、特异性强的特点,其灵敏度是普通PCR的100倍,且该检测方法对鹅其他病毒性疾病的病原如副粘病毒、细小病毒检测均无反应,是检测GoAstV的有效手段。

5 疫苗研究进展

目前,市面上尚无可以有效预防GoAstV的疫苗,且常规抗菌、抗病治疗方法无明显效果,由于GoAstV不容易培养,成本相对较高以及病毒毒价不高,导致GoAstV疫苗产品质量高低不一;根据奚雨萌等,研究表明,对患有GoAstV的病雏及时接种相应抗体以及使用抗生素可以有效的防控态势,减少经济损失;张清水,将GoAstV通过连续传代培养后,成功选育出弱毒株,免疫接种实验结果表明,免疫后的雏鹅产生较高的抗体水平,且保护率为100%。Xu等,构建了以新城疫病毒为载体表达GoAstV Cap蛋白的载体疫苗,该疫苗能较好的表达GoAstV Cap蛋白,在其免疫攻毒保护试验结果表明,该疫苗对易感雏鹅可产生有效的免疫保护,这为后续疫苗的研发提供了新的思路。

6 综合防控措施

6.1 强化生物安全,切断传播途经

由于该病暂无疫苗和特效药物进行治疗,防控GoAstV主要依靠及早发现、及早扑灭,坚持以预防为主的措施。各养殖场应采取封闭式的管理模式,加强完善防疫流程,实施全进全出制度。由于GoAstV主要通过消化道、生殖道进行传播,因此我们应保证饲养环境干净卫生,定期消毒及时对粪便进行清理,同时加强精细化管理,养鹅场需要定期通风换气加速空气流动,防止氨气、硫化氢等有害气体累积,降低雏鹅抵抗力,导致GoAstV容易通过呼吸道进行传播。鹅场进出道口要有消毒设施,对进出的外来车辆必须进行消毒,对外来人员需进行消毒隔离方可进入养殖场,避免外界的病原体进入养殖场,从源头上切断传染源。

6.2 提高雏鹅抗病能力

根据鹅生长各阶段营养需求合理调整饲料搭配,确保饲料营养全面,为防止雏鹅痛风的发生,不随意提高饲料中蛋白质和钙的含量,确保雏鹅能及时排出尿酸等蛋白代谢产物,避免其在体内的积累,控制好矿物质和维生素水平,同时确保饮用水充足、不饲喂霉变饲料,尽可能增加青绿饲料在饲喂料中的占比;合理的饲养密度,保证雏鹅有一定的活动空间,合理加强雏鹅运动,保证雏鹅每天有充足的运动量,以增强雏鹅体质,提高雏鹅对疾病的抵抗力;这些措施可以有效降低营养代谢型痛风降低营养代谢型痛风的发。

6.3 制定隔离措施,降低疾病传播风险

若发现疑似病例,及时进行严格消毒隔离,防止该病向外传播扩散,并限制人员的进出鹅舍,对鹅场的墙壁、地面、料线、水线等设备设施进行消毒,所有的垃圾和粪便都应无害化处理,做到从根源上切断传播途经,并对发病雏鹅采取对症治疗的方案,在饲料和水中添加小苏打和电解多维,进一步加速体内尿酸盐的代谢和排出,同时可使用保肝护肾的药物进行调理。

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