γ- 干扰素释放试验在不同年龄段肺结核患者中的诊断效能

张丽华

福建省莆田市第一医院 （福建莆田 351100）

目前，肺结核是我国常见的慢性传染病之一，主要由结核分枝杆菌感染引起。临床诊断该病的方式包括X 线检查及痰涂片抗酸染色、结核抗体检测等各项实验室检查[1]。但上述实验室检查均存在一定的局限性，如操作过程复杂、影响因素较多、检测时间较长等，因此需要寻找新的检测方法以提高检出率及准确度[2]。γ-干扰素释放试验（interferon gamma release assay，IGRA）对肺结核的诊断灵敏度高，已在临床广泛应用[3]。但目前缺少IGRA 对不同年龄段肺结核患者诊断效能的相关研究报道。本研究旨在分析IGRA 在不同年龄段肺结核患者中的诊断效能，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年7月至2020年1月我院收治的109例高度疑似肺结核患者作为研究对象，并按年龄段分为青年组（34例，18～44岁）、中年组（39例，45～59岁）、老年组（36例，≥60岁）。青年组男18例，女16例，平均体质量指数（19.72±2.37）kg/m2；中年组男19例，女20例，平均体质量指数（19.47±2.68）kg/m2；老年组男18例，女18例，平均体质量指数（19.55±2.61）kg/m2。3组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者及其家属均自愿签署知情同意书。

纳入标准：经初步临床诊断及患者临床表现高度怀疑肺结核；均接受IGRA 与结核分枝杆菌涂片试验检测；意识清楚，无认知障碍。排除标准：病情严重的濒危期患者；妊娠期、哺乳期女性；临床检验资料不完整的患者。

1.2 方法

使用T-SPOT.TB 试剂盒（Oxford Immunotech 公司，批号TEC015321）进行IGRA 检测：采集患者静脉全血3 ml，与肝素钠抗凝剂混合均匀，分别装于标记P、T、N 的1 ml 培养管中；其中T 管添加结核特异度抗原（ESAT-6、CFP-10），P 管添加非特异度刺激抗原植物雪球凝集素，N 管为空白对照管；3管分别离心后抽取中段外周血单个核细胞进行洗涤并计数，混合抗原加入预包被抗γ-干扰素抗体的反应孔，37 ℃孵育16～22 h 后洗涤，加标记二抗，孵育1 h，加显色液，干燥；最后，镜下观察每个反应孔的颗粒沉淀，1个酶联斑点表示1个效应T 细胞，记录检测结果（当 N＜0.5 时，若 T-N/P-N ≥0.16 判为阳性，否则为阴性；当 0.5≤N ≤2.5 时，若 T-N ≥1.5 判为阳性，否则为阴性）。

结核分枝杆菌涂片试验检测：采集患者痰标本，涂在10 mm×20 mm 的玻片上，并放置于温度＜80 ℃的干燥器内进行干燥，加美兰染色液后于镜下检测，观察到结核分枝杆菌为阳性。

1.3 观察指标

以结核分枝杆菌涂片试验结果为金标准，比较3组的IGRA 检测结果，并评估IGRA 对不同年龄段肺结核患者的诊断效能（灵敏度、特异度、准确度）。

1.4 统计学处理

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，多组间比较使用R×C 列联统计分析工具进行数据分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 结核分枝杆菌涂片试验结果

109例高度疑似肺结核患者，经结核分枝杆菌涂片试验检测，最终确诊肺结核78例。

2.2 IGRA 检测结果

以结核分枝杆菌涂片试验结果为金标准，IGRA 诊断肺结核的灵敏度、特异度、准确度分别为91.03%（71/78）、67.74%（21/31）、84.40%（92/109），见表1。

表1 IGRA 检测结果（例）

2.3 IGRA 对不同年龄段肺结核患者的诊断效能比较

IGRA 的诊断灵敏度随年龄升高而降低，但差异无统计学意义（P＞0.05）；IGRA 对老年组的诊断灵敏度低于青年组，差异有统计学意义（P＜0.05）；3组的诊断特异度比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；IGRA 的诊断准确度随年龄升高而降低，但差异无统计学意义（P＞0.05），见表2～3。

表2 IGRA 对不同年龄段肺结核患者的检测结果（例）

表3 IGRA 对不同年龄组的诊断效能比较（%）

3 讨论

根据世界卫生组织的不完全统计，全球每年结核病的新发病例数约为1 000万，且我国发病率居全球第二，并有逐年增长趋势[4]。虽然经过后期有效治疗，肺结核患者痊愈的概率较大，预防肺结核的相关疫苗也问世许久，但该病的传染性及对人类健康的威胁仍不容小觑，且患病后治疗难度较大、治疗费用较高等因素使肺结核患者长期面临精神及经济压力。受患者身体素质等影响因素，结核病早期症状不典型，导致误诊、漏诊情况多发，而目前临床对结核病的诊断缺乏一种快速、早期且准确度高的检测方法[5]。IGRA 可直接显示受检患者体内因结核分枝杆菌刺激产生的γ-干扰素情况，诊断准确度高，不受卡介苗和大多非致病分枝杆菌的影响，对于大规模接种卡介苗的国家，该检测方法具有重要诊断价值。

IGRA 主要利用结核分枝杆菌表达的抗原刺激患者外周血产生的γ-干扰素，为结核杆菌特有抗原，因此可准确检测患者体内是否含有结核分枝杆菌抗体，从而准确诊断肺结核[6]。本研究结果显示，IGRA 对老年组的诊断灵敏度低于青年组（P＜0.05），且IGRA 的诊断准确度随年龄增加稍有降低（P＞0.05），表示IGRA 对青年及中年患者的诊断价值高于老年患者。原因可能为，老年患者的营养状况、身体素质较差，且多患有各种基础疾病，导致其免疫功能损伤，免疫系统对结核抗原的应答能力远低于青、中年患者，导致诊断灵敏度与准确度较差[7]。有研究结果显示，老年肺结核患者本身存在的高血压、糖尿病等基础疾病导致其机体、血液处于异常状态，这可能会对IGRA 检测结果产生影响；且老年肺结核患者药物治疗史较多，这也会对检测结果造成影响[8]。目前，IGRA 还无法对潜在肺结核患者作出有效诊断，而患者暴露于肺结核感染环境的概率随着年龄的增加而增加，因此，IGRA 对部分潜在感染的老年患者未作出有效判断，导致老年组灵敏度与准确度相对较低，这也提示IGRA 只能作为临床辅助诊断方法。由于研究条件所限，本研究并未设置健康对照组进行鉴别分析，相关论点仍需排除相关影响因素后进行进一步佐证。

IGRA 不同于其他常规检查，其最大的优势在于检测结果不会受环境结核分枝杆菌感染和卡介苗接种的影响，且其特异性也不受被测细胞因子产生的交叉反应影响；IGRA 对人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染和免疫抑制剂治疗人群的检测结果不受机体免疫抑制剂的影响，使其应用范围较常规肺结核实验室检测方法更广泛[9]；IGRA 检测时间短，可节约患者时间，且可使检测结果受到外界环境因素影响的可能性更小；此外，IGRA 的诊断准确度较高，不用反复检测及排除，可在很大程度上减少潜在感染及疑似患者的医疗花费，因此，根据国际指南建议，在条件允许的情况下，应对所有疑似患者采用IGRA 进行检测[10]。

综上所述，IGRA 是目前临床诊断肺结核准确度较高的检测手段，且对青年及中年患者的诊断价值均高于老年患者，可将其作为诊断青年及中年肺结核患者的重要依据，但对于老年患者仍需结合其他相关检查谨慎判断。