废弃菌渣中纤维素降解细菌的筛选及其降解特性分析

王雪郦 申开卫 雷超 邱树毅

摘要：【目的】研究羧甲基纖维素钠（CMC-Na）和纤维素粉对纤维素降解细菌筛选结果的影响，为废弃食用菌菌渣的综合利用提供参考依据。【方法】分别以CMC-Na和纤维素粉为唯一碳源，采用刚果红染色法从废弃菌渣中筛选出具有纤维素降解性能的细菌，利用形态学和分子生物学对其进行鉴定，通过酶活力测定和滤纸崩解试验对各菌株的纤维素降解特性进行对比分析。【结果】从CMC-Na固体培养基分离纯化获得的34株细菌中有7株具有较好的纤维素降解性能，经鉴定主要是芽孢杆菌（Bacillus sp.）、枯草芽孢杆菌（B. subtilis）和解淀粉芽孢杆菌（B. amyloliquefaciens），而从纤维素粉固体培养基分离纯化获得的36株细菌中有7株具有较好的纤维素降解性能，经鉴定主要是高山芽孢杆菌（B. altitudinis）、甲基营养型芽胞杆菌（B. methylotrophicus）、解淀粉芽孢杆菌、解淀粉芽胞杆菌植物亚种（B. amyloliquefaciens subsp. plantarum）、沼泽芽孢杆菌（B. vallismortis）、贝莱斯芽孢杆菌（B. velezensis）和芽孢杆菌。通过酶活力测定试验和滤纸条崩解试验发现，g31菌株在7 d内能将滤纸崩解成糊状，该菌株具有最高的滤纸酶（FPase）和内切葡聚糖酶（CMCase）活力，分别为33.14和394.41 U/mL，而C23菌株具有较高的β-葡萄糖苷酶（β-Gase）活力，为118.12 U/mL，g29菌株具有较高的外切葡聚糖酶（Cex）活力，为1.22 U/mL。【结论】以纤维素粉为碳源分离筛选得到的纤维素降解细菌种类更丰富，具有更好的滤纸崩解效果和更高的酶活性能，可为纤维素降解提供优质的菌种资源。

关键词： 食用菌菌渣;碳源;纤维素降解细菌;筛选;降解特性

中图分类号： S646.099                      文献标志码： A 文章编号：2095-1191（2021）11-2913-10

收稿日期：2021-04-08

Screening and characteristics analysis of degradation of cellulose degrading bacteria from waste edible fungus residue

WANG Xue-li1，2，3， SHEN Kai-wei1，2， LEI Chao1，2， QIU Shu-yi1，2*

（1Guizhou Key Laboratory of Fermentation Engineering and Biological Pharmacy， Guiyang  550025， China;

2College of Liquor and Food Engineering，Guizhou University， Guiyang  550025， China;

3College of Life Science，Guizhou University，Guiyang  550025， China）

Abstract：【Objective】To study the influence of carboxymethyl cellulose sodium（CMC-Na） and cellulose powder on the screening results of cellulose degrading bacteria， and provide a basis for the comprehensive utilization of waste edible fungus residue. 【Method】In this study，CMC-Na and cellulose powder were used as the only carbon sources， the cellulose degrading bacteria were screened from the edible mushroom slag by Congo red staining method，which were identified by morphology and molecular biology，and the cellulose degradation characteristics of each strain were compared and analyzed by enzyme vitality determination and filter paper disintegrate test. 【Result】The results showed that 34 bacteria were isolated and purified from the CMC-Na，7 of them had good cellulose degradation performance，which were mainly identified as Bacillus sp.， B. subtilis， B. amyloliquefaciens. While 36 strains were isolated and purified from the cellulose powder solid medium，7 of them had good cellulose degradation performance，there were mainly identified as B. altitudinis， B. methylotrophicus， B. amyloliquefacien， B. amyloliquefaciens subsp. plantarum， B. vallismortis， Bacillus sp. Through the enzyme activity determination test and the filter paper strip disintegration test，it was found that the g31 strain could disintegrate the filter paper into a paste within 7 d，and this strain had the highest filter paper enzyme（FPase） activityand endoglucanase （CMCase） activity，the enzyme activities reached 33.14 and 394.41 U/mL，while the C23 strain had a higher β-glucosidase （β-Gase） activity，which was 118.12 U/mL，g29 strain had a higher exo-glucanaanaose carbohydrase （Cex）activity，which was 1.22 U/mL. 【Conclusion】The study shows that the cellulose degrading bacteria isolated and screened with cellulose powder as carbon source are more abundant， have better filter paper disintegration effect and higher enzyme activity， which can provide high-quality strain resources for cellulose degradation.

Key words： waste edible fungus residue; carbon source; cellulose degrading bacteria; screening; degradation chara-cteristic

Foundation item： Guizhou Science and Technology Support Project（Qiankehezhicheng〔2020〕1Y116）， Qiankehezhicheng〔2020〕1Y154）; Guizhou Science and Technology Platform and Talent Team Planning Project（QKHPTRC〔2018〕5251）; Guizhou Fermentation Engineering and Baijiu Brewing Talent Base Project（Qianrenlingfa〔2018〕3）

0 引言

【研究意義】食用菌产业被纳入《贵州省十大千亿级工业产业振兴行动方案》，全省食用菌种植规模从2017年10亿棒增长至2019年40亿棒。食用菌采摘后残留下大量的培养基质——菌渣（刘晓梅等，2015），菌渣库存量随食用菌产量的增长而剧增，现已成为大宗农业固体有机废弃物（黄武强和周红，2019;谢光辉等，2019），如何有效利用食用菌菌渣成为食用菌产业中亟待解决的关键问题之一。研究表明，食用菌菌渣中含有丰富的糖、蛋白质和钙、磷、钾、铁、镁等营养物质（李勇等，2021;刘爱红，2021），具有非常可观的潜在利用价值，随意堆放或低效应用不仅会给环境带来负面影响，还会造成资源浪费（黄小云等，2019;王艮梅等，2019）。目前废弃菌渣最主要的利用途径是经发酵制成有机肥料，但由于菌渣中含纤维素晶体结构，受其高能氢键的影响导致菌渣难以被降解，带来堆肥过程腐熟周期长、有机物利用率低等问题（周锦锦，2016;王丽萍等，2018）。为解决上述问题，有学者在堆肥过程中接种能分泌纤维素酶的外源微生物，将菌渣中难降解的纤维素、木质素降解为寡糖、纤维二糖、葡糖糖和还原糖等物质（张野等，2020），以加快堆肥过程中纤维素的降解，缩短堆肥时间，提高堆肥品质（童江云等，2018;李林超等，2019）。因此，有关纤维素降解菌的分离、筛选、菌种资源库建立及纤维素酶解机制研究已成为当前农业资源再利用的一大热点。【前人研究进展】目前已报道的纤维素降解菌主要有细菌、真菌和放线菌（刘晓飞等，2020;李婷等，2021;孙会刚等，2021），针对纤维素降解真菌的报道较多。卓玛曲措等（2020）研究纤维素降解真菌SJL-2的最佳产酶条件，结果表明外源添加碳源糊精和氮源氯化铵可增强菌株SJL-2的产酶能力，最佳产酶pH为6.5，最佳产酶温度为30 ℃;曹永佳等（2021）研究添加有机营养、无机盐、金属离子和表面活性剂等对白腐真菌树舌灵芝（Ganoderma applanatum）、毛栓孔菌（Trametes hirsuta）和木蹄层孔菌（Fomes fomentarius）漆酶、滤纸纤维素酶、木聚糖酶活性的影响，结果表明3种真菌分泌的木质纤维素酶活性均较高，均可作为木质纤维生物质预处理的备选菌株，而Cu2+的添加可提高漆酶活性，表面活性剂则对3种酶活的诱导作用均十分显著。纤维素降解细菌因发酵产酶时间短、发酵条件便于控制、耐受性（耐酸、耐碱）强、最适发酵温度范围广等优点具有潜在的工业化发展价值（梁倩等，2019），目前报道的纤维素降解细菌多为假单胞菌属（Pseudomonas）（Menéndez et al.，2015）、类芽孢杆菌属（Paenibacillus）（万文结等，2017）、芽孢杆菌属（Bacillus）（常帆等，2018）等。不少学者开始从极端环境中筛选纤维素降解细菌，孟建宇等（2021）采用富集培养和纯培养法从内蒙古西部地区10 ℃低温环境下分离出36株低温纤维素降解细菌，其中以假单胞菌属、鞘氨醇杆菌属（Sphingobacterium）和假苍白杆菌属（Pseudochrobactrum）为主要的纤维素降解细菌;武肖莎等（2021）从50～70 ℃高温堆肥环境中筛选出1株具有高效降解木质纤维素的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtils），研究发现该菌具有发酵启动快、升温迅速、高温持续时间长、木质纤维素降解充分等优势。实际上微生物降解纤维素的能力不仅与酶自身特性有关，还与培养基成分有关（黄春凯等，2015）。张晶等（2007）发现培养基的组成对筛菌结果产生不同程度的影响;唐玉佳等（2021）筛选出 1株高纤维素酶活性菌株弗村假单胞菌（Pseudomonas vranovensis）N32，对菌株N32的酶学性质研究发现当pH为4.0、摇床速度为140 r/min、培养温度为30 ℃、装液量为125 mL时酶活力最强;钟斌等（2021）从沼渣堆肥中分离出1株纤维素降解菌产碱杆菌（Alcaligenes faecalis Strain）F3，并对其产酶条件进行优化，研究发现当培养温度、pH、培养时间和接种量分别取35 ℃、7.0、3 d和2%时羧甲基纤维素酶和滤纸酶活性达最高，分别为2.63和2.23 U/mL。【本研究切入点】目前，在纤维素降解菌的研究中常用碳源主要有羧甲基纤维素钠（CMC-Na）（王海滨等，2015;王伟等，2019）、纤维素粉（刘最等，2018;王天生等，2018）和微晶纤维素（孟建宇等，2019，2020），而有关CMC-Na和纤维素粉对纤维素降解细菌筛选结果的影响研究尚未见文献报道。【拟解决的关键问题】以废弃食用菌菌渣为研究对象，研究CMC-Na和纤维素粉对纤维素降解菌筛选结果的影响，为废弃食用菌菌渣的综合利用提供参考依据。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

1. 1. 1 样品来源及主要试剂 菌渣取自贵州省某食用菌生产基地。细菌基因组DNA提取试剂盒购自生工生物工程（上海）股份有限公司;CMC-Na、硝酸钠、硫酸镁、氯化钠、磷酸氢二钠、氯化钙、无水磷酸二氢钾、三氯化铁、冰乙酸、刚果红、3，5-二硝基水杨酸、氢氧化钠和偏重亚硫酸钠等试剂均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司;纤维素粉、纯化琼脂粉、蛋白胨和酵母粉等试剂均为生化试剂，购自上海博微生物科技有限公司。

1. 1. 2 主要培养基 CMC-Na固体培养基：CMC-Na 15.0 g，蛋白胨10.0 g，酵母粉5.0 g，NaCl 5.0 g，KH2PO4 1.0 g，MgSO4 0.2 g，琼脂20.0 g，蒸馏水1000 mL，pH自然（张梦君等，2019）。

纤维素粉固体培养基：纤维素粉15.0 g，其他成分同上述CMC-Na固体培养基。

滤纸条崩解培养基：KH2PO4 1.0 g，NaCl 0.1 g，FeCl3·6H2O 0.01 g，MgSO4·7H2O 0.3 g，NaNO3 2.5 g，CaCl2·6H2O 0.1 g，蒸馏水1000 mL。滤纸条规格为2 cm×1.5 cm，使用前参照王伟等（2019）的方法对滤纸进行预处理。

牛肉膏蛋白胨固体培养基：参照雅男（2017）的培养基配方，去掉琼脂后即得牛肉膏蛋白胨液体培养基。

液体产酶培养基：（NH4）2SO4 1.4 g，KH2PO4 2.0 g，CaCl2 0.3 g，MgSO4 0.3 g，FeSO4·7H2O 0.005 g，MnSO4 0.0016 g，ZnSO4·7H2O 0.0012 g，COCl2 0.002 g，蛋白胨5.0 g，碳源对应选用CMC-Na（纤维素粉）5 g，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。

以上培养基均置于121 ℃下灭菌20 min。

1. 2 试验方法

1. 2. 1 纤维素降解细菌分离和纯化 称取菌渣25 g，置于装有225 mL无菌生理盐水的三角瓶中，于30 ℃摇床中振荡培养30 min（120 r/min），制得10-1浓度梯度。选择10-4、10-5和10-6 3个浓度梯度，分别取100 μL涂布于CMC-Na固体培养基和纤维素粉固体培养基上，每个浓度梯度重复3次。将涂布好的培养基置于30 ℃恒温培养3 d，挑选出不同菌落形态的菌株再次进行划线培养，直至出现纯的单菌落为止，将纯化后的单菌株接种于保藏培养基，置于4 ℃下保存备用。

1. 2. 2 纤维素降解细菌筛选 将分离纯化后的菌株分别接种至CMC-Na固体培养基和纤维素粉固体培养基中，每株菌株在同一培养皿中点接3次，将其置于30 ℃下培养3 d后取出进行刚果红染色，染色过程参照王翀等（2019）的操作，测量并计算透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值，选择D/d值较大的菌株进行后续研究。

1. 2. 3 纤维素降解细菌鉴定

1. 2. 3. 1 形态学鉴定 将菌株点接在牛肉膏蛋白胨固体培养基上，置于30 ℃下恒温培养3 d，观察并记录单菌落的形态特征。同时，挑取少量菌落制成载玻片进行革兰氏染色，利用奥尼巴斯CX31显微镜观察其细胞形态。

1. 2. 3. 2 分子生物学鉴定 将菌株接种到装有已灭菌的50 mL牛肉膏蛋白胨液体培养基中，置于30 ℃、180 r/min条件下振荡培养48 h。按照细菌基因组DNA提取试剂盒操作说明提取DNA，采用通用上游引物27F（5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'）和下游引物1492R（5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'）对纤维素降解细菌进行PCR扩增。PCR扩增程序：94 ℃预变性5 min;94 ℃ 1 min，55 ℃ 1 min，72 ℃ 2 min，进行35个循环;72 ℃延伸10 min，4 ℃保存。将PCR扩增产物送至生工生物工程（上海）股份有限公司进行测序，测序结果拼接后输入NCBI数据库，通过BLAST进行同源比对分析，利用MEGA 7.0构建系统发育进化树。

1. 2. 4 酶活力测定试验

1. 2. 4. 1 粗酶液制备 将菌株接种于液体产酶培养基中，置于30 ℃、120 r/min摇床中振荡培养4 d，将发酵液离心（12000 r/min，10 min）后的上清液即为粗酶液。

1. 2. 4. 2 葡萄糖标准曲线绘制 向具塞试管中分别加入1 mg/mL的葡萄糖标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2和1.4 mL后，加蒸馏水至总体积为2.0 mL，向各试管中加入2.0 mL 3，5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）摇匀后沸水浴5 min，取出冷却后用蒸馏水定容至20 mL，在波长540 nm处测定各试管中的OD值。以葡萄糖含量（mg）为横坐标、OD值为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线，拟合得到回归直线方程：y=0.3029x-0.0153，R2=0.9949。

1. 2. 4. 3 酶活力测定与计算 参照Miller（1959）、刘晓梅（2015）的方法，对菌株的滤纸酶（FPase）、外切葡聚糖酶（Cex）、内切葡聚糖酶（CMCase）及β-葡萄糖苷酶（β-Gase）进行活力测定。

1. 2. 5 纤维素降解细菌的滤纸条崩解试验 将菌株接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，经30 ℃、180 r/min振荡培养24 h后制成种子悬浮液，经镜检菌种量约为5×108 CFU/mL。将种子悬浮液按1%的接种量接入滤纸条崩解培养基中，置于30 ℃、120 r/min的恒温振荡器中培养10 d，同時以1%的无菌水代替种子悬浮液接入相同培养基中作为对照，每菌株重复3次作为平行，定期观察并记录滤纸的崩解情况（吴庆珊，2018）。

2 结果与分析

2. 1 纤维素降解细菌的分离筛选结果

分别以CMC-Na和纤维素粉为唯一碳源，从废弃菌渣中分离纯化出70株纤维素降解细菌，其中CMC-Na固体培养基中有34株，命名为C1～C34;纤维素粉固体培养基中有36株，命名为g1～g36。将上述菌株分别点接到对应固体培养基中，培养3 d后经刚果红染色试验观察透明圈大小。结果发现共有45株菌株出现明显的透明圈，其中CMC-Na培养基中有16株，纤维素粉培养基中有29株。部分菌株的刚果红透明圈如图1所示，各菌株透明圈直径（D）、菌落直径（d）及其D/d值如表1所示。由表1可知，CMC-Na培养基中透明圈D/d值小于3.00的菌株占所筛菌株总数的56%，而纤维素粉培养基中透明圈D/d值小于3.00的菌株占所筛菌株总数的76%。CMC-Na培养基中透明圈D/d值平均为3.04，最大D/d值为5.26;而纤维素粉培养基中D/d值平均为2.66，最大D/d值达7.87，表明不同菌株之间降解纤维素的能力有所区别。

2. 2 纤维素降解细菌的鉴定结果

2. 2. 1 形态学鉴定结果 选择D/d值≥3.00的纤维素降解细菌共14株，置于30 ℃条件下培养3 d后，记录各菌株的形态特征，挑取少量菌落进行革兰氏染色。单菌落形态特征描述如表2所示，所有菌株革兰氏染色结果均显阳性。

2. 2. 2 分子生物学鉴定 将筛选的14株纤维素降解细菌PCR产物送至生工生物工程（上海）股份有限公司进行测序，把测序所得序列输入NCBI数据库进行比对，当16S rDNA序列相似性超过97%时即可认定为属内同种（韩梦颖等，2017;程鹏等，2019），具体比对结果如表3所示。由表3可知，从CMC-Na固体培养基中筛选出的菌株主要包括芽孢杆菌（Bacillus sp.）、枯草芽孢杆菌（B. subtilis）和解淀粉芽孢杆菌（B. amyloliquefaciens），而从纤维素粉固体培养基中筛选出的菌株主要有高山芽孢杆菌（B. altitudinis）、甲基营养型芽胞杆菌（B. methylotrophicus）、解淀粉芽孢杆菌、解淀粉芽胞杆菌植物亚种（B. amyloli-quefaciens subsp. plantarum）、沼泽芽孢杆菌（B. vallismortis）、贝莱斯芽孢杆菌（B. velezensis）和芽孢杆菌。

2. 3 酶活力测定结果

将筛选出的14株菌株进行产酶试验，对各菌株的粗酶液进行FPase、Cex、CMCase和β-Gase活力测定，结果见表4。从CMC-Na固体培养基筛选的7株菌株中，C17菌株的FPase酶活力高于其他菌株，C2菌株的CMCase酶活力高于其他菌株，C23菌株的Cex和β-Gase酶活力高于其他菌株;所筛菌株的FPase、CMCase、Cex和β-Gase酶活力平均值分别为22.00、200.88、0.54和68.63 U/mL。从纤维素粉固体培养基筛选的7株菌株中，g31菌株的FPase、CMCase和β-Gase酶活力均高于其他菌株，g29菌株的Cex酶活力高于其他菌株;所筛菌株的FPase、CMCase、Cex和β-Gase酶活力平均值分别为25.50、281.44、0.70和74.42 U/mL。对比表4中各菌株的酶活力和表1中各菌株的刚果红透明圈D/d值，研究发现刚果红透明圈的大小与酶活力之间并无明显相关性。

2. 4 滤纸条崩解试验结果

选择D/d值≥3.00的纤维素降解细菌共14株置于滤纸条崩解培养基中培养10 d，滤纸的崩解效果如表5所示。以CMC-Na为碳源筛选的7株菌株中，C2、C14和C23 3株菌株对滤纸的降解效果较明显，滤纸出现糊状，但并未完全崩解，C17菌株处理后的滤纸仅出现弯曲，而C3、C9和C16 3株菌株对滤纸的降解作用较小，濾纸边缘因变毛而出现不完整。以纤维素粉为碳源筛选的7株菌株中，g31菌株对滤纸的降解效果最好，滤纸在第7 d已完全崩解成糊状，g19和g25 2株菌株处理后的滤纸出现糊状，但并未完全崩解，g7、g24和g29 3株菌株处理后的滤纸仅出现弯曲，并未出现明显降解，而g27菌株对滤纸的降解作用较小，滤纸边缘因变毛而出现不完整。

3 讨论

本研究分别以CMC-Na和纤维素粉为碳源从废弃食用菌菌渣中筛选纤维素降解细菌，结果表明利用纤维素粉为碳源时筛选出的纤维素降解细菌种类更多，滤纸崩解试验更明显，酶活力更高。主要是因为CMC-Na在弱酸性环境下不稳定，常以沉淀形式存在，从而影响了纤维素降解菌对碳源的利用，导致菌株纤维素降解能力较低。

本研究所筛菌株在属水平上均隶属于芽孢杆菌属，与薛藩（2019）、毛婷等（2020）的研究结果一致，芽孢杆菌产纤维素酶系中内切纤维素酶活性相对其他菌株较高，因其在不利的条件下可形成芽孢，能适应高温、酸碱环境。但从种水平上来说，以CMC-Na为碳源筛选的纤维素降解细菌种类较少，只有枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，而以纤维素粉为碳源筛选出的纤维素降解细菌主要有高山芽孢杆菌、甲基营养型芽胞杆菌、解淀粉芽孢杆菌、解淀粉芽胞杆菌植物亚种、沼泽芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌，研究结果表明以纤维素粉为碳源分离筛选得到的纤维素降解细菌种类更丰富。郑丽等（2017）从木薯生境中筛选出酶活力较高的解淀粉芽孢杆菌，岳丹等（2018）从土壤中筛选出具有高效降解纤维素性能的枯草芽胞杆菌，梁倩等（2019）从凉茶中药渣堆肥和黑龙江玉米地土壤中筛选出纤维素酶高产菌株甲基营养型芽孢杆菌。本研究首次报道了高山芽孢杆菌和沼泽芽孢杆菌具有较好的纤维素降解能力。

此外，本研究发现刚果红透明圈D/d值与纤维素酶活力以及纤维素降解能力的强弱并非呈正相关，与程鹏等（2019）的研究结果不一致。以往纤维素降解菌的筛选多依赖刚果红染色法，但于慧娟和郭夏丽（2019）提出该方法容易出现假阳性现象，因此高效纤维素降解菌的筛选还得以酶活力的定量测定为依据。本研究所筛纤维素降解细菌相比目前已报道的纤维素降解菌而言，具有较高的纤维素酶活，C14菌株枯草芽孢杆菌的CMCase酶活力高达250.99 U/mL，明显高于陈丽燕等（2011）筛选的CM2菌株产生的167.17 U/mL和王伟等（2019）筛选的YDL3菌株产生的26.87 U/mL，g31菌株贝莱斯芽孢杆菌的CMCase酶活力高达394.41 U/mL，明显高于童江云等（2018）筛选的DCB2菌株产生的2.29 U/mL。

针对各菌株相关酶活力的研究还发现酶活力不仅在不同种菌株间有所差别，即使在同一种菌株间也存在明显差异。从CMC-Na固体培养基中筛选出的C9、C16、C17和C23等4株菌株经鉴定均为解淀粉芽孢杆菌，但其同一酶活也存在明显差异，与张悦（2019）研究发现2株菌株酶活有差异的结果一致。王丽萍等（2018）提出同一菌株不同酶活性的差异反映出菌株对纤维素的降解机理和作用方式的特性。研究后续利用滤纸崩解试验对各菌株的纤维素降解性能进行验证，发现所筛菌株均对滤纸条产生不同程度的崩解效应，且滤纸条的崩解效果与酶活力尤其是CMCase酶活力呈正相关。本研究不仅为纤维素降解提供了优质的菌种资源，也为食用菌菌渣的综合利用提供理论依据和实践基础，后续将开展复合菌株的纤维素降解性能研究，探索菌株间的协同作用机制。

4 结论

以纤维素粉为碳源分离筛选得到的菌株种类更丰富，具有更好的滤纸崩解效果和更高的酶活性能;刚果红透明圈D/d值与纤维素酶活力及纤维素降解能力并非呈正相关。本研究可为纤维素降解提供优质的菌种资源。

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基金项目：贵州省科技支撑项目（黔科合支撑〔2020〕1Y116），黔科合支撑〔2020〕1Y154）;贵州省科技平台及人才团队计划项目（黔科合平台人才〔2018〕5251）;贵州省发酵工程与白酒酿造人才基地项目（黔人领发〔2018〕3号）

通讯作者：邱树毅（1963-），https：//orcid.org/0000-0002-9290-1660，博士，教授，主要从事发酵工程研究工作，E-mail：syqiu@gzu.edu.cn

作者简介：王雪郦（1986-），https：//orcid.org/0000-0003-0622-813X，博士，高级实验师，主要从事应用生物技术研究工作，E-mail：xlwang2@gzu.edu.cn

王雪郦（1986-），博士，高级实验师，主要从事应用生物技术研究工作。主持或作为主要成员参与国家重点研发项目“喀斯特山区农村饮用水消毒与污水处理关键技术”、国家自然科学基金项目“基于适配体的纳米催化调控剂其对食品农药残留检测新方法研究”“葡萄酒发酵过程中标识Hansenisapora菌群活力关键靶标分子筛选及细胞死亡过程解析”及贵州省科技支撑项目“贵州喀斯特地区农村饮用水细菌/病原菌快速检测及杀灭技术的研发”“贵州食用菌废弃菌棒肥料化高效利用关键技术研究及应用”等科研项目20余项。获贵州省科技进步奖二等奖1项，申请国家发明专利26项，授权实用新型专利4项，参与制定团体标准2项;在《Food Chemistry》《Microchimica Acta》《南方农业学报》等国内外期刊上发表论文17篇。