血清FIB及TSP-1水平与重症肺炎支原体肺炎患儿预后相关性分析

白 玉，白东琴

(延安市人民医院儿科，陕西 延安 716000)

近年来随着社会发展和环境变化，由肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae，MP)感染引起的肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP)的发病率呈逐年增高的趋势，其住院率占儿童社区获得性肺炎的40%。若未得到及时有效的治疗可进展为重症肺炎，患儿伴有呼吸衰竭，进而出现多器官功能障碍、低血压、休克等症状，给患儿生存和预后带来极大挑战[1]。然而有报道称[2]，近年来随着大环内酯类耐药菌的增加，重症支原体肺炎患病率及病死率逐年升高，严重威胁患儿的健康和生命安全。因此，如何早期快速有效地识别重症支原体肺炎显得尤为必要。

有研究[3]表明，重症肺炎患儿伴随着凝血、纤溶功能障碍，进行凝血指标和血小板参数测定可尽早发现凝血功能异常。作为血清中含量较多的一种蛋白，纤维蛋白原(fibrinogen，FIB)能够对急性炎症期作出反应，通过介导人体血小板凝集影响血液的黏滞度。血小板反应蛋白(thrombospondin-1，TSP-1)是一种细胞外基质糖蛋白，可有效调节血管生成，同时具有抑制内皮细胞迁移和细胞外基质中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)释放的作用[4]。另有研究发现[5]，TSP-1在急性缺血性脑卒中患者血浆中高表达，且TSP-1的表达水平越高，患者预后越差，提示检测TSP-1有助于急性缺血性脑卒中的早期诊断和预后评估。因此，通过检测重症和轻症MPP患儿血清中FIB与TSP-1蛋白表达水平，分析两者间是否存在差异表达，进一步探讨血清FIB与TSP-1蛋白表达水平与重症MPP患儿的转归及预后的相关性就尤为重要。本研究采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent essay,ELISA)检测重症和轻症MPP患儿血清中FIB、TSP-1表达情况，探讨FIB、TSP-1表达水平与重症MPP患儿预后的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年1月至2020年12月在延安市人民医院儿科确诊并治疗的重症MPP患儿80例作为观察组，其中男39例，女41例，年龄0.5～14岁，平均年龄(5.40±1.70)岁。

纳入标准：①中国儿童肺炎支原体感染实验室诊断规范和临床实践专家共识(2019年版)[6]；②重症MPP患儿根据儿童社区获得性肺炎管理指南(2013修订)(上)[7]；③单次MP-IgM抗体滴度≥1：160，且PCR检测鼻咽部吸取物MP-DNA拷贝数≥2.5×103/L；④所有患儿家属或监护人知情并同意。

排除标准：①既往患有凝血系统疾病、自身免疫系统疾病及心、肝、肾功能不全者；②既往有反复呼吸道感染、肺结核、哮喘等其他呼吸系统疾病病史者；③正在服用抗血小板或抗凝药物及影响免疫调节药物者；④病例资料不完善者；⑤实验室诊断假阳性者。

另选取同期本院诊治的轻症MPP患儿80例作为对照组，其中男42例，女38例，年龄0.5～14岁，平均年龄(5.80±1.5)岁。2组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

本研究均经过医院医学伦理委员会批准以及征得家属的知情同意。

1.2 主要试剂与仪器

FIB测定试剂盒(上海江莱生物科技有限公司)，TSP-1 (enzyme-linked immunosorbent essay,ELISA)测定试剂盒(江莱生物，上海)。

1.3 研究方法

1.3.1 样品采集 采集MPP患儿清晨空腹静脉血3 mL，室温静置15 min后，1500 r/min，离心20 min，取上层血清，置于-80℃冰箱保存备用。采用ELISA检测血清FIB、TSP-1表达水平，操作步骤严格按照试剂盒说明书操作。

1.3.2 评价指标 分别记录所有观察对象的血小板计数(platelet，PLT)、平均血小板体积(MPV)、白细胞计数(white blood cell count，WBC)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、中性粒细胞计数(neutrophil count，NEU)、C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)、乳酸脱氢酶(lactic dehydmgenase，LDH)、D-二聚体及红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate，ESR)等指标。

肺炎严重指数(pneumonia severity index,PSI)：对所有研究对象进行PSI评价，分别记录患儿性别、年龄、体温、合并症及血液FIB、TSP-1表达水平等相关指标，评分越高表示肺炎越严重。

1.3.3 预后判断 按病情转归情况将重症MPP患儿分为好转组53例(临床症状、体征及实验室检查指标均支持病情好转，转入普通呼吸病房或治愈直接出院)和恶化组27例(症状、体征及实验室检查指标提示病情加重，放弃治疗自动出院或死亡)。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 2组患儿血清常规指标比较

与对照组比较，观察组患儿PLT、MPV、D-二聚体、WBC、NEU、LDH、ESR、CRP水平和PSI评分升高，ATⅢ水平降低，差异有统计学意义(P<0.05，表1)。

表1 2组观察对象各项指标比较

2.2 2组患儿血清FIB、TSP-1表达水平比较

与对照组MPP患儿比较，观察组MPP患儿血清中FIB、TSP-1表达水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05，表2)。

表2 2组患儿血清FIB与TSP-1表达水平比较

2.3 不同预后重症MPP患儿血清中FIB、TSP-1表达水平及PSI评分

与好转组比较，恶化组患儿血清FIB、TSP-1表达水平及PSI评分均升高，差异有统计学意义(P<0.05，表3)。

表3 不同预后重症MPP患儿血清中FIB、TSP-1表达水平及PSI评分

2.4 重症MPP患儿血清FIB、TSP-1表达水平与PSI评分相关性

相关性分析显示，重症MPP患儿血清FIB表达水平与PSI评分呈正相关(r=0.557，P<0.05)，TSP-1表达水平与PSI评分呈正相关(r=0.594，P<0.05，图1)。

图1 重症MPP患儿血清FIB、TSP-1表达水平与PSI评分相关性

2.5 血清FIB、TSP-1对重症MPP患儿预后不良的预测价值

如图2所示，血清FIB预测重症MPP患儿预后不良曲线下面积为0.876，截断值为6.956，灵敏度为74.07%，特异性为86.79%。血清TSP-1预测重症MPP患儿预后不良曲线下面积为0.865，截断值为32.781，灵敏度为70.37%，特异度为90.57%。血清FIB、TSP-1联合预测重症MPP患儿预后不良曲线下面积为0.920，灵敏度为88.89%，特异度为81.13%。

图2 血清FIB、TSP-1对重症MPP患儿预后不良的预测价值

3 讨论

FIB是肝脏合成的糖蛋白，是人体重要的凝血因子，在体内主要参与凝血过程，是检测凝血功能指标之一，水平升高可以预测机体多种生理及病理状况。有研究表明[8]，重症肺炎患者血清中FIB表达水平高于健康组，且与肺炎严重指数呈正相关。沈逍雁等[9]研究表明，FIB在重症肺炎儿童血清中表达水平升高，与PSI呈显著正相关，对重症患儿病情变化与预后评估有一定价值。本研究结果表明，与轻度组MPP患儿比较，重症组MPP患儿血清中FIB表达水平明显升高，与上述研究结果一致，提示FIB与MPP患儿病情严重程度有关。

TSP-1是一种多功能的细胞外基质蛋白，由多个细胞分泌，包括血小板、白细胞和内皮细胞，可与特定结构域的多个不同细胞表面受体、蛋白质、蛋白多糖相互作用，发挥不同的生物学效应[10]。TSP-1作为抑制血管生成的重要的细胞外基质糖蛋白，在调节细胞增殖、黏附及血管生成中发挥重要的抑制作用。白洁明等[11]研究表明，TSP-1在多囊卵巢综合征大鼠模型中对血管内皮生成因子的表达有影响，可能通过调节血管内皮生成因子发挥治疗囊卵巢综合征的作用。另有研究表明，TSP-1还与炎症反应及免疫应答有关，如Talme等[12]研究表明，甲氨蝶呤通过TSP-1/TSP-1受体相互作用的途径来调节免疫应答，而发挥治疗类风湿关节炎的作用。张濛等[13]研究表明，TSP-1在系统性红斑狼疮患者中低表达，在疾病过程中发挥免疫负调节功能，抑制自身免疫炎症的发展和自身抗体的产生。本研究结果表明，重症组MPP患儿血清中TSP-1表达水平比轻症组MPP患儿显著升高，提示TSP-1与肺炎病情的发展程度有关，其机制可能与TSP-1参与炎症反应及免疫应答有关。

重症肺炎因呼吸衰竭导致的缺氧、酸中毒、过度炎症反应等因素造成血管内皮细胞损伤，进而导致纤溶及凝血等多种病理改变，恶化病情。随着炎症因子不断释放，血管内皮细胞过度缺氧，激活凝血纤溶系统并提升FIB、TSP-1合成水平。另外，从病原学角度分析，支原体本身能够直接损伤血管内皮细胞，激活凝血系统，导致血液粘滞度升高。本研究重症组MPP患儿血清中FIB、TSP-1表达水平升高，可能与过度炎性反应和凝血纤溶系统激活有关。图4数据显示，重症MPP患儿血清FIB、TSP-1表达水平与PSI评分呈正相关性，提示FIB、TSP-1水平与MPP患儿的病情严重程度相关。通过ROC曲线发现，重症组MPP患儿血清FIB、TSP-1联合预测重症MPP患儿预后不良曲线下面积为0.920，灵敏度为88.89%，特异度为81.13%。提示血清FIB、TSP-1水平对于预测重症MPP患儿不良预后有一定价值。

本研究发现FIB、TSP-1在重症肺炎支原体肺炎患儿血清中明显高表达，与患儿疾病严重程度相关，未来很有可能作为预测重症MPP患儿预后不良潜在的血清标志物。该研究的不足之处为临床样本数量少有关，需要扩大样本量进行进一步研究。