不同检测方法在布鲁菌病诊断中的临床价值分析*

李莎莎，杨 丹，姚 瑶

宁夏医科大学总医院医学实验中心，宁夏银川 750004

布鲁菌是一类重要的人畜共患病病原菌，它对人和多种动物致病[1]。布鲁菌病是一种严重威胁公共卫生和人类健康的人畜共患传染病，是由布鲁菌引起的急、慢性自然疫源性传染病。该病在我国很多省份都有报道，主要以农牧业发达的地区为主，如：新疆维吾尔自治区、青海省、宁夏回族自治区、西藏自治区以及内蒙古自治区等[2]，是我国二类动物疫病，乙类法定人畜共患传染病[3]。布鲁菌病不仅感染途径多样且发病机制复杂，可通过消化道、呼吸道、皮肤黏膜等侵入人体，并引起一系列的免疫反应，最常见的症状是高热、肌肉酸痛、关节痛[4]。如病情迁延可导致败血症，严重者可导致多个器官系统功能受损。目前实验室检测方法有细菌学检查、血清学检查等。本研究分析了本院2016-2018年收治的布鲁菌病患者不同的检测方法，探讨不同检测方法在布鲁菌病中的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年8月至2018年6月本院收治的布鲁菌感染的120例患者作为研究对象，其中男91例，女29例，年龄1个月至79岁。纳入标准：纳入研究病例均符合WS 269-2007《布鲁菌病诊断标准》。排除标准：患有其他血液性疾病者；有感冒症状者；其他感染性疾病者。剔除重复病例及复查病例。

1.2仪器与试剂 细菌学方法：Bact/ALERT 3D全自动血培养仪，Bact/ALERT系统提供专用封闭式培养瓶(包括含树脂需氧培养瓶、含树脂厌氧培养瓶及含树脂新生儿专用培养瓶)，哥伦比亚血琼脂培养基，VITEK 2 COMPACT全自动微生物分析仪，革兰阴性菌鉴定卡(GN卡)，均为法国梅里埃公司产品。血清学方法：虎红平板凝集法(RBPT法)，试剂盒由宁夏回族自治区疾病控制与预防中心赠予；胶体金法采用人布鲁菌IgG抗体检测试剂盒，试剂盒来自北京中检安泰。

1.3方法

1.3.1细菌学检查 无菌采集患者静脉血。成人采血量为8～10毫升/瓶,每次同时采集1个需氧瓶和1个厌氧瓶送检；儿童采集单个儿童需氧瓶,采血量为1～5 mL,注入儿童血培养瓶内混匀立即送检。血培养瓶放入Bact/ALERT 3D全自动血培养仪培养。全自动血培养仪培养5 d未报警,且转种培养皿经观察无细菌生长者视为阴性；血培养仪显示阳性时,将阳性标本进行转种，并对生长的菌落进行细菌鉴定。检验过程严格按照标准操作规程进行。

1.3.2血清学检查 (1)RBPT法：将采集的患者静脉血分离出血清，取被检血清30 μL与虎红平板凝集抗原30 μL用搅拌棒以画圆方式扩散推开，均匀摇动平板，在4 min内观察结果。每次试验应设阴、阳性血清对照。若出现肉眼可见的凝集则为阳性，呈均匀粉红色无凝集现象为阴性。(2)胶体金法：取10 μL血清加入加样孔，再加入100 μL标本稀释液。15～20 min内判读结果，20 min后检验结果无效。只在质控线(C)位置出现1条红色条带为阴性，质控线(C)和检测线(T)位置出现两条红色条带为阳性，质控线(C)位置没有出现红色条带时结果无效。

1.4统计学处理 采用SPSS25.0统计软件对数据进行处理。计数资料以频数、率表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

120例患者中，细菌学方法检测布鲁菌阳性89例，阳性率为74.17%；血清学检验中，RBPT法检测布鲁菌116例，阳性率为96.67%，胶体金法检测阳性112例，阳性率为93.33%。3种检测方法结果比较，差异有统计学意义(χ2=33.650，P<0.001)；以细菌学方法检测结果为标准，其检测结果分别与RBPT法、胶体金法检测结果比较，差异均有统计学意义(χ2=24.385、16.196，P<0.001)。而2种血清学方法(RBPT法和胶体金法)检测结果比较，差异无统计学意义(χ2=1.404，P>0.05)。见表1。

表1 不同检测方法布鲁菌检出结果比较[n(%)]

3 讨 论

目前，临床对于布鲁菌感染的诊断，多采用细菌学和血清学检验[5]。本研究采用细菌学方法、RBPT法和胶体金法对所选取的120例患者进行检测，结果显示，细菌学方法检测阳性率为74.17%，RBPT法为96.67%，胶体金法为93.33%。RBPT法、胶体金法检测布鲁菌的阳性率分别与细菌学方法检测的阳性率比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。在布鲁菌感染的检测中，血清学方法的检出率比细菌学方法更高，更具应用价值。血清学方法检测的是IgG类抗体，操作简单，可在短时间内对布鲁菌感染情况进行检测，特别适用于对布鲁菌病进行大范围的筛查，但在检测过程可能会受到非特异性抗体的干扰而出现假阳性结果。因此，在对布鲁菌病进行诊断时，不能单纯以血清学方法检测结果为标准，血清学方法检测结果为阴性时，细菌学方法也可能分离出布鲁菌[6]。本研究结果显示，血清学方法的检出率相较于细菌学方法更高，更具应用价值，但细菌学检验通过留取标本，经培养后再转种，通过菌落对检测结果进行判定，可作为检测的“金标准”。在检测过程中，如发现血清学方法检验结果为阴性的患者临床症状出现异常，可联合细菌学检测进行判断，进一步减少漏诊，从而提高检出率[7]。RBPT法和胶体金法2种血清学方法检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05)，2种血清学方法均操作简单快速，都适用于大规模筛查，实验室工作人员可根据情况灵活选用。

布鲁菌感染对人类身体健康损害严重，接触牛、羊及其污染的环境或和乳制品是其主要感染途径[8]。采用不同方法对布鲁菌进行检测，对提高该病诊断效率，及时进行有效的诊断、治疗，控制病情传染，以及提高患者生活质量具有积极的临床意义[9]。

综上所述，对于疑似布鲁菌感染的患者，临床上可积极展开血清学检验，并根据情况灵活选用RBPT法、胶体金法，使患者能够尽早确诊。血清学方法检测对布鲁菌有较高的诊断价值，但有假阳性结果，故临床应用中可采用血清学与细菌学联合检测的方法，以提高布鲁菌的阳性检出率。