饲料中添加复方中草药对鞍带石斑鱼生长与消化酶活性的影响

2021-03-18黄景军赵会宏杨宇晴张海发周立斌石和荣

饲料工业 2021年4期

黄景军何琪赵会宏刘苏杨宇晴张海发周立斌石和荣，*

（1.广东省海洋渔业试验中心，广东惠州516081；2.华南农业大学海洋学院，广东广州510640；3.惠州学院生命科学学院，广东惠州516007；4.西南林业大学生命科学学院，云南昆明650224）

石斑鱼属于鲈形目(Perciformes)，鮨科(Serrani⁃dae)，石斑鱼亚科(Epinephelinae)，石斑鱼属的珊瑚礁鱼类，以其美味，鲜嫩的肉质和丰富的营养而闻名[1]。石斑鱼作为重要的经济海水养殖鱼类，在2019 年全国产量为18.3 万吨[2]。鞍带石斑鱼（Epinephelus lan⁃ceolatus）又称巨石斑鱼，俗称龙趸，是世界上最大的石斑鱼，可以长到2.3 m，重达400 kg[3]。并且因其生长快速而广受欢迎，第一年就可以达到3 kg[4]。

随着石斑鱼养殖业集约化养殖规模的扩大，近海污染严重，导致养殖过程中疾病频发。为防治病害，抗生素或化学药物的滥用对环境和人类健康产生了不良影响[5]，严重制约了石斑鱼养殖业的发展。水产养殖规模日益发展壮大，各种水产生物疾病逐渐显露，这些显而易见的水产养殖危机使得抗生素成为养殖中必不可少的重要药物用品之一，传统抗生素虽然可以治疗鱼类疾病但伴随着利益而来的是抗生素滥用情况所造成的对各方面的危害，抗生素滥用容易导致耐药菌株的产生、药物残留、破坏微生态平衡和污染水资源，所以减少、控制抗生素使用问题由此成为水产养殖中的重要研究内容[6]。

本试验就是利用中草药代替常规抗生素。中草药饲料添加剂是以中草药为原料经过加工提取等工艺制成的饲料添加剂，纯天然，安全可靠，经济环保，兼具药物和营养双重功能。车前草有抗菌消炎、消肿利尿及清热明目等方面的作用，其浸出剂还可以抑制细菌的生长，杀灭金黄色葡萄球菌等多种革兰阳性菌，具有抗炎作用[7]。藿香为唇形科藿香属植物，全草均能入药，其性微温、味辛，入脾、肺、胃经，有芳香健胃、清咳解暑等功效。并且藿香挥发油对多种菌类具有抑制作用[8]。刺五加是一种常用中草药，具有抗氧化、抗炎、调节脂质代谢等多种生物学功能。有研究发现刺五加提取物添加在饲粮中还可以促进畜禽胃肠发育并提高其生长性能[9]。厚朴的药理作用广泛，对糖脂代谢也有较为明显的影响作用，其还具有抗炎、镇痛、抗病原微生物、抗肿瘤、抗氧化等药理作用，但是最主要的还是对神经、消化、心血管以及呼吸系统的作用[10]。目前中草药已在水产动物中广泛使用，被列入饲料原料目录。中草药既可单味添加，也可复方添加；可以原料药添加，也可以提取物添加，但主要以复方，原料经烘干粉碎使用。研究表明，鱼用中草药饲料添加剂可以提高动物的生产性能与抗病力，改善动物产品质量与饲料品质[11]。用中草药替代常规抗生素、化学药等渔药并作为功能性鱼饲料添加剂，既能促进鱼类的健康生长，提升水产品质量安全水平；又能促进水体质量提升，经济效益和生态效益一举两得，为水产养殖行业保驾护航。

鞍带石斑鱼是近年推广的养殖品种，同时也可以作为虎龙杂交斑[12]的父本，关于饲料添加中草药对其作用效果报道较少。因此，本试验以复方中草药作为饲料添加剂来研究其对鞍带石斑鱼生长发育的影响，为探索鞍带石斑鱼循环水养殖中的病害防控技术，提高石斑鱼循环水养殖的存活率和抗病力，探究水产动物的高效养殖提思路。本试验以车前草、藿香、刺五加、厚朴四种中草药按等质量比制成的复方中草药作为饲料添加剂拌饲料投喂鞍带石斑鱼并探求其对鞍带石斑鱼生长以及消化酶活性的影响[13]。

1 材料与方法

1.1 试验饲料

基础石斑鱼料（RUBY 牌）委托广东越群饲料公司定制；复合中草药添加剂是以车前草(Herba Plan⁃taginis)、藿香(Herba Agastaches)、刺五加(Acanthopanax senticosus)、厚朴(Magnolia officinalis)四种中草药（由广东天地本草饲料科技有限公司提供）经中药粉末专用气旋筛粉机加工，细度达到300 目，按比例为1∶1∶1∶1 复配而成。在基础饲料中分别加入2、4 g/kg 和6 g/kg，用搅拌机混匀后喷洒少量水雾，风干后置于-4 ℃的冰箱中冷藏，保存备用。试验基础饲料组成及营养水平见表1。

1.2 试验设计及试验管理

试验在广东省海洋渔业试验中心的养殖车间内循环水养殖系统中进行,试验开始前将试验鱼饥饿24 h，挑选由中心提供的480尾大小均匀、健康的鞍带石斑鱼幼鱼[平均质量(84.53±14.00) g]放养于12 个养殖桶中（有效养殖水体0.55 m3），随机分为4 组，每组设置3个重复，每个重复组40尾鱼。驯化1周后开始正式试验。正式试验时，由于鞍带石斑鱼摄食活跃，很少剩饵，故分别在每天8：30 和4：30 各饱食投喂1 次，摄食5 min 后，记录残饵数量。每日记录各试验组投饵量、死亡率等，养殖周期为60 d。整个养殖过程中水温为27.05～30.05 ℃，溶解氧为5.40～7.70 mg/L，氨氮浓度≤0.3 mg/L。

表1 石斑鱼基础饲料组成及营养水平（风干基础，%）

1.3 样品采集与处理

分别在第20、40、60 d 采样，采样前停喂24 h，将养殖桶内的试验鱼全部捞出，并统计尾数和测量其体质量、体长等生长性能指标。测量完成后，每组随机选取5 尾鱼，用经过灭菌灭酶处理的采样工具处死，解剖后去皮，取背部肌肉、前肠，分别放入2 mL 离心管于液氮速冻，-80 ℃保存备用。

1.4 指标测定

1.4.1 生长性能结果计算

质量增重率（WGR,%）=（Wn-Wi）/Wi×100

特定生长率（SGR,%/d）=（lnWn-lnWi）/t

肥满度(CF,g/cm3)=Wt/L3

成活率(SR,%)=100×Nt/N0

饲料系数=总摄食量(g)/鱼增重量(g)

式中：Wn——平均终末体质量(g)；

Wi——平均初始体质量(g)；

t——饲养时间(d)；

Wt——鱼体平均质量(g)；

L——鱼体长(cm);

Nt——终末鱼数；

N0——初始鱼数。

1.4.2 肌肉常规检测粗蛋白采用凯氏定氮法测定，粗脂肪采用索氏抽提法测定，灰分采用马沸炉法测定。

1.4.3 消化酶指标测定试验鱼前肠的消化酶采用消化酶试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定。

1.5 数据统计与分析

试验数据采用Excel2018 软件进行处理，通过SPSS 21.0软件进行单因素方差分析（One-Way ANO⁃VA）并进行Duncan's 法多重比较，P＜0.05表示差异显著。所得数据结果用“平均值±标准差(Mean±SD)”表示。

2 结果

2.1 添加复方中草药对鞍带石斑鱼生长性能的影响(见表2)

表2 饲料中添加复方中草药对鞍带石斑鱼生长性能的影响

由表2 可见，饲料中添加复方中草药只有2 g/kg组在60 d时质量与对照组有显著差异（P＜0.05），以及40 d 和60 d 时增重率和特定生长率与对照组有显著差异（P＜0.05）。综合来看，在饲料中添加适量的复方中草药对鞍带石斑鱼的生长是有利的。

2.2 添加复方中草药对鞍带石斑鱼肌肉营养成分的影响（见表3）

由表3 可知，添加复方中草药6 g/kg 组的肌肉粗蛋白在20、40、60 d 时取样检测结果均显著高于对照组（P＜0.05）；添加复方中草药的2 g/kg 组的肌肉粗脂肪在投喂20 d后显著高于对照组（P＜0.05），显著高于4 g/kg 组和6 g/kg 组（P＜0.05）；添加复方中草药的试验组的肌肉水分、灰分与对照组相比均无显著差异（P＞0.05）。

表3 饲料中添加复方中草药对鞍带石斑鱼肌肉营养成分的影响(%)

2.3 添加复方中草药对鞍带石斑鱼消化酶活性的影响(见图1)

图1 添加复方中草药对鞍带石斑鱼消化酶活性的影响

由图1（A）可知，添加复方中草药对鞍带石斑鱼淀粉酶活性的影响，2 g/kg组只在20 d时消化酶的活性显著高于对照组及其他试验组（P＜0.05），4 g/kg 组在40 d 时消化酶的活性显著低于对照组（P＜0.05）。由图1（B）可知添加复方中草药对鞍带石斑鱼胰蛋白酶活性的影响，2 g/kg 组胰蛋白酶活性在试验期内均显著高于对照组（P＜0.05）。由图1（C）可知添加复方中草药对鞍带石斑鱼脂肪酶活性的影响，在投喂20 d 后，只有6 g/kg 组脂肪酶活性显著高于对照组（P＜0.05））；在投喂40 d 后，4 g/kg 组脂肪酶活性显著高于对照组（P＜0.05）；在投喂60 d 后，6 g/kg 组脂肪酶活性显著高于对照组（P＜0.05）。

3 讨论

3.1 添加复方中草药对鞍带石斑鱼生长性能的影响

中草药饲料添加剂作为一种新型绿色的饲料添加剂，含有多种生物活性物质和天然营养物质，能促进动物的机体代谢和蛋白质以及酶的合成，提高营养物质的利用率，提高成活率，具有促进动物生长、改善产品品质、提高机体抗病力等多方面优势，且安全、无毒，其在动物养殖生产中的应用越来越广泛[14]。研究发现，中草药成分中含有的有机酸、多糖类、生物碱、黄酮类等化合物能增加动物体内红细胞数量，促进机体血红蛋白、血清总蛋白的合成，此外，中草药可影响水产动物胃肠道内常在菌群的状态，维护动物肠道健康，优化肠道对营养成分的吸收，从而促进水产动物的健康生长[15]。刺五加作为饲料添加剂很早就有相关报道，孙博义等[16]报道刺五加作为添加剂能促进动物生长、提高饲料转化利用率。本试验研究结果表明，在饲料中添加复方中草药能提高鞍带石斑鱼的质量，增重率和特定生长率，刺五加对鞍带石斑鱼的生长可能起到一定的促进作用。本研究中的复方中草药添加剂其中的组分车前草、藿香和厚朴具杀菌、抗炎、抗氧化等作用，显示出潜在的药用价值[17-19]。曹海龙等[20]在自制中草药添加剂用于养猪的配方就包含车前草，而含有厚朴的中草药饲料添加剂能调节肠道菌群，改善肠道健康，可用于养殖中防治禽类腹泻[21]，厚朴提取物厚朴酚也可作为一种新型的饲料添加剂[22]。

综合本试验的结果，复方中草药对动物肌肉营养成分的影响可能与复方中草药的组成成分、添加量的多少和作用的动物种类等有着密不可分的关联。

3.2 添加复方中草药对鞍带石斑鱼肠道消化酶活性的影响

鱼类肠道消化酶主要包括淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶等。测定鱼体肠道消化酶活性是反映鱼体生理机能的重要指标，它展示了鱼体对营养物质的吸收和利用情况[23]。本试验通过检测鞍带石斑鱼肠道中脂肪酶、胰蛋白酶和淀粉酶活性来反映复方中草药对鞍带石斑鱼消化能力的作用效果。杨海峰等[24]发现在日粮中添加抗生素和刺五加提取物均可以有效防止断奶仔猪腹泻，提高生产性能，并增强机体的免疫功能，调节肠道微生物区系。并且与抗生素相比，刺五加提取物不仅改善了断奶仔猪生长性能，还有调节断奶仔猪免疫功能和肠道菌的功能。本研究中，复方中草药对鞍带石斑鱼肠道消化酶活性在一定的剂量下有显著的提高作用，同时在促进生长方面效果也有提高的作用。