健康人群尿液生化项目性别间差异及日内变异分析*

张凯，邹雨桐，尹逸丛，国秀芝，孙丹丹，李洪雷，邱玲

(中国医学科学院北京协和医院检验科，北京100730)

尿液生化分析常用的标本类型主要是随机尿和24 h尿。24 h尿收集繁琐，无法判断是否收集完整，易影响检测结果[1]。目前临床医生通常选择用随机尿替代24 h尿来快速筛查和评估相关疾病[2-5]，也有研究者用随机尿推算24 h尿的排泄量[6-7]。随机尿受浓缩和稀释的影响，各生化项目浓度的日内变异比较大，为了减小变异度，提高检验结果的可靠性，多采用尿肌酐(Cr)校准[8]，但很少有文献报道经尿Cr校准后各项目变异度的减小程度。本研究通过收集健康人1日内所有随机尿和24 h尿，分析经尿Cr校准后随机尿各项目日内变异的减小程度及其昼夜分布的特点，分析不同性别间24 h尿生化项目的差异，为临床医生对解读尿生化结果及选择尿液标本的类型提供参考。

1 材料与方法

1.1研究对象 2018年4月至5月在北京地区招募表观健康志愿者43名，排除剧烈运动和泌尿系统感染各1名，最终纳入志愿者41名，其中男性18名。入选标准：汉族，在北京地区居住满1年，留尿前3天清淡饮食，肝肾功能、血脂指标均在参考区间内。排除标准：近1月内有确诊疾病，服药，作息不规律或有熬夜、值夜班等情况，女性月经期，留尿期间有剧烈运动和情绪激动发生，血清<1.5 mL，有脂血、溶血和黄疸现象。本研究通过北京协和医院伦理委员会批准(伦理审查编号：ZS-1608)，研究对象均签署知情同意书。

1.2主要仪器与试剂 AU2700生化分析仪和AU5800生化分析仪(美国贝克曼库尔特公司)，尿液收集容器(魔桶MOTOM1，北京金寓润泽公司)，Cr试剂盒(酶法，四川迈克公司)，总蛋白(Pro)试剂盒(免疫比浊法，英国朗道公司)，微量清蛋白(mAlb)试剂盒(免疫比浊法，北京利德曼公司)，钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)(间接离子选择电极法)、钙(Ca)试剂盒(偶氮Ⅲ砷法)、磷(P)试剂盒(钼酸盐法)、尿素(Urea)试剂盒(酶法)、尿酸(UA)试剂盒(酶法)均购自美国贝克曼库尔特公司，以上检测项目均采用各自配套校准品校准。所有样本测定前后室内质控均在控，所有项目定期参加国家卫生健康委临床检验中心室间质评，结果良好。

1.3方法

1.3.1尿液样本留取及项目检测 为志愿者提供统一的量筒(精确到1 mL)，统一讲解留尿要求，所有尿液不添加防腐剂，置阴凉处保存，要求志愿者将24 h内所有的随机尿分别收集，标明时间和尿量，每次随机尿取2～3 mL用于检测，其余并入容器中计算24 h尿。所有标本分装冻存，于同一时间段内完成检测。在检测前尿液标本需平衡至室温，2 500×g离心10 min后经AU2700生化分析仪完成检测，随机尿和24 h尿检测项目为UA、Cr、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K、Na和Cl。

1.3.2血清留取及项目检测 留完24 h尿当日清晨空腹采集静脉血，经2 500×g离心10 min后分离血清，经AU5800生化分析仪完成肝肾功能和血脂等项目的测定。

2 结果

2.1基线资料 基线资料如性别、年龄、估算肾小球滤过率(eGFR，根据2009年CKD-EPIcr 公式计算)、随机尿量、24 h尿量等见表1。

表1 健康志愿者的基线资料

2.2尿生化项目经Cr校正前后CV的比较 UA、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K、Na、Cl经Cr校正前、后CV(%)分别为：47.66±13.9和31.20±13.02、54.45±19.63和29.10±17.30、58.39±21.59和40.38±22.44、41.26±17.48和23.42±9.38、56.10±17.79和44.41±16.13、61.58±22.21和35.81±17.59、51.75±18.28和40.45±18.42、41.94±14.80和41.03±13.46、40.02±14.68和39.87±18.40。Cr的CV(%)为53.09±18.48。UA、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K经校正后，CV均降低(P均<0.01)，而Na、Cl校正前、后CV差异无统计学意义(P均>0.05)。

2.324 h尿各项目在性别之间的比较 见表2。男、女性Cr水平差异有统计学意义(P<0.01)，其他项目差异均无统计学意义(P均>0.05)。

表2 24 h尿在不同性别间的比较

2.4尿生化项目的昼夜差异 见表3和图1。UA、Na、Cl、K有昼夜差异，白天均高于夜间(P均<0.01)，P也有昼夜差异，但夜间高于白天(P<0.01)，其他项目没有明显的昼夜差异(P均>0.05)。

表3 尿生化项目的昼夜差异

注：A～I分别为UA、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K、Na、Cl日内节律。

3 讨论

Cr是肌肉组织的代谢产物，肌肉质量相对恒定，而Cr可自由通过肾小球屏障且几乎不被肾小管重吸收，所以Cr排泄也相对恒定[9]。尿Cr对降低尿mAlb变异度是一个很好的校正参数[10]。本研究显示，经Cr校正后多个项目的变异度均下降，但Cr校正前后Na、Cl的CV差异无统计学意义；可能原因是Na排出受摄入量的多少而增减，即多吃多排，少吃少排，不吃不排，而体内Cl的变化基本与Na一致[11]。

男女间Cr差异有统计学意义(P<0.01)，所以用Cr校准时要根据性别设置参考区间或医学决定水平等。男性体质指数(BMI)>女性，Urea/Cr与BMI具有相关性(r=0.790)[12]；本研究中男女间Urea比较的P值为0.052，接近检验水准0.05，所以存在差异的可能性较大，也应该考虑到性别的差异。

本研究显示，Na、Cl、K、UA存在昼夜差异，白天排泄高于夜间，与文献报道一致[13-16]。P也有昼夜差异，表现为昼低夜高，与Touitou等[12]的研究报道一致。若模仿日本静冈县大学实验按照07：30—12：30(上午)、12：30—17：30(下午)、17：30—22：30(晚上)、22：30—07：30(夜间)分组，P/Cr(mmol/g)均值分别为12.47、13.27、15.08、15.16，则与该实验的P排泄率(mg/h)的数据趋势一致[17]。Ix等[18]研究也显示，健康人P夜间排泄率高于白天。本研究显示，Pro、mAlb、Urea、Ca没有明显的昼夜差异；但时间段划分、人群选择或计算方式可能影响结论[17]。若某些项目具有排泄节律，我们则要选择能更好反映患者病情的特定时段来采集尿液，并提醒临床医生合理解读检验结果。

本研究存在的不足之处主要包括2点。(1)凌晨1：00—4：00志愿者大多处于睡眠状态，样本量较少，分别只有2、5、2、2例；为减小抽样误差，将1：00—2：00和3：00—4：00样本量分别合并，图1E和图1F中Ca、P在3：00—4：00与前后2个点差异较大，可能出现了较大的抽样误差，还需再次验证。(2)本研究过程较复杂、耗时，自愿者不易招募，样本量偏少，男女比例不均；激素波动对部分离子类随机尿产物会产生影响，按昼夜分组可能掩盖此类影响，所以还需增加样本量，评估激素对特定项目日内变异的影响。

本研究只分析了健康人相关数据，后期还会招募处于慢性肾病各期的患者，分析各期患者各项指标的分布特点及与健康人之间的差异。